【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及传感器
，特别涉及一种检测大肠杆菌的电化学传感器，还涉及一种检测大肠杆菌的电化学传感器的制备方法。
技术介绍
大肠杆菌属于革兰氏阴性菌，学名大肠希埃氏菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢，在自然界中分布十分广泛，尤其是在温血动物的肠道和粪便中大量存在。自1885年埃斯克里奇发现大肠杆菌以后，在此后相当长的一段时间内大肠杆菌一直被看做无害的非致病菌。随着研究的进展，人们根据菌体抗原的不同，将大肠杆菌分为150多型，大多属于肠道正常菌丛，有16个为致病性大肠杆菌。大肠杆菌对外界环境中可生存一定时间，因而被粪便污染的土壤、水源可能会含有致病性大肠杆菌。致病性大肠杆菌被婴儿和幼畜（禽）摄入后可导致严重的腹泻和败血症，如非致病性大肠杆菌进入人体胆囊、膀胱等器官也可引起炎症。大肠菌群值反映了食品等被粪便污染的程度，因而对食品、药品及饮用水中大肠杆菌菌群数进行检测是十分必要的。检测大肠杆菌的传统方法主要有三种，分别是多管发酵法、滤膜法和平板计数法，这些方法有仪器操作复杂，需要专业操作人员等缺点。
技术实现思路
本研究针对现有...
【技术保护点】
一种检测大肠杆菌的电化学传感器，其特征在于从内到外依次为电极、普鲁士蓝‑碳纳米管‑纳米金复合物层、大肠杆菌抗体层、牛血清白蛋白封闭层。
【技术特征摘要】 【专利技术属性】
1.一种检测大肠杆菌的电化学传感器，其特征在于从内到外依次为电极、普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层、大肠杆菌抗体层、牛血清白蛋白封闭层。
2.根据权利要求1所述的电化学传感器，其特征在于普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层厚度为90±5nm，大肠杆菌抗体层厚度为120±10nm，牛血清白蛋白封闭层厚度为100±10nm。
3.根据权利要求1所述的电化学传感器，其特征在于普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层是通过以下步骤得到的：
（1） 多壁碳纳米管进行羧基化；
（2）制备纳米金；
（3）使用步骤（1）和（2）得到的产物制备普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物。
4.根据权利要求3所述的电化学传感器，其特征在于普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物中普鲁士蓝：碳纳米管：金质量比为2:2:1。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的电化学传感器，其特征在于
（1）电化学传感器用磷酸缓冲液冲洗之后，在E.coli溶液中孵育，再次用PBS冲洗，干燥后在大肠杆菌菌液中孵育完全，干燥后滴加HRP标记的大肠杆菌抗体，HRP标记的抗体通过与目标物之间的强识别能力，被修饰在电极表面；
（2）采用三电极系统，以Ag/AgCl为参比电极，以Pt电极为对电极，修饰电极为工作电极，以含对苯二酚和双氧水的PBS为工作底液采用差分脉冲伏安法检测，电位设置为-0.2到0.6 V，脉冲宽度0.05V，脉冲宽度扫描为0.06 S，进行检测。
6.一种权利要求1-5中任一项所述的电化学传感器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）制备普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物，滴加到经过处理的电极表面，室温干燥，得到普鲁士蓝-碳纳米管-纳米金复合物层；
技术研发人员：黄加栋，郭玉娜，王玉，刘素，崔敏，李杰，徐伟，王虹智，许颖，崔杰，邱婷婷，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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