花生DELLA基因家族及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术涉及花生DELLA基因家族及其编码基因与应用。本发明专利技术公开了一种花生AhDELLA3蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；花生AhDELLA4蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；本发明专利技术首次发现了花生DELLA蛋白基因家族AhDELLA3和AhDELLA4及其编码基因，通过分析AhDELLA3和AhDELLA4基因在花生不同组织中的表达变化，发现AhDELLA3和AhDELLA4基因在花生荚果发育过程中起到重要的作用；为阐明DELLA基因家族调控花生生长发育的分子机理提供了重要的理论依据，并且在花生新品种培育方面具有重要指导意义，为利用转基因技术创新作物新种质奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及花生DELLA基因家族及其编码基因与应用，特别涉及花生DELLA基因 家族的克隆、表达分析、功能鉴定及其应用，属于分子生物学

技术介绍
赤霉素（gibberellins，简称GAs)作为一种植物激素，在植物的整个生长发育过 程中起着非常重要的调控作用。例如：促进种子萌发、促进茎的伸长和叶的生长、诱导开花 及种子和果实生长等多种生理功能。DELLA蛋白是赤霉素信号通路中的抑制因子（参见Fleetetal.CurrentOpinion inPlantBiology, 877-85, 2005)。赤霉素信号传递途径主要是通过解除DELLA蛋白的 抑制作用来实现的。受体GID1接收到GA信号后与DELLA蛋白形成GA-GIDI-DELLA复 合体，随后被SCF蛋白复合体中的SLYl识别并通过泛素蛋白酶途径降解，DELLA蛋白对 植物生长的抑制作用随即解除，从而调节下游基因的表达（参见Riehardsetal.Plant MolBiol,5267-88, 2001；Nakajimaetal.PlantJournal, 46880-889, 2006；ffilligeet al.ThePlantCell, 191209-1220, 2007)。 DELLA蛋白属于植物GRAS蛋白家族。拟南芥的GAI(GAInsensitive)、 RGA(Repressorofgal_3)和RGL(RGAlike)、水稻的SLRl(SlenderRice1)、小麦 的RhtBl/RhtDl(Reducedheight)、大麦的SLNl(SlenderI)等都是DELLA蛋白，它们 在序列上高度保守（参见Vandenbusscheetal.BMCPlantBiol, 765, 2007)。DELLA 蛋白的N端具有保守的DELLA结构域（包括DELLA和VHYNP两个酸性基序），是与受 体GIDl蛋白的结合结构域，对响应GA信号的DELLA蛋白降解具有重要作用。C端具 有保守的GRAS结构域，是DELLA蛋白的功能结构域，在调控DELLA蛋白活性方面起作 用。DELLA结构域的缺失将使DELLA蛋白不能被降解，而使植物表现出类似于GA缺 陷型突变体gal-3的表型，而它们在GRAS功能结构域中的缺失突变会造成植株徒长 的表型（参见Dilletal.PNAS, 98 (24) 14162-14167, 2001;Chandleretal.Plant Physiology, 129181-190, 2002;Wenetal.ThePlantCell, 1487-100, 2002)〇 水稻和大麦中只有一个DELLA蛋白，能够抑制几乎所有GA控制的生长发育过程。 而拟南芥中有五个0￡〇^蛋白，包括641、1^^、1?11、1?12和1?13，它们的功能既相互重叠又 各有不同（参见Chengetal.Development, 1311055-1064, 2004)。例如RGA、GAI和RGLl都 具有抑制茎伸长的作用（参见Dilletal.Genetics, 159777-785, 2001;Wenetal.Plant Cell, 1487-100, 2002) ;RGA、RGLl和RGL2都具有抑制成花和种子形成的作用（参见 Ueguchi-Tanakaetal.AnnuRevPlantBiol，58183-198,2007) ;RGA、GAI、RGL2和RGL3在 种子萌发中具有抑制作用（参见Pengetal.CurrOpinPlantBiol, 5376 ?381，2002;Cao etal.Planta，223:105 ?113,2005;Ariizumietal.PlantCell, 19:791 ?804,2007)〇 DELLA蛋白除了对植物生长发育具有抑制作用外，还有其他重要功能。DELLA蛋 白在调控果实发育方面有重要作用。例如番茄中S1DELLA基因的沉默导致未受精的情况 下发生单性结实，推测DELLA的表达很可能是受精前子房发育暂停的原因（参见Cristina etal.ThePlantJournal, 52865 - 876, 2007)。DELLA蛋白在多种植物激素信号和环境 信号的传递途径中也具有调节作用（参见Achardetal.Science, 311:91?94,2006)。 例如，光通过降低GA的生物合成水平促进DELLA蛋白的积累，抑制PIF3转录因子与它 的靶基因启动子结合，使拟南芥下胚轴伸长受到抑制。而黑暗下相反，DELLA蛋白的降 解促进下胚轴伸长（参见Fengetal.Nature, 451475-478, 2008;Achardetal.Plant Physiology，1431163-1172, 2007)。DELLA蛋白还在植物耐逆境胁迫方面起作用。通过研宄 拟南芥在植物激素处理条件下和逆境胁迫下的DELLA蛋白变化，结果表明DELLA蛋白对植 物生长的抑制是有益的，它能够依据外界的变化，实时地调控植物生长，从而提高植物的抗 逆性（Achardetal.PlantPhysiol, 1431163-1172, 2007)。由此可见，DELLA蛋白在植物 整个的生长发育过程中发挥着至关重要的作用。 花生是我国重要的油料作物之一，我国花生总产占全国油料作物总产量的1/2。然 而，我国花生产业仍面临着十分严峻的问题，花生产量和胁迫抗性的进一步提高仍然是我 国花生品种培育的最重要课题。加大生物技术在种质创新和品种培育中的力度是实现我 国花生品种改良新飞跃的关键。然而，由于对花生重要农艺性状形成的分子机理知之甚少， 花生的分子生物学研宄也远落后于其他农作物。鉴定花生中的DELLA基因家族，研宄不同 DELLA蛋白在花生生长发育和抵御胁迫中的作用机理，对阐明决定花生高产、抗逆性状的分 子基础具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供花生DELLA蛋白基因家族及其编码基因与应 用。 一种花生AhDELLA3蛋白，氨基酸序列如SEQIDNO. 5所示。 编码花生AhDELLA3蛋白的基因，核苷酸序列如SEQIDNO. 6所示。 一种重组载体，插入了核苷酸序列如SEQ ID NO. 6所示的编码花生AhDELLA3蛋白 的基因。该重组载体可通过购买市售的载体，经过常规手段，将目的基因SEQ ID NO. 6导入 载体，即可获得含有SEQ ID NO. 6所示核苷酸序列的重组载体。 一种重组细胞，含有上述编码花生AhDELLA3蛋白的基因或者上述重组载体。 上述编码花生AhDELLA3蛋白的基因、重组载体和/或重组细胞在改良花生或其他 经济作物抗逆中的应用。 一种花生AhDELLA4蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO. 7所示。 编码花生AhDELLA4蛋白的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO. 8所示。 一种重组载体，插入了核苷酸序列如SEQ ID NO. 8所示的编码花生AhDELLA4蛋白 的基因。该重组载体可通过购买市售的载体，经过常规手段，将目的基因SEQ ID NO. 8导入 载体，即可获得含有SEQ ID NO. 8所示核苷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花生AhDELLA3蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：侯蕾，王兴军，赵传志，夏晗，赵术珍，李长生，李膨呈，李爱芹，薛月寒，
申请(专利权)人：山东省农业科学院生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：山东;37