一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒，包括体积比为6:1的R1和R2，本发明专利技术与常用的检测试剂盒相比，减少了R2的剂量，降低了成本，并可以有效地增强试剂的重复性，从而增强了试剂检测的精确性可信度。同时操作方法简单，可在医疗市场广泛推广。

【技术实现步骤摘要】
—种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒
本专利技术涉及一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒，属体外诊断试剂
。
技术介绍
同型半胱氨酸(Homocysteine, HCY)是引起心血管疾病的独立危险因子。研究表明:Hcy每升高5umol/L脑卒中风险升高59%，缺血性心脏病风险升高32% ；Hcy每降低5umol/L脑卒中风险降低24%，缺血性心脏病风险降低16%。HCY对心血管疾病的早期评价的前瞻性优于胆固醇40倍，但由于人体HCY没有编码基因，食物中也不含HCY，只是蛋氨酸代谢的中间产物，使得HCY作为心血管疾病独立危险因子具有更大优势和意义。血浆中同型半胱氨酸的测定主要采用HPLC方法，是需要特殊设备，对还原型Hcy的荧光衍生物或使用电化学检测器直接测量。由于时间和价格因素，仅在大医院或检验中心应用。酶联免疫法检测同型半胱氨酸的原理是基于小分子捕获技术(SMT)基础上，通过循环酶法使含量极低的小分子代谢物HCY检测得以实现。游离型HCY与共价底物S-腺苷甲硫氨酸SAM催化反应形成蛋氨酸(HCY的转化产物)和S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)。SAH被SAH水解酶水解成腺苷和HCY，形成的HCY可以循环加入反应，从而放大了检测信号，腺苷(Ado)立即水解为次黄嘌呤和氨，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使NADH转化为NAD+，样本中的HCY的浓度与NADH的变化成正比。利用酶法对同型半胱氨酸进行检测的方法操作简单，而且检测同型半胱氨酸对临床心血管疾病诊断有着很好指导意义，因此最近几年得到了很好的推广。但是该检测方法，容易受到血清中丙酮酸等杂质物质的干扰，造成检测的结果不准确，重复性差，在与化学发光检测试剂盒比对时，结果有偏差，不利于临床检测应用。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒。本专利技术的试剂盒主要成分包括:包括体积比为6:1的Rl和R2，各组分的组成和含量如下: Rl: S-腺苷甲硫氨酸(SAM)0.2mMNADH0.4mM乙酸纳0.6 mM α 一酮戊二酸6mM 三(2羧乙 基)膦氯化氢(TCEP )0.6mM 抗坏血酸酶2 KU/L ；R2: Hcy 甲基转移酶(HMTase)6KU/L 谷氨酸脱氢酶(GLDH)12KU/L S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶(SAHase)3KU/L 腺苷脱氨酶(ADA)6 KU/L 牛血清白蛋白0.5g/L 。本专利技术的试剂盒采用酶法检测，与使用昂贵HPLC (高压液相色谱仪)检测相比，该试剂盒适用于全自动生化分析仪，操作简单，成本较低，适合于各大中型医院和大部分小医院。并且在临床上检测心血管病人及有心血管病家族史但无临床症状的亚健康人群的血液中HCY的含量表现出重复性好、准确度高的优点。同时，增大试剂I的用量，在不影响检测结果的前提下减少了费用。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生酶促反应，再将反应物置于可见光分析仪下，检测主波长340nm处吸光度上升的大小程度，从而测算出同型半胱氨酸的浓度。试剂及含量如下: Rl: S-腺苷甲硫氨酸(SAM)0.2mMNADH0.4mM乙酸纳0.6 mMα 一酮戊二酸6mM 三(2羧乙基)膦氯化氢(TCEP )0.6mM 抗坏血酸酶2 KU/L ； R2: Hcy 甲基转移酶(HMTase)6KU/L 谷氨酸脱氢酶(GLDH)12KU/L S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶(SAHase)3KU/L 腺苷脱氨酶(ADA)6 KU/L 牛血清白蛋白0.5g/L 。按照以下的使用量进行检测: 表1本试剂盒检测方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，包括体积比为6:1的R1和R2，各组分的组成和含量如下：R1：                                        S‑腺苷甲硫氨酸                             0.2mMNADH                                                   0.4mM乙酸钠                                                    0.6 mMα－酮戊二酸                                        6mM三（2羧乙基）膦氯化氢                  0.6mM抗坏血酸酶                                           2 KU/L    ； R2：Hcy甲基转移酶                               6KU/L谷氨酸脱氢酶                                     12KU/LS‑腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶     3KU/L腺苷脱氨酶                                        6 KU/L牛血清白蛋白                                              0.5g/L  。...

【技术特征摘要】
1.一种重复性好的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，包括体积比为6:1的Rl和R2，各组分的组成和含量如下: Rl: S-腺苷甲硫氨酸0.2mM NADH0.4mM 乙酸纳0.6 mM α 一酮戊二酸6mM 三(2羧...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭柏清，叶丽华，甘宜梧，李静，
申请(专利权)人：山东博科生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37