一种川楝组织培养的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种川楝组织培养的快速繁殖方法，包括川楝无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明专利技术采用组织培养方法可以培育优质种苗，缩短培养周期，保存种质资源，为川楝的开发利用提供基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及川楝组织培养的快繁方法，属于植物
。
技术介绍
川楝，Melia 11seWa/?,又名金铃子、川楝实，中药材，为楝科落叶乔木川楝树的成熟果实。产于中国甘肃、湖北、四川、贵州和云南等省，其他省区广泛栽培；生于土壤湿润，肥沃的杂木林和疏林内，以四川产者为最佳，分布于日本、中南半岛。川楝子性寒，味苦，是行气药的一种，喜温暖湿润气候，喜阳，不耐荫蔽，在海拔IlOOm以下均可生长。有舒肝行气止痛，驱虫的药效，用于胸胁、脘腹胀痛，疝痛，虫积腹痛。而且还是制作高效无残毒无污染的新型植物性农药的重要原料，川楝子苦寒沉降，主要入肝经，疏泄肝热，行气止痛，治气郁，目前主要用种子繁殖，采用育苗移栽的方法，组织培养技术尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供，本专利技术方法采用组织培养可以培育优质种苗，缩短培养周期，保存种质资源，为川楝的开发利用提供基础。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:取川楝幼嫩的叶片，流水冲洗13min,超净工作台上0.1%氯化萊消毒处理8min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%-20%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照28001x，温度25±2°C，分化出来的芽苗接入l/3MS+300-400ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照60001x，温度25±2°C，将生根后的川楝放入田园土:蛭石:锯末=3:1:1基质中，使用自动喷水装置，每三天喷洒一次90ppmNAA溶液，每两周喷施600倍的多菌灵溶液，温度28°C，光照强度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照时间8h，PH5.8，湿度85%，一个月后统计成活率。 采用本专利技术制备的川楝成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1取川楝幼嫩的叶片，流水冲洗13min,超净工作台上0.1%氯化萊消毒处理8min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT1.5mg/L+2，4-D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照28001x，温度25±2°C，分化出来的芽苗接入l/3MS+300ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L, pH5.8，光照60001x，温度25±2°C，将生根后的川楝放入田园土:蛭石:锯末=3:1:1基质中，使用自动喷水装置，每三天喷洒一次90ppmNAA溶液，每两周喷施600倍的多菌灵溶液，温度28°C，光照强度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照时间8h，PH5.8，湿度85%，一个月后统计成活率，成活率88%。 实施例2取川楝幼嫩的叶片，流水冲洗13min,超净工作台上0.1%氯化萊消毒处理8min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT 1.5mg/L+2，4-D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+20%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照28001x，温度25±2°C，分化出来的芽苗接入l/3MS+400ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L, pH5.8，光照60001x，温度25±2°C，将生根后的川楝放入田园土:蛭石:锯末=3:1:1基质中，使用自动喷水装置，每三天喷洒一次90ppmNAA溶液，每两周喷施600倍的多菌灵溶液，温度28°C，光照强度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照时间8h，PH5.8，湿度85%，一个月后统计成活率，成活率89%。 实施例3取川楝幼嫩的叶片，流水冲洗13min,超净工作台上0.1%氯化萊消毒处理8min,无菌水冲洗6次，消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+20%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照28001x，温度25±2°C，分化出来的芽苗接入l/3MS+300ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L, pH5.8，光照60001x，温度25±2°C，将生根后的川楝放入田园土:蛭石:锯末=3:1:1基质中，使用自动喷水装置，每三天喷洒一次90ppmNAA溶液，每两周喷施600倍的多菌灵溶液，温度28°C，光照强度ΙΟΟΟΟΙχ，每天光照时间8h，PH5.8，湿度85%，一个月后统计成活率，成活率90%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种川楝组织培养的快速繁殖方法，包括川楝无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取川楝幼嫩的叶片，对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT1.5mg/L+2，4‑D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2℃；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%‑20%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2800lx，温度25±2℃；（4）取步骤（3）分化出来的芽苗接入1/3MS+300‑400ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照6000lx，温度25±2℃；（5）取步骤（4）的试管苗进行炼苗移栽。

【技术特征摘要】
1.一种川楝组织培养的快速繁殖方法，包括川楝无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取川楝幼嫩的叶片，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的川楝幼嫩叶片接入BL+ZT1.5mg/L+2,4-D0.2mg/L+15%丝瓜伤流液，附加0.7%琼脂和30g/L蔗糖的诱导培养基中，pH5.8，暗光照培养，温度25±2°C; (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基BL+NAA1.4mg/L+ZT2.5mg/L+10%-20%丝瓜伤流液进行愈伤组织分化，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照28001x，温度25±2°C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗接入l/3MS+300-400ppm生根粉培养基中进行生根诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，ρΗ5.8，光照6000...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京帝道农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32