【技术实现步骤摘要】
一种结合TROP2的抗体及靶向TROP2和CD3的双特异性抗体及其制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及基因工程抗体
,具体涉及一种结合TROP2的抗体、靶向TROP2和CD3的双特异性抗体及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]抗体药物是以细胞工程技术和基因工程技术为主体的抗体工程技术制备的生物大分子药物,具有特异性高、性质均一、可针对特定靶点定向制备等优点。单克隆抗体在临床上主要应用于以下三个方面:肿瘤治疗、免疫性疾病治疗以及抗感染治疗。其中,肿瘤治疗是目前单克隆抗体应用最为广泛的领域,目前已经进入临床试验和上市的单克隆抗体产品中,用于肿瘤治疗的产品数量占比大概为50%。单克隆抗体治疗肿瘤是一种针对病变细胞特异靶点刺激免疫系统杀伤靶细胞的免疫疗法,为了增强抗体的效应功能,特别是提高杀伤肿瘤细胞的效果,人们尝试多种方法改造抗体分子。
[0003]获取特异性抗体的方法有多种。传统的杂交瘤技术通过免疫小鼠或大鼠,将其脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,然后进行稀释(至一个细胞每孔)培养,用酶联免疫法(ELISA)检测杂交瘤细胞上清与免疫抗原的结合,进而筛选可分泌与抗原特异性结合抗体的单克隆细胞株。这种鼠源抗体如果应用于临床药物研发,则需要通过杂合抗体技术(chimerization)、人源化技术(humanization)等基因工程手段进行去免疫原性改造。为了从起始阶段就消除未来临床必须解决的免疫原性问题,转基因鼠技术(transgenic mouse)通过替换鼠源抗体可变区为人源抗体可变区,使得获得的单克 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种TROP2抗体,其特征在于,包括重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区的CDR1、CDR2、CDR3分别具有SEQ ID NO.1
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3所示的氨基酸序列,或者,其分别具有以SEQ ID NO.1
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3所示的氨基酸序列为参考序列、含有如下突变中的一种或多种突变的组合的氨基酸序列:(1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第1位S突变为N;(2)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的第4位P突变为R、K或G;(3)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第1位P突变为H、A;(4)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第2位N突变为E;所述轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3分别具有SEQ ID NO.4
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6所示的氨基酸序列,或者,其分别具有以SEQ ID NO.4
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6所示的氨基酸序列为参考序列,含有如下突变中的一种或多种突变的组合的氨基酸序列:(1)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的第5位G突变为N或E;(2)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的第7位S突变为R或K;(3)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第1位A突变为R;(4)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第3位S突变为G、H或R;(5)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第4位S突变为K。2.一种TROP2抗体,其特征在于,包括重链可变区和轻链可变区,所述重链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.1、7任一所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.2、8、9任一所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3、10任一所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.4、11、12任一所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.5、13、14任一所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.6、15任一所示的氨基酸序列;优选地,所述重链可变区的CDR为如下任一种:(1)CDR1具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;(2)CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;(3)CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;(4)CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR为如下任一种:(1)CDR1具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列;(2)CDR1具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;(3)CDR1具有SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;(4)CDR1具有SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;
(5)CDR1具有SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;(6)CDR1具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;更优选地,所述重链可变区的CDR和轻链可变区的CDR为如下任一种:(1)重链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列;(2)重链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;(3)重链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列;(4)重链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1具有SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列,CDR2具有SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列,CDR3具有SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的TROP2抗体,其特征在于,所述重链可变区具有SEQ ID NO.16、18
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20任一所示的...
【专利技术属性】
技术研发人员:袁清安,白丽莉,孟庆武,李艺佳,赵立坤,李延虎,
申请(专利权)人:益科思特北京医药科技发展有限公司,
类型:发明
国别省市:
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