改进的疫苗诊断制造技术

本发明专利技术涉及用于区分(a)施用嵌合瘟病毒的动物与(b)被野生型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染或用常规BVDV疫苗免疫接种的动物的改进的方法和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改进的疫苗诊断
本专利技术涉及用于区分(a)施用嵌合瘟病毒的动物与(b)被野生型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染或用常规BVDV疫苗接种的动物的改进的方法和试剂盒。
技术介绍
已经从若干驯养及野生动物种类中分离出包括牛病毒性腹泻病毒(BVD病毒或BVDV)在内的瘟病毒(pestiviruses)。所鉴定的BVDV的宿主包括野牛、羚羊、驯鹿和各种鹿类，同时已经在长颈鹿和叉角羚中鉴定出独特的瘟病毒种属。BVDV是黄病毒科的小RNA病毒。其与作为绵羊的边界病以及猪的经典猪霍乱的病原体密切相关。特别是在牛中由BVDV引发的疾病广泛散布而且经济上能够是破坏性的。牛中的BVDV感染可导致繁殖问题，并且能够引发流产或早产。BVDV能够透过怀孕的牛的胎盘，并可导致分娩出持续感染(PI)的小牛，其对病毒免疫耐受而且余生持续患病毒血症。感染的牛还可表现出“粘膜病”，其特征是温度升高、腹泻、咳嗽和营养粘膜溃疡。这些持续感染的动物在兽群中提供了病毒散布源以及粘膜病的进一步爆发，并且非常易于诱发造成肠道疾病或肺炎的微生物的感染。目前可用的BVDV疫苗是含化学灭活的野生型病毒的那些疫苗，或者含修饰性活(ML)BVDV的那些疫苗。BVDV可通过在牛或猪细胞中反复传代或者通过在病毒上提供温度敏感型表型的化学诱导的突变来减弱。然而，现有的灭活和ML疫苗不允许在已接种动物和自然感染的动物之间进行区分。可能含有野生型病毒中不存在的其他抗原决定子或者缺乏野生型病毒中存在的抗原决定子的“标记”疫苗可以是用于控制该领域中的BVDV感染的有效工具。美国专利申请2010/0360055 (Luo等，通过参考以其整体并入本文)描述了后者，即一种基于嵌合瘟病毒疫苗的疫苗，其中BVDV的Ems蛋白质被来自叉角羚瘟病毒的Ems蛋白质置换。该嵌合瘟病毒以UC25548保藏于AlXXT ,并赋予ATCCi保藏号PTA-9939。借助适当的诊断测定，利用该嵌合瘟病毒将允许区分施用该病毒的动物与感染野生型BVDV或接种常规BVDV疫苗的动物。
技术实现思路
在一个实施方式中，提供了一种用于测定动物是否暴露于BVDV或用常规BVDV疫苗免疫接种的方法，其中所述感染了 BVDV或免疫接种了常规BVDV疫苗的动物具有特异性结合存在于BVDV中但是不存在于嵌合痕病毒中的至少一个Ems表位的抗体,该嵌合痕病毒不再表达来自BVDV的Ems蛋白质，但在BVDV中表达叉角羚瘟病毒的Ems蛋白质。在一个实施方式中，提供了 一种用于测定特异性结合BVDV Erns蛋白质的抗体存在与否的方法，所述方法包括下述步骤:a)从动物获得血清样品；b)用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述片段；c)检测所述样品中所述抗体的存在与否。在另一实施方式中，提供了用于测定动物是否暴露于BVDV或用常规BVDV疫苗免疫接种的诊断试剂盒，所述试剂盒包括能够检测存在于BVDV中但不存在于嵌合瘟病毒中的至少一个Ems表位的抗体的试剂，所述嵌合瘟病毒不再表达来自BVDV的Ems蛋白质，但在BVDV中表达叉角羚瘟病毒的Ems蛋白质。在进一步的实施方式中，提供了抗体的用途，所述抗体结合BVDV或常规BVDV疫苗中存在的表位，但是该表位在嵌合瘟病毒中不存在，所述嵌合瘟病毒不再表达来自BVDV的Erns蛋白质，但在BVDV中表达叉角羚瘟病毒的Ems蛋白质。在另一实施方式中，提供了一种用于测定动物是否具有特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体的方法，所述方法包括下述步骤:a)从动物获得血清样品；b)用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述片段；c)检测所述动物中所述抗体的存在与否。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述样品的步骤在检测所述样品中所述抗体存在与否的步骤之前进行。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述样品的步骤与检测所述样品中所述抗体存在与否的步骤同时进行。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中所述抗体特异性结合在BVDV Erns蛋白质中存在但是在叉角羚瘟病毒Ems蛋白质中不存在的至少一个表位。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中所述抗体的存在说明所述动物已经被BVDV感染或者已经用常规BVDV疫苗免疫接种。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中所述抗体的缺乏说明a)所述动物还未被I)BVDV感染，或者2)未用常规BVDV疫苗免疫接种，或者b)所述动物已经用表达叉角羚瘟病毒Ems蛋白质的嵌合瘟病毒免疫接种。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中血清样品得自易受BVDV感染的动物。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中所述血清样品得自为牛类、羊类、山羊类或猪类的动物。在另一实施方式中，提供了一种用于测定特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，其中血清样品得自为牛的动物。在另一实施方式中，提供一种诊断试剂盒，所述试剂盒用于测定特异性结合BVDVEms蛋白质的抗体存在与否，其中所述试剂盒包括促进对叉角羚瘟病毒Ems蛋白质中不存在的至少一个BVDV Ems表位的抗体的存在与否进行检测的试剂，其中所述试剂之一是叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段。在另一实施方式中，提供一种诊断试剂盒，所述试剂盒用于测定特异性结合BVDVEms蛋白质的抗体存在与否，其中所述试剂盒包括促进对叉角羚瘟病毒Ems蛋白质中不存在的至少一个BVDV Erns表位的抗体的存在与否进行检测的试剂，其中所述试剂之一是特异性结合BVDV或常规BVDV疫苗中存在的表位的抗体，但是该表位在叉角羚瘟病毒Ems蛋白质不存在。在另一实施方式中，提供一种诊断试剂盒，所述试剂盒用于测定特异性结合BVDVErns蛋白质的抗体存在与否，其中所述试剂盒包括用于实施选自下述的测定的试剂:酶联免疫吸附测定法(ELISA)、横向流动测定、免疫印记法、PCR、放射免疫测定、固相放射免疫测定、电化发光测定、免疫印记、免疫沉淀作用和免疫染色。在另一实施方式中，本专利技术提供了一种测定动物是否具有特异性结合BVDV Ems蛋白质的抗体的方法，其中所述抗体特异性结合存在于BVDV Erns蛋白质中的表位，但是该表位在叉角羚瘟病毒Ems蛋白质中不存在。专利技术详述 下述定义可用于本专利技术实施方式描述中所用的术语。下述定义代替通过参考并入本文中的各单独参考文件中所涵盖的任何相反定义。除非本文中另外定义，与本专利技术有关使用的科技术语应具有本领域技术人员通常理解的含义。此外，除非上下文另外要求，单数形式将包括复数且复数形式将包括单数。“约”或“近似”在结合可测量的数值变量使用时，是指所述的该变量的值在所述值的试验误差内(例如，在平均值的95%置信区间内)或者在所述值的任何一个较大值的10%内。如本文所用，术本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定特异性结合牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Erns蛋白质的抗体存在与否的方法，所述方法包括下述步骤：a)从动物获得血清样品；b)用叉角羚瘟病毒Erns蛋白质或其片段温育所述片段；c)检测所述样品中所述抗体存在与否。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.08.24 US 61/526,7921.一种用于测定特异性结合牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Ems蛋白质的抗体存在与否的方法，所述方法包括下述步骤: a)从动物获得血清样品； b)用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述片段； c)检测所述样品中所述抗体存在与否。2.权利要求1所述的方法，其中所述用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述样品的步骤在检测所述样品中所述抗体存在与否的步骤之前进行。3.权利要求1所述的方法，其中所述用叉角羚瘟病毒Ems蛋白质或其片段温育所述样品的步骤与检测所述样品中所述抗体存在与否的步骤同时进行。4.权利要求1所述的方法，其中所述抗体与存在于BVDVEms蛋白质中但是未存在于叉角羚瘟病毒Ems蛋白质中的至少一个表位特异性结合。5.权利要求或I或4所述的方法，其中所述抗体的存在表明所述动物已经被野生型BVDV感染或者已经用常规BVDV疫苗免疫接种。6.权利要求或I或4所述的方法，其中所述抗体不存在表明所述动物还未被I)野生型BVDV感染，或者2)未用常规BVDV疫苗免疫接种，或者所述动物已经用表达叉角羚瘟病毒Ems蛋白质的嵌合瘟病毒免疫接种。7.权利要求或I或4所述的方法，其中所述动物是易受BV...

【专利技术属性】
技术研发人员：RG安肯鲍尔，LD尼尔森，NL奥伊恩，SKW维尔科，
申请(专利权)人：佐蒂斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US