本发明专利技术涉及一株石油烃降解菌及其应用，该石油烃降解菌JK2C，分类名为假单胞菌（Pseudomonas sp.），已于2015年01月19日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.10366。本发明专利技术菌株适应油田区的高油污染、高盐和偏碱性的土壤环境，对石油污染土壤有很强的降解能力。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境修复
，具体涉及一种石油烃降解菌及其应用。
技术介绍
石油是原油和石油制品的总称，是一种由多种烃类及少量非烃化合物和有机金属 组成的复杂混合物。据统计，我国每年约有60多万吨的石油及其制品通过各种途径进入环 境，污染土壤、地下水、河流、海洋。石油进入土壤后可引起一系列不良反应，如影响土壤的 通透性，改变土壤碳氮比和碳磷比，造成土壤肥力下降。作为高分子有机物的石油烃粘着在 植物根系上，阻碍了根系的呼吸与水分吸收，甚至引起根系腐烂。石油能够导致土壤微生物 种群数量、群落结构、群落组成以及群落多样性的变化，破坏土壤微生态环境。石油类物质 在重力、表面张力和毛细现象的作用下向地下渗透和沿地表扩散，使土层沥青化、板结化， 破坏土壤结构，严重影响植物的生长。土壤中的石油向下渗漏污染地下水，或者被雨水携带 污染地表水体，造成水源地长期污染。石油中某些成分特别是多环芳烃类有机污染物能够 在农产品中积累，进入食物链，可能产生"三致"（致畸、致癌、致突变）效应，进而危害人类 健康和生态环境安全等。因此，石油污染引起人们的高度关注。 对于土壤中的石油污染，目前有物理、化学和生物方法将其去除。物理和化学方法 虽然见效快，但是成本较高，而且容易造成二次污染，因此限制了土壤修复中的应用。而生 物法修复本身包括动物修复、植物修复及微生物修复，这三种方法中由于微生物资源丰富、 易于培养、对环境的耐受性较强、故微生物修复被认为具有广阔的应用前景。菌株产生生物 表面活性剂是其代谢原油的机制之一，生物表面活性剂具有乳化原油能力、可生物降解性 的优点，在原油污染土壤的修复中具有很高的应用价值，且采用微生物对石油进行降解的 成本较低，不会造成二次污染。
技术实现思路
本专利技术的目的一提供石油烃降解菌，石油烃降解菌JK2C，分类名为假单胞菌 (Pseudomonassp.)，已于2015年01月19日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心保藏，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研宄所，邮 政编码：100101，保藏号为CGMCCNo. 10366。 菌株形态为乳白色，圆形，边缘不整齐，半透明，细胞大小为0.8~1.0ymX L5 ~2. 5um， 所述石油烃降解菌的生理生化特性是：革兰氏阴性，短杆状，好氧；氧化酶，过氧化氢 酶反应为阳性;M.R试验阳性，VP试验阴性；明胶水解，淀粉水解为阳性，硝酸盐还原阳性。 本专利技术所述的石油烃降解菌培养时使用的主要氮源包括但不限于、硝酸钾、硝酸 铵、硫酸铵、尿素；使用的主要碳源包括但不限于原油、葡萄糖、蔗糖、淀粉；使用的无机组 分包括但不限于氯化钾、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸三钙、二水氯化钙、七水合 硫酸镁、七水和硫酸亚铁。本专利技术的石油烃降解菌发酵可在20~35°C，pH6~9的环境下进行。 本专利技术的目的二在于提供石油烃降解菌于高盐环境下在提高石油污染土壤中石 油降解率的应用，所述的高盐环境为含盐的质量百分比浓度〇. 2~2. 0%的盐，所述盐包括 NaCl和 / 或Na2S04。 本专利技术的目的三在于提供石油烃降解菌于高油土壤中在提高石油污染土壤的石 油降解率的应用，所述的高油土壤为土壤中含有质量浓度0. 1~2. 5%的原油。 本专利技术的目的四在于提供石油烃降解菌于偏碱性土壤中在提高石油污染土壤的 石油降解率的应用，所述偏碱性土壤即土壤的pH值为7. 0~9. 0。 本专利技术的目的五在于提供一种石油烃降解菌在提高石油污染土壤的石油烃降解 率的应用，使用石油烃降解菌JK2C前，先将营养剂施入石油污染土壤，接着进行扰动处理， 然后喷施石油烃降解菌JK2C，石油烃降解菌JK2C的使用量为30~60kg/亩；喷施石油烃 降解菌JK2C后再对土壤进行扰动处理使得营养剂和石油烃降解菌JK2C与土壤混匀，其中 土壤含水率18~22%，每年7~9月份进行施工。 所述石油烃降解菌在提高石油污染土壤的石油烃降解率的应用，施入营养剂的同 时还加入秸杆400~600kg/亩。 所述石油烃降解菌在提高石油污染土壤的石油烃降解率的应用，所述营养剂的使 用量：尿素15~20kg/亩、复合肥40~50kg/亩和乳化剂0. 3~0. 6kg/亩。 所述乳化剂为十二烷基磺酸钠。 所述复合肥中N:P205:K20的质量比为1: (0? 5~2) : (0? 5~2)。 所述扰动处理为初级耕作措施及次级耕作措施；所述初级耕作措施为翻耕、深松 耕和旋耕中一种或一种以上；所述次级耕作措施为耙地、耱地、中耕和镇压中的一种或一种 以上。 本专利技术以石油微生物学为理论依据，综合极端微生物学、环境微生物学和环境工 程学的相关理论知识，针对石油降解问题；本专利技术成功地在石油污染的土壤中筛选出来石 油烃降解菌，该菌株适应油田区的高油污染、高盐和偏碱性的土壤环境。通过在室内模拟不 同环境条件对菌株降解效果的影响，得出的最适宜的环境条件，为盆栽试验方案的实施提 供依据；结合前期室内试验和野外施工的可行性，设计了不同辅助措施，以验证不同辅助措 施对该菌降解石油污染土壤降解石油的影响，结果表明合理的辅助措施配合该菌能大幅提 高石油污染土壤中的石油降解率，比不施用菌的空白处理降解率可提高213. 3%。【附图说明】图1是本专利技术菌株JK2C的菌落图； 图2是菌株JK2C的系统发育树； 图3表示不同pH值对菌株JK2C降解石油的影响； 图4表示不同石油浓度对菌株JK2C降解石油的影响； 图5表示不同温度对菌株JK2C降解石油的影响； 图6表示不同盐度对菌株JK2C降解石油的影响； 图7表示不同表面活性剂对菌株JK2C降解石油的影响； 图8表示不同碳源对菌株JK2C降解石油的影响； 图9表示不同氮源对菌株JK2C降解石油的影响； 图10表示不同辅助措施配合接种JK2C菌株在60天后的石油污染土壤的降解效果； 图11表示不同辅助措施配合接种JK2C菌株在60天后的石油污染土壤的去毒效果。【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术进一步的描述，但是并不限制本专利技术的内容。 本专利技术是由专利技术人在中原油田长期受石油污染的土壤中筛选得到的， 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法； 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。 实施例1 实验中使用到的两种培养基： 固体培养基：K2HP04 1. 0g、KH2P041. 0g、MgS04. 7H200. 5g、NH4N031. 0g、CaCl20. 02g、FeCl3 0. 005g、琼脂18g、石油10g、水 1000mL、pH7. 0，121°C灭菌20分钟备用。液体培养基：K2HP041. 0g、KH2P04,1. 0g、MgS04. 7H200. 5g、NH4N03l. 0g、CaCl20. 02 g、FeCl3 0.005g、石油10g、水 100011^邛117.0，1211：灭菌20分钟备用。 实施例2 菌株的分离： 取lg长期受石油污染的土壤加入到液体培养基中，加入玻璃珠，于30°C、180rpm条件 下在摇床中避光培养7d后，转接于新鲜的液体培养基中继续培养，如此反复5次。取0.1 mL培养液均匀涂布在含固体本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株石油烃降解菌，其特征在于：石油烃降解菌JK2C，分类名为假单胞菌（Pseudomonas sp.），已于2015年01月19日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为 CGMCC No.10366。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张方亮，姜瑛，王朝明，陈俊培，马晓蕾，周文，王瑞龙，石巍巍，闫亚宇，刘晓京，
申请(专利权)人：河南省水文地质工程地质勘察院有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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