一种当归药材的检测方法技术

本发明专利技术属于中药材质量检测领域，具体涉及一种当归药材的检测方法。该检测方法包括当归药材中藁本内酯和阿魏酸的含量测定以及农药残留量的测定。本发明专利技术的检测方法不仅检测的准确度高，方法简单、快速，而且可同时完成多个检测指标，准确率及实用效果均较好，更有利于对当归药材质量的控制，有助于提高该药物使用的安全性和稳定性。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于中药材质量检测领域，具体涉及。该检测方法包括当归药材中藁本内酯和阿魏酸的含量测定以及农药残留量的测定。本专利技术的检测方法不仅检测的准确度高，方法简单、快速，而且可同时完成多个检测指标，准确率及实用效果均较好，更有利于对当归药材质量的控制，有助于提高该药物使用的安全性和稳定性。【专利说明】
本专利技术属于中药材质量检测领域，具体涉及一种当归药材的质量检测方法。
技术介绍
当归为伞形科植物当归的干燥根，当归味甘、辛、性温，具有补血活血、调经止痛、 促进血液循环、抗炎镇痛、保肝利胆、润肠通便等功效。当归药用历史悠久，历代本草均有记 载，是中医常用中草药之一，素有"十方九归"之称。在卫生部公布的《关于进一步规范保健 食品原料管理的通知》中，当归为可用于保健食品的原料。当归为甘肃道地药材，甘肃岷县 当归（俗称"岷归")，已有1700多年的栽培历史，是中国当归原产地和主产地，2002年获得 中国当归原产地地理标记【中华人民共和国质检总局（2002)年第133号】，种植面积产量占 全国90%。 当归的成分大体上分为两部分：一部分为脂溶性物质（当归油），另一部分为水溶 性物质（当归多糖类物质）。当归油具有补血活血、促进血液循环、缓解血管平滑肌痉挛、抗 炎镇痛、平喘、保肝利胆等作用，可治疗月经不调、痛经、子宫肌瘤及哮喘治疗等病症，也被 用于治疗心脑血管疾病，是目前市场上较为畅销的医药中间体和保健食品原料，同时当归 油也还广泛应用于化妆品及香料工业。 中药材的质量直接影响中药产品的品质及药效，衡量中药材质量标准除中药自身 的有效成分外，还包括化学农药及重金属的污染情况。近年来，中药领域的大力发展以及中 药材需求量的加大，导致大量伪劣药材的上市，其中不少伪品的农药残留量严重超标，给当 归药材的质量、用药的安全性及有效性造成了很大的冲击。药材农药残留问题日益引起世 界各国的重视，国际上从1970年起开始研究药材农药残留量问题，1980年世界卫生组织将 农药残留测定单独列为检测项目，近年来成为世界性的研究热点。 但是，现存的当归药材的检测方法或者只进行有效成分的含量测定，或者只测定 其农药残留量，检测指标比较单一，而且对农药的检测也大多借鉴于其他产品的检测方法， 并没有针对当归药材常见农药的一次性检出方法，导致对于当归药材常见农药的检测需要 多次检测才能完全，不利于当归药材的质量控制以及当归使用的安全性和稳定性。因此，建 立一种快速、全面、针对性强的当归药材的质量检测方法具有重要的意义。
技术实现思路
为此，本专利技术所要解决的技术问题在于现有技术中当归药材检测指标单一，不利 于当归药材的质量控制，进而提供一种快速、全面、针对性强的当归药材的检测方法。 本专利技术的当归药材的检测方法，该方法包括如下有效成分的含量测定步骤以及农 药残留量的测定步骤，其中， A、藁本内酯的含量测定包括如下步骤： (1)精密称取藁本内酯对照品10. 14mg，加乙腈定容至10mL，得到每lmL含 1.014mg的储备溶液；精密吸取5mL上述储备溶液，加乙腈定容至50mL，得到每lmL含 101. 4yg的对照品溶液； (2)精密称定待测当归药材粉末0. 2g，精密加入70%甲醇20mL，称定重量，超声40 分钟；用70%甲醇补足减失的重量，摇匀静置，取上清液经0. 45 μ m滤膜滤过，取续滤液，即 得供试品溶液； (3)照高效液相色谱法试验，以Diamonsil ODS C18柱为色谱柱；以乙腈为流动相 A、以1 %的乙酸水溶液为流动相B，控制流速为1. OmL/min进行梯度洗脱，上述洗脱梯度程 序具体为：〇_15min，A :B 为 38%:62%;15-20min，A :B 为 38%:62%- 70%:30%;20-40min， A :B为70% :30% ;在328nm检测波长，柱温为室温条件下测定；分别精密吸取对照品、供试 品溶液各10 μ L注入液相色谱仪，测定；理论板数按藁本内酯峰计算应不低于5000 ; Β、阿魏酸的含量测定包括如下步骤： (1)精密称取阿魏酸对照品10mg，置棕色量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至50mL ; 精密量取3mL溶液，加70%甲醇定容至50mL，摇匀得每lmL含12 μ g阿魏酸的对照品溶液； (2)精密称取待测当归药材粉末0· 2g，加入70%甲醇20mL，称定重量，加热回流30 分钟，放冷后再称定重量，并用70%甲醇补足减失的重量，静置取上清液以微孔滤膜滤过， 取续滤液，得供试品溶液； (3)照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为17 : 83的乙腈-0. 085%磷酸溶液为流动相洗脱；检测波长为316nm ;柱温35°C ;分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各10 μ L，注入液相色谱仪，测定； C、农药残留量的测定包括如下步骤： (1)精密称取三苯基磷酸酯适量，加丙酮制成每lmL含100 μ g三苯基磷酸酯的溶 液，作为内标贮备液； 分别精密量取各农药对照品贮备溶液lmL及上述内标贮备液lmL，加丙酮定容至 100mL，作为混合对照品贮备溶液；分别精密量取适量，加乙腈定容制成20-1000ng/mL的不 同浓度的溶液，作为混合对照品溶液； 另取核糖酸内酯适量，加乙腈溶解制成每lmL含20mg核糖酸内酯的溶液，另取山 梨醇适量，加水溶解制成每lmL含山梨醇10mg的溶液；分别精密量取上述核糖酸内酯、山梨 醇溶液各lmL混勻，加乙腈定容至10mL，作为分析保护剂； (2)精密称取待测药材细粉10g，并加入氯化钠 lg混匀，精密加入丙酮100mL，冰 浴超声处理30分钟，离心，将上清液迅速移入装有lg无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置30 分钟；随后精密量取上述溶液60mL减压浓缩至近干，并加入体积比为1 :1的环已烷-乙酸 乙酯溶液溶解样品并定容至10mL，过滤后取滤液经GPC凝胶渗透色谱净化，以体积比为1 : 1的环已烷-乙酸乙酯溶液为流动相洗脱，收集洗脱液，移入KD瓶中，减压浓缩至近干； 向上述样品中加入体积比为1 :1的乙酸乙酯-丙酮混合溶液5mL溶解，并转移至 石墨碳-氨基混合固相萃取小柱上，以体积比为1 :1的乙酸乙酯-丙酮混合溶液15mL洗 脱，收集洗脱液，氮吹至近干，随后加入上述内标贮备液5 μ L，加乙腈定容至lmL，作为供试 品溶液； (3)精密量取上述各浓度混合对照品溶液及供试品溶液各400 μ L，并分别加入上 述分析保护剂1〇〇 μ L混匀，随后分别精密吸取1 μ L，进行气相色谱-质谱联用仪测定；其 中， 上述气相色谱分析条件为：取规格为30mX0. 25mmX0. 25um的弹性石英毛细管柱 DB17ms，以高纯氦气为载气，柱流速1. 3mL/分钟，进样量1 μ L，采用高压不分流进样，设置 进样口温度为230°C，升温程序具体为：初始温度60°C，以30°C /分钟升至120°C、以10°C / 分钟升至200°C、以2°C /分钟升至230°C、以30°C /分钟升至300°C，并保持7分钟； 上述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种当归药材的检测方法，该方法包括如下藁本内酯和阿魏酸的含量测定步骤以及农药残留量的测定步骤，其中，A、藁本内酯的含量测定包括如下步骤：(1)精密称取藁本内酯对照品10.14mg，加乙腈定容至10mL，得到每1mL含1.014mg的储备溶液；精密吸取5mL所述储备溶液，加乙腈定容至50mL，得到每1mL含101.4μg的对照品溶液；(2)精密称定待测当归药材粉末0.2g，精密加入70％甲醇20mL，称定重量，超声40分钟；用70％甲醇补足减失的重量，摇匀静置，取上清液经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；(3)照高效液相色谱法试验，以Diamonsil ODS C18柱为色谱柱；以乙腈为流动相A、以1％的乙酸水溶液为流动相B，控制流速为1.0mL/min进行梯度洗脱，所述洗脱梯度程序具体为：0‑15min，A：B为38％：62％；15‑20min，A：B为38％：62％→70％：30％；20‑40min，A：B为70％：30％；在328nm检测波长，柱温为室温条件下测定；分别精密吸取对照品、供试品溶液各10μL注入液相色谱仪，测定；理论板数按藁本内酯峰计算应不低于5000；B、阿魏酸的含量测定包括如下步骤：(1)精密称取阿魏酸对照品10mg，置棕色量瓶中，加70％甲醇溶解并稀释至50ml；精密量取3mL溶液，加70％甲醇定容至50mL，摇匀得每1mL含12μg阿魏酸的对照品溶液；(2)精密称取待测当归药材粉末0.2g，加入70％甲醇20mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷后再称定重量，并用70％甲醇补足减失的重量，静置取上清液以微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液；(3)照高效液相色谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为17：83的乙腈‑0.085％磷酸溶液为流动相洗脱；检测波长为316nm；柱温35℃；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定；C、农药残留量的测定包括如下步骤：(1)精密称取三苯基磷酸酯适量，加丙酮制成每1mL含100μg三苯基磷酸酯的溶液，作为内标贮备液；分别精密量取各农药对照品贮备溶液1mL及所述内标贮备液1mL，加丙酮定容至100mL，作为混合对照品贮备溶液；分别精密量取适量，加乙腈定容制成20‑1000ng/mL的不同浓度的溶液，作为混合对照品溶液；另取核糖酸内酯适量，加乙腈溶解制成每1mL含20mg核糖酸内酯的溶液，另取山梨醇适量，加水溶解制成每1mL含山梨醇10mg的溶液；分别精密量取上述核糖酸内酯、山梨醇溶液各1mL混匀，加乙腈定容至10mL，作为分析保护剂；(2)精密称取待测药材细粉10g，并加入氯化钠1g混匀，精密加入丙酮100mL，冰浴超声处理30分钟，离心，将上清液迅速移入装有1g无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置30分钟；随后精密量取上述溶液60mL减压浓缩至近干，并加入体积比为1：1的环已烷‑乙酸乙酯溶液溶解样品并定容至10mL，过滤后取滤液经GPC凝胶渗透色谱净化，以体积比为1：1的环已烷‑乙酸乙酯溶液为流动相洗脱，收集洗脱液，移入KD瓶中，减压浓缩至近干；向上述样品中加入体积比为1：1的乙酸乙酯‑丙酮混合溶液5mL溶解，并转移至石墨碳‑氨基混合固相萃取小柱上，以体积比为1：1的乙酸乙酯‑丙酮混合溶液15mL洗脱，收集洗脱液，氮吹至近干，随后加入所述内标贮备液5μL，加乙腈定容至1mL，作为供试品溶液；(3)精密量取上述各浓度混合对照品溶液及供试品溶液各400μL，并分别加入所述分析保护剂100μL混匀，随后分别精密吸取1μL，进行气相色谱‑质谱联用仪测定；其中，所述气相色谱分析条件为：取规格为30m×0.25mm×0.25um的弹性石英毛细管柱DB17ms，以高纯氦气为载气，柱流速1.3mL/分钟，进样量1μL，采用高压不分流进样，设置进样口温度为230℃，升温程序具体为：初始温度60℃，以30℃/分钟升至120℃、以10℃/分钟升至200℃、以2℃/分钟升至230℃、以30℃/分钟升至300℃，并保持7分钟；所述EI源质谱测定的条件为：设置电子能量70eV，离子源温度230℃，接口温度250℃。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨锡，陈杰，李波，韩斌，李登鹏，宋平顺，何禄仁，赵建邦，王兰霞，杨静，
申请(专利权)人：甘肃中天药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：甘肃;62