蓝莓组培快繁的方法技术

一种蓝莓组培快繁方法，以蓝莓半木质化茎段为外植体，接种到含有改良READ培养基、玉米素、萘乙酸、蔗糖和琼脂的培养基中连接培养，新梢转入含有改良READ培养基、玉米素、蔗糖和琼脂的培养基中进行连续增殖培养；将再生苗剪成小段后扦插于复合基质上，实现瓶外生根。本发明专利技术在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以玉米素为植物生长调节剂，它具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用，用量较低，增殖系数高，植株强壮，可不经壮苗直接进用瓶外生根程序；同时采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。

【技术实现步骤摘要】
蓝莓组培快繁的方法
本专利技术涉及的是一种蓝莓繁殖方法，具体涉及的是蓝莓组培瓶内增殖加瓶外生根的快繁育苗方法。
技术介绍
蓝莓为杜鹃花科(Edeaceae)越橘属(Vaccinium)多年生灌木树种，蓝莓具有较高的保健功能，在防止视网膜退货、脑神经衰老、增强心脏功能、抗氧化、抗溃疡、抗炎及抗癌等方面有着独特功效，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一，被誉为“21世纪功能性保健浆果”和“水果中的皇后”。因此开发前景十分广阔。蓝莓种植，种苗是关键。采用常规扦插育苗方法因受取材及繁育时节的限制，繁殖速度较慢而难以满足生产需求，更为重要的是，常规繁育的种苗在生长势、抗逆性及果实品质等诸方面均不如组培苗。而采用瓶外生根技术，可大大降低生产成本，提高繁苗速率，建立稳定高效的组培快繁体系具有重要的现实意义。经过对现有技术的检索发现，廉家盛等在“培养基种类、玉米素浓度及pH值对蓝莓“美登”组培增殖生长的影响”中记载了以蓝莓"美登"品种茎段为外植体，研究基本培养基种类、ZT浓度和培养基pH值对其组培苗增殖的影响，结果表明，B5培养基比MS、White和改良WPM更适于"美登"不定芽增殖培养，当B5培养基中加入2.0mg/LZT时，每株可分化出6.8个不定芽，ZT浓度低于或高于2.0mg/L时，分化芽数降低，"美登"组培苗生长受到抑制.pH值对美登组培苗增殖生长也有影响，pH值为5.4时分化的芽数最多(11.5个/株)，且生长良好。但该技术采用的玉米素使用浓度偏高，造成不定芽丛生，再生苗长势弱，不利于芽的持续增殖，同时本专利技术下得到的再生苗可不经炼苗直接进行瓶外生根，繁殖快、操作简单、效率高、成本低。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的上述不足，提出一种蓝莓组培快繁的方法，该方法能够有效提高苗木繁殖速度。本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术包括以下步骤：1)以蓝莓半木质化新梢为外植体制备成茎段所述的蓝莓新梢经消毒处理且优选为当年生长初期的蓝莓新梢。所述的茎段具有至少两个腋芽，且茎段底部预先剪除2‐3毫米。2)将茎段接种到含有改良READ培养基、萘乙酸、蔗糖和琼脂的混合培养基中继代培养，然后转入含有改良READ培养基、玉米素、蔗糖和琼脂的增殖培养基进行增殖培养。所述的混合培养基的组分(每升)为：改良READ培养基、ZT2.0mg/L、NAA0.1mg/L、蔗糖20g/L以及琼脂6.5g/L，该混合培养基的pH为5.4～5.6。所述的继代培养重复2‐3次。所述的增殖培养基的组分(每升)为：改良READ培养基、玉米素0.05‐0.3mg/L、蔗糖20g/L、琼脂6.5g/L，该增殖培养基的pH为5.4～5.6。所述的增殖培养每60天继代一次，繁殖系数为4～6。所述的改良READ培养基的组分为：KNO3202mg/L、NH4NO3400mg/L、MgSO4·7H2O370mg/L、KH2PO4170mg/L、CaCl2·2H2O440mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、CuSO4·7H2O0.025mg/L、CoCl2·2H2O0.025mg/L、VB11mg/L、肌醇100mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2‐EDTA37.3mg/L。3)对增殖后的瓶苗可不经炼苗直接剪成小段扦插于复合基质上，实现瓶外生根。所述的小段是指：将得到的再生苗剪成1.5‐2厘米的小段，每段浸泡生根液。所述的生根液的组分为：IBA(吲哚丁酸)100mg/L、VB1(盐酸硫胺素)0.1g/L。所述的浸泡时间优选为3分钟。所述的复合基质为经800倍多菌灵消毒后的草炭与蛭石(体积比为3：1)的混合基质上。所述的小段扦插于复合基质后置于小棚，14天可见明显生根，1月可见新芽生出，成活率超过90％。所述的小棚内空气相对湿度为85％以上，温度在15‐30℃。技术效果与现有技术相比，本专利技术在组培瓶内阶段，包括初代诱导及继代增殖中以玉米素为植物生长调节剂，它具有促进细胞分裂，促进细胞生长等作用，用量较低，增殖系数高，植株强壮，可不经炼苗直接进入瓶外生根程序；同时采用瓶外生根技术，相对瓶内生根速度快，效率高、成本低，进一步加快了繁殖速度。具体实施方式下面对本专利技术的实施例作详细说明，本实施例在以本专利技术技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。实施例1本实施例包括以下操作步骤：1)4月初于上海青浦地区采集当年生长初期蓝莓半木质化新梢(蓝莓品种为V3)，经消毒处理后(75％的乙醇消毒30秒后，无菌水冲洗2次，再用0.1％的升汞消毒处理6分钟，后有无菌水处理4次)，剪切成带2个腋芽的茎段，接种前剪除底端2‐3毫米；2)将茎段接种到初代培养基改良READ+ZT2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，pH5.4‐5.6；30天后将新长出的芽茎接种到改良READ+玉米素1.0mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，经过2‐3次继代培养，每次玉米素的含量逐渐降低0.1‐0.2mg/L，直至降至0.05mg/L的水平上，可持续增殖，增殖培养基为改良READ+玉米素0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，pH5.4‐5.6；每60天继代一次，繁殖系数在4‐6之间，培养条件：温度25℃，光照时间14小时/天，光强2000‐3000lx；3)当瓶苗增殖到一定数量时，将再生苗剪成1.5‐2厘米的小段，茎段浸泡生根液(IBA100mg/L+VB10.1g/L)3分钟后直接扦插于经800倍多菌灵消毒后的复合基质上，遮小棚以保湿(空气相对湿度为85％以上，温度在15‐30℃)，14天可见明显生根，1月可见新芽生出，成活率超过90％。实施例2本实施例包括以下操作步骤：1)4月初于上海青浦地区采集当年生长初期蓝莓半木质化新梢(蓝莓品种为奥尼尔)，经消毒处理后(75％的乙醇消毒30秒后，无菌水冲洗2次，再用0.1％的升汞消毒处理6分钟，后有无菌水处理4次)，剪切成带2个腋芽的茎段，接种前剪除底端2‐3毫米；2)将茎段接种到初代培养基改良READ+ZT2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，pH5.4‐5.6；30天后将新长出的芽茎接种到改良READ+玉米素1.0mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，经过2‐3次继代培养，每次玉米素的含量逐渐降低0.1‐0.2mg/L，直至降至0.2mg/L的水平上，可持续增殖，增殖培养基为改良READ+玉米素0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L上，pH5.4‐5.6；每60天继代一次，繁殖系数在4‐6之间，培养条件：温度25℃，光照时间14小时/天，光强2000‐3000lx；3)当瓶苗增殖到一定数量时，直接将再生苗剪成1.5‐2厘米的小段，茎段浸泡生根液(IBA100mg/L+VB10.1g/L)3分钟后直接扦插于经800倍多菌灵消毒后的复合基质上，遮小棚以保湿(空气相对湿度为85％以上，温度在15‐30℃)，14天可见明显生根，1月可见新芽生出，成活率超过9本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝莓组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以蓝莓半木质化新梢为外植体制备成茎段；2)将茎段接种到含有改良READ培养基、玉米素、萘乙酸、蔗糖和琼脂的混合培养基中，然后转入含有改良READ培养基、玉米素、蔗糖和琼脂的增殖培养基进行增殖培养；3)增殖后的瓶苗不必经过炼苗，直接剪成小段扦插于复合基质上，实现瓶外生根。

【技术特征摘要】
1.一种蓝莓组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以蓝莓半木质化新梢为外植体制备成茎段；2)将茎段接种到含有改良READ培养基、玉米素、萘乙酸、蔗糖和琼脂的混合培养基中，然后转入含有改良READ培养基、玉米素、蔗糖和琼脂的增殖培养基进行增殖培养；3)增殖后的瓶苗不必经过炼苗，直接剪成小段扦插于复合基质上，实现瓶外生根；所述的混合培养基的组分为：改良READ培养基、ZT2.0mg/L、NAA0.1mg/L、蔗糖20g/L以及琼脂6.5g/L，该混合培养基的pH为5.4～5.6；所述的增殖培养基的组分为：改良READ培养基、玉米素0.05-0.3mg/L、蔗糖20g/L、琼脂6.5g/L，该增殖培养基的pH为5.4～5.6；所述的改良READ培养基的组分为：KNO3202mg/L、NH4NO3400mg/L、MgSO4·7H2O370mg/L、KH2PO4170mg/L、CaCl2·2H2O440mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、H3BO36.2mg/L、Na2Mo...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵子刚，丁国平，薛建德，王华君，于绍凤，史苏湘，朱凯承，姚洁，
申请(专利权)人：上海青浦现代农业园区发展有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31