【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种HPV16aE7/huhsp70融合蛋白质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将野生型E7蛋白的pRb结合位点Cys24Gly，Glu26Gly，CK II位点Ser31Gly，Ser32Gly以及锌指结合区Cys58Gly，Cys91Gly突变，同时在蛋白E7蛋白N端和C端分别添加E7特异性的CTL抗原表位11‑20aa，49‑57aa和Th辅助细胞抗原表位30‑67aa，获得改造优化后的HPV16mE7基因，构建pET‑30a‑mE7原核表达载体，构建好huhsp70的原核表达载体pET‑30a‑huhsp70，将mE7与huhsp70融合，插入原核表达载体，构建原核表达质粒pET30a‑mE7/huhsp70，在大肠杆菌BL21DE3进行蛋白诱导表达，用SDS‑PAGE和免疫印迹法鉴定三种蛋白的表达活性，然后进行重组蛋白的可溶性分析及纯化。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：宗金宝，王昌媛，孙桂荣，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东;37
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