【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种猪带绦虫TSOL18基因重组卡介苗制备及鉴定方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)质粒pMV261的扩增与鉴定:先制备E.coli DH5α感受态细胞,使用pMV261质粒转化E.coli DH5α感受态细胞,进一步扩增与鉴定,将鉴定正确的pMV261质粒进一步培养,留种并提取质粒备用;(2)重组质粒pMV261‑TSOL18的构建及鉴定:将载体pGEX‑1λT‑TSOL18与质粒pMV261分别用 BamHⅠ和 EcoRⅠ双酶切,酶切产物经琼脂糖凝胶电泳后,割取含所要回收DNA 的琼脂块,放入到离心管中,回收并纯化 PCR 产物;然后将胶回收的相应片段连接,连接产物转化E.coli DH5α感受态细胞,挑取阳性克隆,抽提质粒,进行酶切、PCR和测序鉴定;(3)猪带绦虫TSOL18基因重组卡介苗的构建及鉴定①BCG感受态细菌的制备1)取BCG菌液,接种于含有ADC的M7H9‑Tween80液体培养基中,振荡培养;2)待OD600达到0.5~1.0(对数生长期)时,冰浴,离心;3)加入甘油,重悬,离心;4)弃上清,重复步骤3);5)加入甘油,重悬混匀,待用;②重组质粒pMV261‑T ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:周必英,杨凤娇,江楠,
申请(专利权)人:遵义医学院,
类型:发明
国别省市:贵州;52
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