干细胞增强疗法制造技术

本申请披露了用于治疗患者的方法，该患者将得益于患者的干细胞的刺激，该方法包括给予患者特异性地结合于表达在人未分化干细胞上的MUC1蛋白的表位的抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】干细胞増强疗法
技术介绍
肿瘤学家遇到的一个问题是，在杀伤患者的癌症的过程中，他们必须平衡化疗的 益处和杀伤患者的风险。化疗的威胁生命的副作用之一在于，细胞毒性药物杀伤癌细胞但 也杀伤健康细胞以及尤其是杀伤患者的干细胞。在骨髓中干细胞不断再生以向身体供给携 带氧的红细胞、抗感染的白细胞、和引起血液凝固的血小板。化疗和放疗能够破坏最终成为 血细胞的干细胞，因此将患者生命置于危险之中，其使得医师减少了癌症杀伤治疗。设计制 剂来对抗癌症治疗的这些不利影响所遇到的问题在于，血细胞是终末分化细胞，这意味着 它们不能分裂来复制它们本身。它们发育自在骨髓中的造血干细胞。这意味着，不可能从 患者收集一些红细胞或白细胞并体外扩增（expand)它们，然后将它们注射回到患者。 目前在市场上有不多的药物，其用来在患者中调节干细胞发育。第一组，称作红细 胞生成刺激剂（ESA)，包括依泊汀，以商品名Procrit和Epogen销售，以及Aranesp。这些 药物用来治疗慢性肾脏疾病患者和化疗诱导贫血癌症患者的贫血。这些药物并不在骨髓中 刺激干细胞的生长，而是偏斜患者的干细胞的发育，以致更多变成红细胞谱系的血细胞。通 过增加在骨髓中分化成红细胞的干细胞的数目，红细胞生成素针剂和红细胞生成素针剂样 药物有助于癌症患者和慢性肾脏疾病患者。 用来刺激生产白细胞，集落刺激因子（CSF)，其包括G-CSF (粒细胞集落刺激因子： 商品名为非格司亭）和GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子：沙格司亭，商品名为白细 胞素）的另一类药物会刺激生产白细胞的前体，其可以成熟以成为中性粒细胞、巨噬细胞 和树突状细胞，并且可以连同或没有连同环磷酰胺一起来给予。CSF还是干细胞动员者，其 引起血细胞祖细胞分泌自骨髓。然而，G-CSF和GM-CSF的缺点在于，它们抑制骨形成。造 血干细胞的另一种动员者是CXCR4拮抗剂AMD3100,据报道其动员血细胞祖细胞而没有抑 制骨形成。 红细胞生成刺激剂（ESA)和CSF均可以用来加速自化疗效果的血细胞的恢复，在 骨髓移植以后使用，在干细胞移植以前或以后使用，其可以被移植到周围血液，和/或用来 治疗可以得益于造血干细胞或血细胞或它们的祖细胞的增加的生产的患者。 ESA和CSF均是通过使干细胞的成熟偏斜向着造血干细胞谱系并一定使成熟偏离 成其它类型的细胞来发挥作用。可以得出，可能存在不想要的和危险的副作用，其起源于在 骨髓中生产的其它类型的细胞的抑制。事实上，FDA最近发出警告，重组人类红细胞生成素 α、红细胞生成素针剂或Aranesp的使用会增加患上癌症的风险并且还会增加心肌梗死和 中风的风险。 因此，改善将是开发这样的制剂，其刺激生产干细胞或使干细胞的发育偏斜于血 细胞谱系，其中经由不同于ESA和CSF的途径的途径。对于现有技术状态的更大的改善将是 开发这样的制剂，其刺激在骨髓中干细胞的生产，而不仅仅在一个方向上偏斜它们的成熟。 对现有技术状态的甚至更大的改善将是开发一种或多种这样的制剂，其将刺激干细胞的生 长，但将并不刺激癌细胞的生长或增加患者的患上另一种癌症的风险。还更大的改善将是 开发抗癌剂，其将杀伤癌细胞而没有杀伤患者的干细胞。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术涉及用于治疗患者的方法，其中患者的血细胞或骨髓细胞已 被耗尽，在一些情况下，其可以起因于暴露于辐射，上述方法包括给予患者干细胞特异性抗 体。在另一个方面，本专利技术涉及用于治疗患有低血细胞计数的患者的方法，上述方法包括通 过给予患者干细胞特异性抗体来刺激造血干细胞或祖细胞的生长。 在另一个方面，本专利技术涉及体外刺激骨髓细胞、造血干细胞或祖细胞的生长，然后 给予患有低血细胞计数患者的周围血液或骨髓的方法，其中上述方法包括给予患者干细胞 特异性抗体。 在另一个方面，本专利技术涉及用优先结合癌细胞（相比于它结合于干细胞）的抗体 测试患者样品来诊断癌症的方法。 在一种优选的实施方式中，将本专利技术的癌症特异性抗体给予患者，患者的治疗方 案还包括用干细胞特异性抗体进行治疗。 在另一个方面，本专利技术涉及选择用于治疗癌症的治疗性抗体的方法，包括去除 (de-selecting)那些结合于干细胞的抗体。类似地，本专利技术涉及选择用于治疗需要再生血 细胞或骨髓细胞的病症的治疗性抗体的方法，包括去除那些结合于癌细胞的抗体。 在一个方面，本专利技术涉及用于治疗将得益于患者的干细胞的刺激的患者的方法， 包括给予患者特异性地结合于表达在人未分化干细胞上的MUCl蛋白的表位的抗体。上述 抗体可以特异性地结合于 SEQ ID N0:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO: 10或SEQ ID NO: 11的肽的至少6个连续氨基酸。尤其是，抗体不可结合于SEQ ID NO: 3、 SEQ ID N0:7或SEQ ID N0:8的肽。患者可以患有癌症。患者可以患有癌症并正在接受化 疗或放疗。或者，患者可以患有慢性肾脏疾病。 在另一个方面，本专利技术涉及用于治疗患有癌症或具有发展癌症的风险的患者的方 法，包括给予患者一种抗体，该抗体特异性地结合于表达在癌细胞上但并不表达在人未分 化干细胞上的MUCl蛋白的表位。上述抗体可以特异性地结合于SEQ ID NO:3的肽但不可 结合于SEQ ID NO:4的肽。 在又一个方面，本专利技术涉及用于治疗被诊断为患有MUCl阳性癌症的患者的方法， 包括给予患者单价癌细胞特异性抗体。 在另一个方面，本专利技术涉及用于治疗被诊断为患有MUCl阳性癌症的患者的方法， 包括给予患者单价癌细胞特异性抗体。 在另一个方面，本专利技术涉及用于治疗被诊断为患有MUCl阳性癌症的患者的方法， 包括给予患者单价癌细胞特异性抗体和二价干细胞特异性抗体。 在另一个方面，本专利技术涉及用于增殖干细胞或祖细胞的方法，包括使上述细胞接 触特异性地结合于表达在人干细胞上的MUCl蛋白的表位的抗体，而没有引起癌细胞的增 殖。 在再一个方面，本专利技术涉及用于获得特异性地结合于干细胞但并不结合于癌细胞 的抗体的方法，包括以下步骤： ⑴生成混合组的抗体，其识别一种肽，该肽的序列是具有SEQ ID N0:1-11的序列 的任何肽的序列； (ii)选择那些抗体，其结合于 SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5 或 SEQ ID NO:6 的肽， 但并不结合于SEQ ID NO:3的肽； (iii)选择那些抗体，当被吸附到表面上时，其促进干细胞的附着；以及 (iv)选择那些抗体，其当处于二价形式时刺激干细胞的生长，而当处于单价形式 时抑制干细胞的生长，同时对癌细胞没有影响。【附图说明】 图1是草图，其描绘了识别MUCl*受体的二价抗体如何刺激生长，但那些抗体的单 价Fab则抑制生长，其中通过阻断它与其关联配体，二聚体NM23,的相互作用。二价抗体模 拟配体NM23的活性以使癌细胞或干细胞生长；单价Fab则阻断它们的生长。 图2是来自ELISA实验的图，其示出各种抗体克隆与PSMGFR肽，其缺少N端10 个氨基酸（ΝΔ 10 :SEQ ID NO: 3)，或PSMGFR肽，其缺少C端10个氨基酸（CAlO :SEQ ID NO:4)，的结合。图2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗患者的方法，所述患者将得益于所述患者的干细胞的刺激，所述方法包括给予所述患者特异性地结合于表达在人未分化干细胞上的MUC1蛋白的表位的抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛西娅·巴姆达德，
申请(专利权)人：米纳瓦生物技术公司，
类型：发明
国别省市：美国;US