保温器用于促进生物反应的用途制造技术

本发明专利技术涉及保温器、或自主加热包用于对溶液进行加热并在适当的温度维持一段时间的用途，其中所述一段时间是完成化学、生物化学或生物反应所需的，尤其是在分子生物学或细胞生物学应用中。包含保温器的生物试剂盒也是本发明专利技术的部分。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及分子和细胞生物学试剂盒的领域，还涉及用于进行需要温和供热的化 学反应的试剂盒的领域。本专利技术的主题尤其是包含简单价廉价的自主加热装置的用于处理 活检的试剂盒。
技术介绍
几年来，细胞尤其是自体细胞的移植，已经成为促进患病或受损组织再生的有效 且安全的必要方式。某些治疗规程需要在再植之前对细胞进行离体增殖和/或修饰。其 它规程基本上是为了从关注的组织的健康部分采集细胞并且所述细胞几乎立即再植于待 治疗的病变处。对于治疗皮肤疾病或病变如某些烧伤（其程度并不需要细胞扩增）、创伤 后和手术后的血红蛋白过少、消色差皮肤病、疤痕等的规程的情况尤其如此。在这些规程 中，样本处理基本上等于细胞或多或少的彻底解离，适当时，随后是分离各种细胞类型以选 择适于预期应用的细胞（例如，黑色素细胞用于消色差皮肤病）以及进行过滤以除去聚集 物。通常通过在胰蛋白酶溶液中孵育样本进行细胞解离。对于胰蛋白酶活性的最佳温度为 37°C。在此温度下，根据酶的浓度和所需解离程度，在文献中描述的孵育时间为50分钟至 3小时之间（Guerra等人2003 ;Mulekar, 2003 ;van Geel等人2004)。在较低温度下，酶活 性较低，并且有必要将孵育时间延长几个小时，从而使得不可能在同一天中进行规程的所 有步骤（Gauthier和Surleve-Bazeille, 1992)。出于这个原因，目前进行这些规程至少部 分要在具有技术平台的结构中，所述技术平台包含培养箱，而在皮肤科实践中通常不是这 种情况。 为了使未配备培养箱的操作者能够治疗患有白癜风的患者，Clinical Cell Culture公司提供了一种试剂盒（ReCeMli)，其包含进行所有步骤（从取样到细胞的再 植）所需的消耗品，还包含配备有电池的电子加热单元。这种设备具有两个主要的缺点，价 格非常高以及它的生态影响。
技术实现思路
本专利技术提供了对现有技术方案的一种有利的替代，尤其是对ReCeM1H式剂盒，因 为它基于在酶发挥作用所需时间段期间使用用于对酶溶液进行加热并维持在适当温度的 保温器（chaufferette)。术语保温器在本文表示能够发射热量的小型物体，也被称为 神奇加热瓶（bouillotte)或自主加热包（pack)，其操作是基于放热物理或化学过程。 它们通常用于加热暴露于寒冷的手或脚。在本文的其余部分，术语保温器和加热包的 使用没有区别。通过基于物理过程的保温器的实例，可以提及可重复使用的保温器，其由包 含过冷乙酸钠饱和水溶液的袋（pochette)组成。通过弯曲液体内的金属盘，产生固化的乙 酸盐结晶，其触发了结晶，从而溶液变为固体。由于这种相变在熔点（例如，对于20%的溶 液为54°C)处发生，对袋进行加热，然后一旦固化完成便冷却到环境温度。当袋冷却时，通 过将袋置于非常热的水中，（已经成为固体的）乙酸钠有可能变回液体状态。也存在化学 保温器，其中的组分通过与空气接触发生氧化而激活。它们有效的时间较长（相较于基于 过冷乙酸钠的保温器的约1小时而言，从8到60小时），但只能使用一次。 本专利技术人已经显示（如下实施例1和3)，放置在置于保温器上的容器（典型地为 平皿）中的溶液，在几分钟内，达到多种酶（例如胰蛋白酶）活性的最佳温度，并且在所述 温度下维持至少15至20分钟。 因此，首先本专利技术涉及一种用于进行生物、生物化学或化学反应的方法，其中所述 生物、生物化学或化学反应需要在30至40°C之间的温度进行孵育，其特征在于所述方法包 括激活保温器的步骤、以及让所述保温器接触容器的步骤，其中保温器的操作基于放热物 理或化学过程，所述容器包含参与所述反应的试剂。这种方法在生物、医学或诊断应用的内 容中特别有利。 在这种方法的一个具体实施中，让保温器接触容器的步骤是通过将保温器和至少 容器的下部分放置在为此目的而提供的支持物腔内进行的。首先，这种支持物使得能够适 当地将容器楔入（caler)保温器上，从而限制了倾翻的风险。此外，利用具有低热导率的绝 缘支持物，使得能够限制热从保温器损失并且促进热从保温器传递至待加热的溶液。在一 个优选的实施方式中，腔的深度使得能够在其中放置保温器以及仅容器的下部分。以这种 方式，容器被适当地楔入在保温器上，没有滑动的危险，并且它仍然易于操作者去抓握。 在上述方法中，保温器的使用、以及适当时绝缘支持物的使用，使得能够将生物、 生物化学或化学溶液的温度在30至40°C之间维持所需的时间（从几分钟至几十分钟，例 如5、10、15、18、20分钟或更长时间）。这种使用保温器（一种通常用于户外休闲活动（滑 雪，、登山等）的简单廉价的物体）进行生物（分子或细胞生物学）或化学过程，来替代实 验室设备的尖端产品是有利的，因为令人惊讶的是它使得能够非常节约而不损害所得结果 的质量。 在上述中，术语生物反应适用于任何涉及源自活体元素的反应，例如活细胞 (源自活检的动物细胞、植物细胞、酵母或细菌）、病毒、细胞器、酶、代谢产物等。生物化学 反应利用涉及生命体（酶、糖、脂等）化学反应的物质。 根据本专利技术的方法的一个【具体实施方式】，容器包含酶溶液，并且保温器和容器的 接触维持至少10分钟。根据一个具体的实施方式，在细胞生物学过程的情况下使用保温 器，酶溶液包含源自活检的细胞，例如待解离的组织样本。在这种情况下，酶溶液包含，例如 膜蛋白酶。 对于需要不到一小时孵育的反应，保温器优选由包含乙酸钠饱和水溶液的密闭塑 料袋组成。然而，本专利技术也与化学保温器一起使用，从而实现更长的孵育。 根据本专利技术方法的一个【具体实施方式】，包含乙酸钠的袋类型的所用保温器是厚度 在3至7mm，优选4至6mm之间且直径在7至Ilcm,优选8至IOcm之间的盘，包含参与反应 的试剂的溶液具有在3至IOml之间的体积，并且所述溶液包含在具有7至11cm，优选8至 IOcm之间的直径的平皿中、或所述皿的区室（compartiment)中。术语平皿在本文中的 意思是指由玻璃或塑料制成的有盖的浅的透明圆柱型皿。在本专利技术的某些具体实施中，例 如通过沿着一条直径设置小壁垒对平皿进行划分。当在这种【具体实施方式】的情况中使用支 持物时，用于接纳保温器的腔也是圆形的，其直径比保温器的直径（在7至11. 5cm之间） 稍大，并且具有5至20mm的深度。 本专利技术还涉及一种用于解离细胞的方法，所述细胞源自新鲜获取的组织样本，所 述方法包括如下步骤： (i)在由包含乙酸钠饱和水溶液密闭塑料袋组成的保温器中起始结晶；任选地， 将所述保温器置于在支持物中为此目的而提供的腔中，优选绝缘支持物； (ii)将包含胰蛋白酶溶液的容器置于所述保温器上，胰蛋白酶的浓度在0.2%至 1%之间； (iii)将组织样本置于所述溶液中并且孵育至少10分钟，优选15至20分钟； (iv)洗涤所述组织样本。 当然，在该方法的实施中，注意确保保温器的、容器的、以及适当时绝缘支持物腔 的几何形状是这样的，即保温器和容器之间有大的交换表面积。根据一个具体的实施方式， 如上述，保温器具有盘形，并且容器是平皿。在这种情况下，这两个元件的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于进行生物、生物化学或化学反应的方法，其中所述生物、生物化学或化学反应需要在30至40℃之间的温度进行孵育，其特征在于所述方法包括激活保温器的步骤和让所述保温器接触容器的步骤，其中激活保温器的操作基于放热物理或化学过程，所述容器包含参与所述反应的试剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.06.07 FR 12553331. 一种用于进行生物、生物化学或化学反应的方法，其中所述生物、生物化学或化学反 应需要在30至40°C之间的温度进行孵育，其特征在于所述方法包括激活保温器的步骤和 让所述保温器接触容器的步骤，其中激活保温器的操作基于放热物理或化学过程，所述容 器包含参与所述反应的试剂。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于让所述保温器接触容器的步骤是通过将所 述保温器和至少所述容器的下部分放置在为此目的而提供的支持物腔内进行的。3. 根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于所述容器包含酶溶液，并且保 温器和容器之间接触维持至少10分钟。4. 根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于所述保温器由包含乙酸钠饱 和水溶液的密闭塑料袋组成。5. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于包含参与反应的试剂的溶液体积在3至 10ml之间，包含所述溶液的所述容器是直径在7至11cm之间的平皿或者是所述皿的区室， 以及所述保温器是厚度在3至7_之间且直径在7至11cm之间的盘。6. 根据权利要求2和5所述的方法，其特征在于用来接纳保温器的所述支持物的腔是 圆形的，直径在7至11. 5cm之间，且深度在5至20mm之间。7. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其用于解离源自组织样本的细胞，所述方 法包括如下步骤： (i) 在由包含乙酸钠饱和水溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·瓦谢，JN·古泽，
申请(专利权)人：热内弗里埃实验室，
类型：发明
国别省市：法国;FR