包含miRNA的调节色素形成的组合物制造技术

本发明专利技术提供包含SEQ NO.1的miRNA或者SEQ NO.2的反义引物核酸分子的，用于美白或者防止白发的组合物，其中反义引物核酸分子具有与SEQ NO.1的互补序列，且能与所述miRNA杂交。并且，本发明专利技术还提供调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选的调节色素形成，还能调节色素形成基因表达的方法，所述方法包括：将SEQ NO.1的miRNA或者SEQ NO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；用试验物质处理所述细胞的步骤；以及确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；确认细胞颜色是否变化的步骤。本发明专利技术的组合物以及筛选方法可为美白效果或者防止白发效果而使用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术提供包含SEQ?NO.1的miRNA或者SEQ?NO.2的反义引物核酸分子的，用于美白或者防止白发的组合物，其中反义引物核酸分子具有与SEQ?NO.1的互补序列，且能与所述miRNA杂交。并且，本专利技术还提供调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选的调节色素形成，还能调节色素形成基因表达的方法，所述方法包括：将SEQ?NO.1的miRNA或者SEQ?NO.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；用试验物质处理所述细胞的步骤；以及确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；确认细胞颜色是否变化的步骤。本专利技术的组合物以及筛选方法可为美白效果或者防止白发效果而使用。【专利说明】包含miRNA的调节色素形成的组合物
本专利技术涉及微RNA CmicroRNA:以下将称为miRNA) hsa_miR-125b (以下将称为miR-125b)的鉴定，其可调节色素形成以及色素形成基因的表达。本专利技术还涉及包含miR-125b或者其模仿体(mimi c )的美白用化妆品组合物或者药物组合物以及包含miR-125b抑制剂(i nhibitor)的防止白发的化妆品组合物或者药物组合物。
技术介绍
miRNA是存在于细胞内的20-25个核酸长度的内源性小RNA (en dogenoussmall RNA)的一种,其来源于不合成蛋白质的DNA,从发卡结构的转录体(hairpin-shapedtranscript)生成。miRNA结合于目标mRNA的3’ -UTR的互补序列,诱导该序列mRNA的翻译抑制或者不稳定化，最终起到抑制其目标mRNA的蛋白质合成的抑制剂(repr essor)的作用。据报道，一个miRNA可将多个mRNA作为目标，而m RNA也可被多个miRNA调节。 目前，随着miRNA在多种生物过程中起到的重要作用被人们所认识，其在生物科学领域收到了非常大的关注，所述作用包括调节发育期、细胞凋亡期、脂肪代谢以及造血细胞分化。然而与癌症等疾病发生过程中的miRNA的功能研究取得相当大的进展相比，在皮肤科学领域中对于miRNA的作用研究则是非常少的状态。近期，虽然有报道称miR-203将角质形成细胞中的p63mRNA作为目标，抑制其分化能力；以及miR_125b抑制皮肤干细胞的分化，但是几乎没有对其他皮肤相关特异性miRNA以及其功能的报道。然而，可预测miR-203和miR125b之外，还有很多特定miRNA在皮肤中起到重要的生物学作用。并且，由于miRNA可在生物学标记物以及材料等多个领域被应用，因此可判断关于皮肤中miRNA的研究也可以多种形式应用于化妆品以及医药工业等。 皮肤大体可分为表皮层和真皮层，其中表皮层中存在的色素形成细胞可合成色素使皮肤呈固有的颜色。调节皮肤色素的生物因子可大体分为在色素形成细胞中合成黑色素体(melanosome)的因子和运输黑色素体的因子。最普遍所知的合成黑色素体的因子包括酪氨酸酶(t yr0SinaSe，TYR)等，运输黑色素体的因子包括Rab27a等。近期有报道称PAX3、MITF等转录因子也参与色素调节过程。因此，所述色素调节因子可成为皮肤美白、黑发生成或者防止白发的重要靶标。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题 本专利技术专利技术人选择了皮肤色素形成基因表达较多的WM266-4黑色素瘤细胞，进行了寻找与色素形成相关miRNA的研究,其结果表明hsa-miR-125b抑制酪氨酸酶mRNA的表达，并调节色素形成。 因此，本专利技术的目的在于，提供一种包含miR_125b或者其模仿体的具有美白效果的组合物。 并且，本专利技术的目的在于，提供一种包含miR_125b抑制剂的具有防止白发效果的组合物。 技术方案 为实现上述目的，本专利技术提供一种包含SEQ N0.1的miRNA作为有效成分的调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物。 并且，提供包含SEQ N0.2的反义引物核酸分子作为有效成分的调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物，所述反义引物核酸分子具有与SEQ N0.1互补的碱基序列，且能与所述miRNA杂交。 并且，本专利技术提供调节色素形成以及色素形成基因表达物质的筛选方法，该方法是从试验物质中筛选能调节色素形成基因表达以及色素形成的物质的方法，所述方法包括:Ca)将SEQ N0.1的miRNA或者SEQ N0.2反义引物的核酸分子转染至细胞的步骤；(b)用试验物质处理所述细胞的步骤；以及(c)确认所述试验物质是否抑制或促进色素形成基因表达的步骤；(d)确认细胞颜色是否变化的步骤。 有益效果 包含本专利技术中的SEQ N0.1的miRNA或者SEQ N0.2反义引物的核酸分子的组合物，可调节色素形成基因酪氨酸酶mRNA的表达，从而调节色素形成，因此可提供具有美白效果或者防止白发效果的组合物。 【专利附图】【附图说明】 图1是将与hsa-miR_125b具有相同序列的寡核苷酸(oligonucleoti de)转染至细胞内，诱导hsa-miR-125b过表达的现象后,进行实时聚合酶链式反应确认酪氨酸酶mRNA表达量的结果(TYR:酪氨酸酶)。 图2是将与hsa-miR_125b具有相同序列的寡核苷酸(oligonucleoti de)转染至细胞内，诱导hsa-miR-125b过表达的现象后,进行蛋白免疫印迹确认酪氨酸酶蛋白质表达量的结果(TYR:酪氨酸酶)。 图3是将与hsa-miR_125b具有互补序列的寡核苷酸(oligonucleoti de)转染至细胞内，与存在于细胞内的miR-125b结合，并抑制其功能后，进行实时聚合酶链式反应确认酪氨酸酶mRNA表达量的结果(T YR:酪氨酸酶)。 图4是将丽266-4细胞株用已知能增加色素形成相关基因的表达的毛喉素(forskolin)进行处理，诱导增加色素形成相关基因的表达后，进行能测定miR-125b表达量的miRNA实时聚合酶链式反应，从而确认根据毛喉素处理浓度的增加miR125b表达量的结果。 图5是将与hsa-miR_125b具有相同序列的寡核苷酸转染至人来源色素形成细胞的细胞内，诱导hsa-miR-125b的过表达的现象后，通过细胞离心制备细胞团块后观察其颜色，从而确认细胞色素形成变化的结果。 最佳实施方式 以下，将详述本专利技术。 本专利技术提供能调节色素形成以及色素形成基因表达的SEQ N0.1的miRNA。 本专利技术的所述色素形成基因是酪氨酸酶mRNA。 5，-ucccugagacccuaacuuguga-3，(SEQ N0.1) 本专利技术中使用的miRNA是由所述SEQ N0.1的碱基序列所示,且包含cccugag的22个连续碱基序列的寡核苷酸分子。并且，miRNA包括SEQ N0.1的碱基序列，并具有调节色素形成以及色素形成基因表达功能的序列。 所述miRNA可抑制色素形成，并抑制与色素形成相关基因的表达。 本专利技术的一实施例中，可利用SEQ N0.1的miRNA制备具有与hsa-miR_125b相同序列的寡核苷酸分子(oligonucleotide),作为hsaniR-125b的模仿体。并且,h本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于调节色素形成以及色素形成基因表达的组合物，其特征在于，其包含SEQ NO.1的miRNA作为有效成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：金奎翰，崔贤贞，宾范浩，李泰龙，
申请(专利权)人：株式会社爱茉莉太平洋，
类型：发明
国别省市：韩国;KR