【技术实现步骤摘要】
一种应用Triton X-114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中 内毒素的方法
本专利技术属于兽用生物制品领域中的蛋白质纯化技术，特别涉及。
技术介绍
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种成分叫脂多糖，主要由0-特异性链、核心 多糖、类脂A三部分组成，其主要毒性成分为类脂A。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工 方法破坏菌细胞后才释放出来。当含内毒素或被内毒素污染的生物制品进入畜、禽机体循 环系统后，达到一定浓度时，会引起畜、禽机体产生一系列变态反应，如高烧、休克等。 随着分子生物学技术的发展，重组蛋白生物制品逐渐被开发利用。由于大多数重 组蛋白质是利用大肠杆菌表达的，其属于革兰氏阴性菌，在纯化蛋白时需要对菌体进行破 壁，释放重组蛋白的同时，脂多糖也随之释放到缓冲液中，造成内毒素污染。 由于内毒素在强酸、强碱及高温下都极其稳定，且性质极不均一，传统的各种方法 如萃取、吸附及层析等只能去除部分内毒素，达不到畜禽临床应用的要求，很难找到一种有 效的去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法。 目前报道的方法有Triton X-114雾点法，利用Tr...
【技术保护点】
一种应用Triton X‑114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法，其特征在于：包括以下步骤：在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入Triton X‑1141ml，充分混溶得到混合物A，将所述混合物A冰浴30min；将混合物A在37℃条件下水浴放置10min，搅拌；25℃条件下，将搅拌均匀的所述混合物A在12000g下离心15min，移出上层水相；将用于去除内毒素的尿囊素直接加到所述上层水相中，得到混合物B，将所述混合物B在室温下震荡20min；25℃条件下，将震荡后的所述混合物B在5000g下离心5min，去除底层沉淀，保留上清溶液，所述上清液即为去除内毒素的VP2重组蛋白质溶液。
【技术特征摘要】
1. 一种应用Triton X-114和尿囊素去除重组蛋白质溶液中内毒素的方法，其特征在 于：包括以下步骤： 在100ml VP2重组蛋白质溶液中加入Triton X-1141ml，充分混溶得到混合物A，将所 述混合物A冰浴30min ;将混合物A在37°C条件下水浴放置lOmin，搅拌；25°C条件下，将搅 拌均匀的所述混合物A在12000g下离心15min，移出上层水相；将用于去除内毒素的尿囊 素直接加到所述上层水相中，得到混合物B，将所述混合物B在室温下震荡20min ;25°C条件 下，将震荡后的所述混合物B在5000g下离心5min，...
【专利技术属性】
技术研发人员：李明义，单学强，刘阳，李晓林，张伦，冯晶晶，李佳棋，李朝阳，乔彦良，
申请(专利权)人：山东信得科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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