一种野棉花的组培繁殖方法技术

本发明专利技术公开了一种野棉花的组培繁殖方法，主要通过对初代培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果，野棉花的愈伤组织的萌动率达到了96％，增殖倍数达到了7.3倍，生根率达到了98％，最终的成活率达到了96％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是一种适用于野棉花的组培繁殖方法。
技术介绍
野棉花(学名：Anemone vitifolia Buch.-Ham.)是草本植物，植株高60-100厘米。根状茎斜，木质，叶片心状卵形或心状宽卵形。花葶粗壮，聚伞花序长20-60厘米，苞片3，形状似基生叶，萼片5，白色或带粉红色，倒卵形，花丝丝形；心皮约400，聚合果球形，瘦果有细柄。7月至10月开花。生山地草坡、沟边或疏林中。分布于中国、缅甸、不丹、锡金、尼泊尔和印度。目前，利用组培技术繁育野棉花的技术尚未有人研究，组织培养体系尚未建立，优良品种的推广普及尚未完成，苗木供求矛盾日益加剧，严重影响了野棉花的园林应用和推广。
技术实现思路
本专利技术针对现有的不足提供了一种野棉花的组培繁殖方法。本专利技术通过以下方法实现上述目的。一种野棉花的组培繁殖方法，包括下列步骤：(1)外植体的选择：于4～7月采取生长健壮的野棉花幼嫩茎段作外植体；(2)材料处理方法：先用软毛刷将野棉花表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1分钟后用紫外灯照射25min，转入超净工作台，在超净工作台上先用75％的乙醇浸泡20秒，然后再转入滴加了2～3滴土温80的0.1％的升汞溶液中浸泡1min，再用无菌水冲洗2～3次，最后在无菌条件下切割材料，茎段切割成0.6～0.8cm长；(3)初代培养：在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6-BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2000-2200lux，待新芽长至2.0cm左右时，即开始下一个阶段；(4)增殖培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6-BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2000-2200lux，待新芽长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(5)生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了2.6mg/L的IBA、0.7mg/L的NAA，1.8mg/L的KT，PH 6.6，培养温度为22℃，光照周期11h/d，光强度为1800lux，待新苗长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(6)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗7d，然后解开封口膜，炼苗3d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的65％，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比砻糠灰∶沙子：蛭石＝2∶1：1的混合基质中，温度控制在25℃，前5d湿度控制在80％左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。有益效果：本专利技术对野棉花采用组织培养技术，以嫩茎段为外植体，经外植体灭菌、初代培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽步骤，研究培养过程中试管苗的营养需求、激素对苗木生长分化的调控，解决野棉花的微体快速增殖、诱导生根的重要技术问题，建立了完善的野棉花组织培养体系，达到了高效诱导外植体分化增殖和高质量保证幼苗成活的目的，并且保存了母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，下述实施例仅用于说明本专利技术，对本专利技术并没有限制。一种野棉花的组培繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)外植体的选择：于4～7月采取生长健壮的野棉花幼嫩茎段作外植体；(2)材料处理方法：先用软毛刷将野棉花表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1分钟后用紫外灯照射25min，转入超净工作台，在超净工作台上先用75％的乙醇浸泡20秒，然后再转入滴加了3滴土温80的0.1％的升汞溶液中浸泡1min，再用无菌水冲洗3次，最后在无菌条件下切割材料，茎段切割成0.7cm长；(3)初代培养：在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6-BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2100lux，待新芽长至2.0cm左右时，即开始下一个阶段；(4)增殖培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6-BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2100lux，待新芽长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(5)生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了2.6mg/L的IBA、0.7mg/L的NAA，1.8mg/L的KT，PH 6.6，培养温度为22℃，光照周期11h/d，光强度为1800lux，待新苗长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(6)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗7d，然后解开封口膜，炼苗3d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的65％，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比砻糠灰∶沙子：蛭石＝2∶1：1的混合基质中，温度控制在25℃，前5d湿度控制在80％左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。经过上述步骤的培养，野棉花的愈伤组织的萌动率达到了96％，增殖倍数达到了7.3倍，生根率达到了98％，最终的成活率达到了96％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种野棉花的组培繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)外植体的选择：于4～7月采取生长健壮的野棉花幼嫩茎段作外植体；(2)材料处理方法：先用软毛刷将野棉花表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1分钟后用紫外灯照射25min，转入超净工作台，在超净工作台上先用75％的乙醇浸泡20秒，然后再转入滴加了2～3滴土温80的0.1％的升汞溶液中浸泡1min，再用无菌水冲洗2～3次，最后在无菌条件下切割材料，茎段切割成0.6～0.8cm长；(3)初代培养：在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6‑BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2000‑2200lux，待新芽长至2.0cm左右时，即开始下一个阶段；(4)增殖培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L的6‑BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，光照周期13h/d，光强度为2000‑2200lux，待新芽长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(5)生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了2.6mg/L的IBA、0.7mg/L的NAA，1.8mg/L的KT，PH 6.6，培养温度为22℃，光照周期11h/d，光强度为1800lux，待新苗长至2.0cm时，即开始下一个阶段；(6)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗7d，然后解开封口膜，炼苗3d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的65％，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比砻糠灰∶沙子：蛭石＝2∶1：1的混合基质中，温度控制在25℃，前5d湿度控制在80％左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。...

【技术特征摘要】
1.一种野棉花的组培繁殖方法，其特征在于该方法包括下列步
骤：
(1)外植体的选择：于4～7月采取生长健壮的野棉花幼嫩茎段
作外植体；
(2)材料处理方法：先用软毛刷将野棉花表面的灰尘轻轻刷去，
用流水冲洗1分钟后用紫外灯照射25min，转入超净工作台，在超净
工作台上先用75％的乙醇浸泡20秒，然后再转入滴加了2～3滴土温
80的0.1％的升汞溶液中浸泡1min，再用无菌水冲洗2～3次，最后
在无菌条件下切割材料，茎段切割成0.6～0.8cm长；
(3)初代培养：在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种
在初代培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了1.6mg/L
的6-BA、0.6mg/L的NAA、2.2mg/L的GA，PH 6.4，培养温度为28℃，
光照周期13h/d，光强度为2000-2200lux，待新芽长至2.0cm左右时，
即开始下一个阶段；
(4)增殖培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养
基上，该培养基是在1/2M...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗翼，
申请(专利权)人：罗翼，
类型：发明
国别省市：广西;45