本发明专利技术公开了中药龙眼肉有效部位在制备与抗衰老机制相关的药物中的应用。具体是在体外龙眼肉水部位对Aβ25-35致PC12细胞的毒性具有明显保护作用，在体内龙眼肉水部位具有明显改善老年性痴呆模型小鼠SAMP8的记忆行障碍作用，具有提高SOD、GSH-PX含量而发挥抗氧化的作用。
【技术实现步骤摘要】
龙眼肉有效部位在制备与抗衰老机制相关的药物中的应用
[0001 ] 本专利技术涉及一种中药制药领域,具体涉及中药龙眼肉水部位在制备与抗衰老机制相关的药物中的应用。
技术介绍
氧是人类生存必须的元素，但如果体内的氧化还原平衡遭到破坏，多余的氧自由基会对身体造成氧化损伤。越来越多的研究证明，此类氧化损伤直接参与了老年痴呆症等多种神经退行型疾病的病理过程。搞清楚氧化应激损伤的来源及有效的抗氧化途径，对理解老年痴呆症等神经退行型疾病的致病机理以及发展新型的治疗方法有很重要的意义。老年性痴呆(阿尔茨海默病，Alzheimer’s disease, AD),是一种原因未明、以认知功能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病，已成为世界范围内危害人类蚀康最严重的疾病之一。起病缓、进展慢，病程为5~10年，临床上表现为记忆障碍、失语、失用、失认、视空间功能损坏、抽象思维和计算损坏、人格和行为改变等。随着老年人群的增长，AD已成为现代社会的常见病。研究发现，75~85岁老人中，痴呆的发病率与心脏病相似，约为2.4% ;美国的Baltimore市和瑞典的研究显示，60~65岁AD发病率为1%。其他社区研究显示:65岁以上严重痴呆的患病率4.6%，其中轻至中度认知功能障碍者超过10%。近年流行病学资料显示，目前我国65岁以上人群的患病率约为5%，而85岁以上患病率约为20%,而且随着我国人口期望寿命的增加，其患病人数会逐渐增多。预计到2050年，我国AD患者将达2500万以上，到时将成为影响家庭和社会发展的一个重要制约因素。防治AD已成为目前世界医药界的热点和难点。对于AD的治疗，国内外学者都进行了大量的研究工作，而且也取得了一些新的进展。但由于AD的形成过程比较复杂，也涉及多环节，多个系统的异常。所以对于AD的治疗至今还缺乏比较理想的药物。因此，深入探讨AD的发病机制，寻找有效预防和治疗AD的药物有重要的意义。龙眼别名桂圆、益智，无患子科，龙眼属；性味，甘、平温、无毒。归经，入心、脾、胃。龙眼肉具有有壮阳益气、补益心脾、养血安神等多种功效。有抗老防衰的作用，因为它能抑制人体内使人衰老的一种酶的活性，加上所含的丰富的蛋白质维生素及矿物质，久食可“使人轻身不老”；龙眼还能补气养血，对神经衰弱、智力减退都有很好的疗效，是健脑益智的佳品。现代药理研究表明用不同浓度龙眼肉连续灌胃30d AD模型小鼠，做跳台实验和Y迷宫实验发现治疗组学习记忆能力显著升高，龙眼肉具有调节过氧化酶活性，预防氧化应激功能，龙眼肉提取物不仅可以调节大脑中内源性的氧化应激损伤，而且对神经毒诱导的氧化应激也有调节作用，还可以影响海马区淀粉样蛋白级联，改变β淀粉样蛋白在PSAPP小鼠脑内的病理学，调整伴随阿尔茨海默病神经变性改变的氧化应激反应。
技术实现思路
本专利技术公开了一种龙眼肉水部位提取物及其应用。龙眼肉用乙醇浸提得总提物，加水溶解成混悬液，离心取上清液，减压浓缩干燥，得水部位提取物。通过体内、体外药理实验均证明水部位具有抗氧化与抗老年痴呆的药理作用，可用于制备与抗氧化机制相关的抗老年性痴呆药物的药物。具体方法和结果通过以下实验证实:一、龙眼肉水部位的制备I药材龙眼肉:龙眼肉购于广西南宁中药材批发站，经广西中医药大学韦松基教授鉴定为无患子科龙眼属植物龙眼(Dimocarpus longan Lour.)的果肉。2提取与分离:将干燥的龙眼肉制成粗粉，分别用95 %、70 %、50 %乙醇浸溃提取3次，每次浸泡4~5d，合并提取液，减压回收乙醇，得乙醇总提取物，再用水溶解成混悬液，再离心取上清液，减压浓缩干燥，即得水部位。二.余龙眼肉水部位药效研究(一 )龙眼肉水部位对AD细胞模型的药效学研究I实验材料1.1受试药物龙眼肉水部位。1.2细胞株 小鼠肾上腺嗜铬瘤细胞株PC12，购自上海细胞生物研究所细胞库。1.3 仪器CO2 培养箱(Thermo Forma)，美国产，型号:381倒置荧光显微镜(Nikon)，日本产，型号:TE2000-U倒置显微镜(Olympus)，日本产，型号:CK40酶标仪(ThermoForma)，美国产，型号:MULTISKANMK3万分之一克电子天平，瑞士产，型号:AG135培养瓶，美国Promega Corporation 产96 孔板，corning,美国产微量加样器，日本产,型号:Nichipet低速台式离心机，上海安亭仪器厂，型号:TDL_5自动高压灭菌器，日本产，型号:HV_50制冰机，日本产，型号:SM_F124超净工作台:荷兰Clean Air Techniek 型号:DLF560自动双重纯水蒸馏器，上海亚荣生化仪器厂，型号:SZ_93精密pH计，上海安平雷磁仪器厂，型号:PHS_3C调速多用振荡器，常州国华电器有限公司，型号:HY-4大功率磁力搅拌器，常州国华电器有限公司，型号:99-1滤器，美国产，型号=Millex-GP低压吸引器，上海医疗器械工业(集团)公司医用吸引器厂，型号:DY-1低温冰箱(Thermo Forma)，美国产，型号:725电热恒温干燥箱，上海跃进医疗器械厂，型号:202-3电热恒温培养箱，上海跃进医疗器械厂，型号:500-BS-ll1.4 试剂MTT(四甲基噻唑蓝)为美国Amresco公司产品，批号:0793FBS (胚胎牛血清)为美国Hyclone公司产品，批号:070205HBS(马血清)为美国GIBCO公司产品，批号:201404Αβ25_35片段为美国GIBCO公司产品，批号:050Μ4765RPMI1640培养基为美国GIBCO公司产品Trypsin(胰蛋白酶)购自上海西宝生物科技有限公司，批号:900207DDMSO (二甲基亚砜)购自天津汇英化学试剂有限公司，批号:T20070605HCl (盐酸)购自洛阳市化学试剂厂，批号:100412Hoechst33258购自凯基生物科技发展有限公司，批号:090104碳酸氢钠购自天津博迪化工股份有限公司，批号:20101203丙酮酸钠购自天津市科密欧化学试剂有限公司，批号:20100110[0051 ] L-谷氨酰胺购自恒因生物 1.5主要试剂及药物的配制1.5.1RPMI1640培养基:称取0.3g L-谷氨酰胺，0.1g丙酮酸钠，2g碳酸氢钠，一包RPMI1640干粉，溶于IL双蒸水中，调PH为7.2~7.4，微孔滤膜过滤分装，4°C保存。1.5.2Trypsin液:溶于双蒸水中，超声溶解，0.22 μ m的微孔滤膜过滤分装，_20°C保存备用。1.5.3MTT液(5mg/mL):精密称取IOOmg MTT,溶于20mL双蒸水中，超声溶解，0.22 μ m的微孔滤膜过滤除菌，4°C避光保存，2w内用完。1.5.4100 μ Μ( μ mol/L) A β 25_35 溶液配制:取 500 μ gA β 25_35 粉末溶于 4.72mL 无菌双蒸水稀释，用有机相0.22 μ m微孔滤膜除菌分装后，置于37°C恒温培养箱中孵育7d以达到“老化”Αβ25_35的目的，-30°C保存。1.5.5Hoechst33258 储存液:称取 Hoechst33258 粉末 lmg, 2OmL 蒸懼水溶解后过滤，4°C避光保存。用时本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种龙眼肉有效部位提取物，可通过以下方法制备：龙眼肉用乙醇浸提得总提物，加水溶解成混悬液，离心，取上清液，减压浓缩干燥，得水部位。
【技术特征摘要】
1.一种龙眼肉有效部位提取物，可通过以下方法制备: 龙眼肉用乙醇浸提得总提物，加水溶解成混悬液，离心，取上清液，减压浓缩干燥，得水部位。2.根据权利要求1所述的龙眼肉有效部位提取物，该提取物的制备方法特征在于该方法包括下列步骤: a.龙眼肉净选，粉碎成粗粉； b.将龙眼肉粗粉依次用95170150%乙醇浸溃提取三次，每次浸泡4~5...
【专利技术属性】
技术研发人员：钟振国，卢汝梅，杜正彩，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：广西;45
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