一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶及其制备方法。所述固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，包括碳纳米管基质和洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，所述洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶通过亲和吸附和/或共价结合的方式结合在碳纳米管基质的开放端口、表面和内壁。所述制备方法包括以下步骤：(1)硫酸超声处理碳纳米管；(2)制备碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液；(3)将碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液在4℃至60℃下，振荡反应，获得所述固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶。本发明专利技术提供的固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶增加了酶蛋白在反应体系中的分散性，获得了较高的转酯催化酶活，大大缩短了达到反应平衡所需的时间。

【技术实现步骤摘要】
一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶及其制备方法
本专利技术属于酶的固定化领域，更具体地，涉及一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶。
技术介绍
洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶(BCL)是一种胞外脂肪酶，在水相和非水相均具有催化活性。BCL对多种有机溶剂具有较高抗性，因此广泛应用于非水相催化反应，尤其在制备生物柴油及手性药物的对映拆分领域有着较多应用。但由于酶蛋白本身具有较强的亲水性，游离的酶粉不易分散于溶剂中，能够形成的相对有效的反应界面较小，故存在催化活性低、反应时间长等缺点，在一定程度上限制了BCL在工业上的应用。然而，将固定化酶技术应用于BCL的制备，能够提高BCL在非水相溶剂中的转酯酶活，缩短反应时间。固定化酶技术在实际生产中应用已经得到了一定的实现，目前已有的BCL固定化方法根据固定化作用力主要分为化学法和物理法。化学方法主要有无载体交联法的使用，HaraP,HanefeldU,KanervaLT分别用溶胶包埋法和无载体交联法对BCL进行了固定化，两种不同固定化方法的反应时间仍需要24h以上，化学方法介导制备的固定化酶通常具有较好的稳定性和良好的再利用率，因为制备过程中形成的化学键连接本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，其特征在于，包括碳纳米管基质和洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，所述洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶通过亲和吸附和/或共价结合的方式结合在碳纳米管基质的开放端口、表面和内壁。

【技术特征摘要】
1.一种固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，其特征在于，包括碳纳米管基质和洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶，所述洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶通过亲和吸附的方式结合在碳纳米管基质的开放端口、表面和内壁；所述碳纳米管基质为经浓硫酸超声处理的碳纳米管，所述超声处理条件为：200W至250W，2小时至5小时。2.如权利要求1所述的固定化的洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)硫酸超声处理碳纳米管：将每克碳纳米管与100ml至300ml的浓硫酸均匀混合，200W至250W超声处理2小时至5小时，洗涤并过滤后干燥，研磨得到硫酸超声处理的碳纳米管；(2)制备碳纳米管与洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶混合液：将步骤(1)中获得的硫酸超声处理的碳纳米管加入到洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶溶液中，使得所...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫云君，柯彩霞，李相，徐莉，张后今，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42