一种三七花阿拉伯半乳聚糖及其制备方法和用途技术

技术编号:11606003 阅读:129 留言:0更新日期:2015-06-17 03:58
本发明专利技术涉及一种从三七花中提取的多糖、其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。具体而言,本申请涉及一种从三七花中提取的阿拉伯半乳聚糖,所述制备方法包括:首先从三七花中提取粗多糖,醇沉、离子柱层析纯化和波谱鉴定后得一阿拉伯半乳聚糖。经体外实验证明,该多糖可显著抑制胰腺癌肿瘤细胞的生长并有效抑制血管生成,有望成为治疗肿瘤的潜在多糖药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及多糖类物质、其提取方法及其在制备药物中的用途,具体涉及一种从 三七花(flowersofPanaxNotoginseng(BurK.)F.H.Chen)中提取阿拉伯半乳聚糖多糖 RN1的方法、采用该方法提取的阿拉伯半乳聚糖多糖和所述阿拉伯半乳聚糖多糖在制备抗 肿瘤药物中的用途。
技术介绍
胰腺癌是一种恶性程度极高的消化系统恶性肿瘤,其发病隐匿、进展快、预后 差,大约80%的患者确诊时往往伴有局部的侵犯或远处的转移。我国胰腺癌发病率近 20年增长了 4倍,胰腺癌患者总体5年生存率低于5%,胰腺癌死亡率居高不下的主要原 因是临床早期诊断的困难、缺乏有效的临床治疗方法以及对胰腺癌发生发展机制尚未 完全清楚.CurrOpin Gastroenterol, 2011,275:460-66?和PhilpPA,MooneyM,JaffeD,etal.Consensus reportofthenationalcancerinstituteclinicaltrialsplanningmeetingon pancreascancertreatment.ClinOncol, 2009, 27 (33): 5660-5669.]。以吉西他滨为 基础的化疗虽为标准化疗方案,但在改善症状和延长生存方面仅有微弱优势,因此,临床胰 腺癌的治疗仍需要开发新的药物,特别是既能抑制肿瘤自身生长又能抑制其转移,并且毒 副作用低的药物。 而近年来的研究发现,多糖具有显著地抗肿瘤活性并且对人体的毒副作用相对较 小,对多糖的生物活性研究在医学领域已经成为国内外专家学者研究的热点。迄今为止, 在我国已投放市场的多糖药物主要有:香菇多糖注射液、猪苓多糖注射液、云芝多糖胶囊、 黄芪多糖、云芝肝泰、灰树花胶囊等。国外对多糖的研究也十分重视,目前有多种植物多糖 已经在临床治疗上用于肿瘤的辅助治疗和减轻化疗的副作用 ?IntImmunopharmacol, 2006, 6 (3) : 317-333.]。美国McAnalley教授领导的 Carrington实验室经过多年的研究,分离出一种经过冻干后不再降解的,由0 (1 - 4)键连 接的活性黏多糖CarrisynTM,并已获得美国FDA的批准,作为一种生物制剂广泛用于治疗 胃肠道、免疫类疾病以及癌症、艾滋病等,并取得了惊人的疗效。鉴于多糖物质的多种抗肿 瘤活性,使其在成为治疗胰腺癌候选药物上具有巨大的应用前景。
技术实现思路
本专利技术利用一种简单有效的多糖提取工艺和方法,以三七花为原料获得了一种阿 拉伯半乳聚糖的多糖,药理实验表明所述多糖在细胞水平上可显著抑制肿瘤细胞(实例为 胰腺癌肿瘤细胞)的增殖并抑制新生血管的生成和迁移,该多糖有望开发成为一种治疗肿 瘤的糖类药物。 本专利技术的一个目的在于提供一种多糖,其结构为【主权项】1. 一种多糖,其结构为:优选地,所述多糖的重均分子量范围为5-100kDa,优选为20-80kDa;更优选为 20.5_40kDa。2. 根据权利要求1所述的多糖,其含有41. 2wt%的半乳糖、51. 3wt%的阿拉伯糖、 3. 5wt%的半乳糖醛酸和4.Owt%的鼠李糖。3. 根据权利要求1所述的多糖,其红外图谱的主要伸缩振动吸收峰与附图1所示的红 外图谱中的基本一致; 优选地,在所述多糖的红外图谱中,3424CHT1附近为O-H伸缩振动吸收峰,2921CHT1附近 为C-H伸缩振动吸收峰,lOOO-MOOcnT1附近为C-O和糖环振动信号,1720CHT1附近没有吸收 峰。4. 根据权利要求1所述的多糖,其13CNMR谱的主要信号值与附图2所示的13CNMR谱 基本一致; 优选地,在所述多糖的13CNMR谱中,位于S110-S108的端基碳信号,分别为末端阿拉 伯糖、1,3-阿拉伯糖及1,3, 5-阿拉伯糖的Cl信号;位于S106-S104的端基碳信号,分别 为末端半乳糖、1,3-半乳糖、1,6-半乳糖及1,3, 6-半乳糖的Cl信号;位于S102的微弱端 基碳信号,分别为半乳糖醛酸及鼠李糖的Cl信号;在S17. 7处为鼠李糖甲基碳的信号峰; 在S176. 7处为半乳糖醛酸羧基碳的信号峰。5. -种制备如权利要求1所述的多糖的方法,所述方法包括以下步骤: a. 多糖提取:干燥的三七花经乙醇脱脂、水提、过滤,将所得滤液浓缩,透析、浓缩、醇 沉、离心、真空干燥,得水提三七花粗多糖; b. 多糖纯化:将所述水提三七花粗多糖用DEAE纤维素阴离子柱进行分级纯化,依次用 水和0.IMNaCl洗脱,收集0.IMNaCl洗脱组分得纯化所述多糖RNl。6. 根据权利要求5所述的方法,其中,所述方法包括以下步骤: a. 多糖提取:干燥的三七花经75%-95%乙醇脱脂,干燥,加入去离子水,加热条件下提 取,过滤,残渣再次用去离子水提取,如此反复提取2-6次,滤液合并,加热浓缩,离心,透 析,再浓缩,加入3倍于浓缩液体积的75%-95%乙醇,离心得沉淀,沉淀经真空干燥得水提 三七花粗多糖; b. 多糖纯化:取三七花粗多糖,水溶解,离心,上清液通过DEAE纤维素阴离子柱进行分 离,依次以蒸馏水和〇.IMNaCl洗脱,硫酸-苯酚检测,收取合并0.IMNaCl洗脱液,浓缩, 透析,冷冻干燥得所述多糖。7. 根据权利要求6所述的方法,其中,所述方法包括以下步骤: a. 多糖提取:干燥的三七花经95%乙醇脱脂7-10天,室温自然干燥,干燥后的三七花 加入20倍重量的去离子水,KKTC下提取2-6次,每次5-7h,滤液合并,加热浓缩,离心,透 析,再浓缩,加入3倍于浓缩液体积的95%乙醇,离心得沉淀,沉淀经真空干燥得水提三七花 粗多糖; b. 多糖纯化:取三七花粗多糖,加入10倍重量的水中溶解,离心,上清液通过DEAE纤 维素阴离子柱进行分离,依次以蒸馏水和〇.IMNaCl洗脱,硫酸-苯酚检测,收取合并0.IM NaCl洗脱液,浓缩,透析,冷冻干燥得所述多糖RNl。8. 根据权利要求1所述的多糖RNl在制备治疗肿瘤的药物中用途。9. 根据权利要求1所述的多糖RNl在制备预防或治疗肿瘤转移的药物中的用途。10. 根据权利要求8或9所述的用途,其中,所述肿瘤为胰腺癌。【专利摘要】本专利技术涉及一种从三七花中提取的多糖、其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。具体而言,本申请涉及一种从三七花中提取的阿拉伯半乳聚糖,所述制备方法包括:首先从三七花中提取粗多糖,醇沉、离子柱层析纯化和波谱鉴定后得一阿拉伯半乳聚糖。经体外实验证明,该多糖可显著抑制胰腺癌肿瘤细胞的生长并有效抑制血管生成,有望成为治疗肿瘤的潜在多糖药物。【IPC分类】C08B37-00, A61P35-04, A61K31-715, A61P35-00【公开号】CN104710538【申请号】CN201310689525【专利技术人】丁侃, 王培培, 张蕾 【申请人】中国科学院上海药物研究所【公开日】2015年6月17日【申请日】2013年12月16日【公告号】WO2015090180A1本文档来自技高网
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一种<a href="http://www.xjishu.com/zhuanli/27/CN104710538.html" title="一种三七花阿拉伯半乳聚糖及其制备方法和用途原文来自X技术">三七花阿拉伯半乳聚糖及其制备方法和用途</a>

【技术保护点】
一种多糖,其结构为:优选地,所述多糖的重均分子量范围为5‑100kDa,优选为20‑80kDa;更优选为20.5‑40kDa。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:丁侃王培培张蕾
申请(专利权)人:中国科学院上海药物研究所
类型:发明
国别省市:上海;31

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