皮肤美白物质筛选系统技术方案

本发明专利技术公开了一种包括含有纤维原细胞、角化细胞及黑素细胞中的一种以上细胞的层的皮肤美白物质筛选系统，其中所述层多于或等于一层，以及利用所述系统的皮肤美白物质筛选方法。另外，本发明专利技术公开了一种含有由皮肤美白物质筛选方法筛选出的物质作为有效成分的皮肤美白用组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】皮肤美白物质筛选系统
本专利技术涉及一种皮肤美白物质筛选系统及皮肤美白物质筛选方法。
技术介绍
迄今为止，在开发新的皮肤美白物质时，使用下述方法，即，将候选物质对黑色素生成细胞即黑素细胞（melanocyte）进行直接处理后，确认是否抑制黑色素生成，或者对黑素细胞照射紫外线，确认候选物质是否屏蔽了此时产生的黑色素生成信号。但是，实际上在皮肤中，黑素细胞并不是单独存在的，而是直接或间接地受到其它的周边细胞或微生境的物理或化学影响而生成黑色素，如果仅有黑素细胞则无法再现上述的实际皮肤组织的状态。另外，雀斑、斑点、黑痣这些皮肤色素沉着症的产生要因或机理与由于紫外线导致黑色素生成增加不同，虽然存在由于紫外线照射而该症状会恶化的趋势，但即使不存在紫外线等产生的刺激，黑色素的生成和分散也会继续增加。由此，在基于现有的紫外线照射方法开发出的皮肤美白物质的情况下，在实际临床上，大多无法展现出抑制人的皮肤色素沉着症的效果。此外，如果为了研究皮肤色素沉着症而对被检测者的色素沉着部位处的皮肤进行活检并使用，则费用和花费的精力非常大，并且很难得到人的皮肤组织，除此之外，与紫外线照射样本不同，得到皮肤色素沉着症的动物样本也是很困难的。因此，存在不仅与人的皮肤组织构造、特别是存在皮肤色素沉着症的人的皮肤组织的构造非常近似、且可以简单地筛选皮肤美白物质的系统及筛选方法的需求。专利文献1：韩国注册专利第10－0840144号（2008年6月16日注册）说明书。
技术实现思路
本专利技术的一个方面在于，提供可以高效且简单地筛选临床上有用的皮肤美白物质的皮肤美白物质筛选系统及利用该系统的皮肤美白物质筛选方法。本专利技术的另一方面在于，提供含有由所述皮肤美白物质筛选方法筛选出来的物质作为有效成分且示出优异的美白效果的皮肤美白用组合物。另外，本专利技术的另一方面在于，提供含有与皮肤的黑色素生成相关的基因自身作为有效成分的皮肤美白用组合物或皮肤外用药剂组合物。本专利技术的一个方案在于，提供包括含有成纤维细胞（fibroblast）、角质形成细胞（keratinocyte）及黑素细胞（melanocyte）中的一种以上细胞的层的皮肤美白物质筛选系统，其中所述层多于或等于一层。本专利技术的另一个方案在于，提供一种皮肤美白物质筛选方法，其在对候选物质进行处理后，还包括确认在成纤维细胞、角质形成细胞及黑素细胞中的一种以上细胞中的WIF1、WNT1、WNT5a及NFATC2中的一种以上的表达的程度或磷酸化程度的步骤。本专利技术的另一个方案在于，提供含有由所述皮肤美白物质筛选方法筛选出来的物质作为有效成分的皮肤美白用组合物，或者含有WIF1自身作为有效成分的皮肤美白用组合物及皮肤外用药剂组合物。专利技术的效果本专利技术所涉及的皮肤美白物质筛选系统由于设计为接近实际的皮肤组织，因此即使在离体（invitro）状态下，也可以以较少的时间和费用而简单地筛选临床上具有美白效果的物质。特别地，与将候选物质对黑素细胞进行处理后通过照射紫外线而筛选美白物质的现有方法不同，本专利技术所涉及的皮肤美白物质筛选系统具有与示出色素沉着症的实际皮肤组织的基因表达程度及信息传递物质的磷酸化程度相类似的条件，因此，在利用本专利技术所涉及的系统的情况下，可以简单地筛选出皮肤美白物质、特别是有效改善色素沉着症的物质。从很难得到用于色素沉着症研究的人及动物样本这一点来说，本专利技术所涉及的系统能够成为用于开发新的皮肤美白物质、具体地说开发色素沉着症改善物质的系统或工具。附图说明图1是对被检测者的正常皮肤（N）和皮肤色素沉着部位（L）之间的WIF1基因的表达程度之差进行比较的图。图2是对被检测者的正常皮肤（N）和皮肤色素沉着部位（L）之间的WNT1及WNT5a的表达程度之差进行比较的图。图3是对黑素细胞（MC）、角质形成细胞（KC）及成纤维细胞（FB）中的WIF1基因的表达程度之差进行比较的图。图4表示在含有抑制WIF1表达的成纤维细胞的美白筛选系统中，酪氨酸酶（tyrosinase）的表达增加的情况。图5表示在含有抑制WIF1表达的成纤维细胞的美白筛选系统中，黑色素体的移动增加的情况。图6表示在含有抑制WIF1表达的成纤维细胞的美白筛选系统中，NFATC2脱磷酸化的情况。图7是表示在含有抑制WIF1表达的角质形成细胞的美白筛选系统中，酪氨酸酶的表达增加的情况的实验结果。图8表示在含有抑制WIF1表达的角质形成细胞的美白筛选系统中，黑色素体的移动增加的情况。图9表示在含有抑制WIF1表达的角质形成细胞的美白筛选系统中，NFATC2脱磷酸化的情况。图10表示对通过基因重组技术制造的人WIF1在黑素细胞中进行处理后，黑素细胞的WIF1表达增加的情况。图11表示在如图10所示诱发了WIF1表达的黑素细胞中，酪氨酸酶的表达减少的情况。图12表示在将通过基因重组技术制造的人WIF1在含有黑素细胞的美白筛选系统中进行处理后，黑色素体的移动减少的情况。图13表示在如图10所示诱发了WIF1表达的黑素细胞中，NFATC2发生磷酸化的情况。具体实施方式在本说明书中，“皮肤”是指覆盖动物体表的组织，不仅是指覆盖面部或身体等体表的组织，是还包括头皮及毛发在内的最广义的概念。皮肤的黑素细胞（melanocyte）是制造决定皮肤颜色的黑色素（melanin）的细胞，位于作为皮肤的真皮和表皮的边界线起作用的基底膜上。从胚胎学角度可知，黑素细胞是如下所述分化而成的，即，从神经嵴细胞（neural-crestcells）起源，经由黑素细胞干细胞（Melanocytestemcell）、作为前体细胞的成黑素细胞（melanoblast）而向皮肤移动，并最终分化为可以生成黑色素的色素细胞即黑素细胞。如上所述分化后的黑素细胞并非在皮肤内单独存在，而是受到与位于其上方的角质形成细胞即角质形成细胞的结合、以及位于下方的真皮中存在的成纤维细胞的影响而生成黑色素。由黑素细胞制造的黑色素，经由细胞树突（dendrite）而向周边的角质形成细胞移动，广泛地分散在皮肤表面，从而保护皮肤不受到紫外线等有害因素影响，呈现皮肤颜色。正常皮肤在发生紫外线这种刺激时，与正常情况相比生成更多的黑色素，并增加黑色素的分散，然后，如果该刺激消失，则黑色素的生成和分散再次恢复较低水平。如上述所示，通过现有方法开发出的美白物质，其中特别是基于紫外线照射方法开发出的皮肤美白物质，由于并没有反应出实际皮肤条件，即黑素细胞在皮肤内受其它细胞们或周围的微生境的物理化学因素的综合影响而生成黑色素这一实际皮肤条件，所以在改善皮肤的色素沉着症这一方面，大多展示出在临床上较差的效果。由于皮肤色素沉着症具有多种产生原因并由于特殊的机理而使皮肤黑化的，所以，为了开发可以有效改善皮肤色素沉着症的美白物质，需要制作与实际皮肤类似的实验模型，并利用该模型开发美白物质。下面，详细说明本专利技术。本专利技术的一个方案在于，提供包括含有成纤维细胞（fibroblast）、角质形成细胞（keratinocyte）及黑素细胞（melanocyte）中的一种以上细胞的层的皮肤美白物质筛选系统，所述层多于或等于一层。本专利技术的另一个方案在于，提供一种包括含有成纤维细胞的成纤维细胞层、含有角质形成细胞的角质形成细胞层、及含有黑素细胞的黑素细胞层的皮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种皮肤美白物质筛选系统，其特征在于，包括含有成纤维细胞、角质形成细胞及黑素细胞中的一种以上细胞的层，所述层多于或等于一层。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.10.18 KR 10-2011-0106614;2012.10.16 KR 10-2011.一种皮肤美白物质筛选系统，其特征在于，包括：含有成纤维细胞的成纤维细胞层；和含有角质形成细胞及黑素细胞的层，其中，所述成纤维细胞、角质形成细胞及黑素细胞中的一种以上的细胞是WNT1或WNT5a的表达增加的细胞、和/或NFATC2（nuclearfactorofactivatedTcells,cytoplasmic2）脱磷酸化的细胞，且其中，所述成纤维细胞、角质形成细胞及黑素细胞中的一种以上的细胞是WIF1（Wntinhibitoryfactor1）的表达被抑制的细胞。2.根据权利要求1所述的皮肤美白物质筛选系统，其特征在于，所述成纤维细胞层是在胶原蛋白中含有成纤维细胞的层。3.根据权利要求2所述的皮肤美白物质筛选系统，其特征在于，所述胶原蛋白占所述皮肤美白物质筛选系统的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李爱荣，李泰龙，崔贤贞，
申请(专利权)人：株式会社爱茉莉太平洋，东国大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR