The invention belongs to the pharmaceutical field, in particular to a preparation method of chondroitin sulfate with high bioavailability. The preparation method comprises the following steps: pretreatment, alkalization, enzymatic hydrolysis I, flocculation settling: adding flocculant to the enzymatic hydrolysis filter solution, stirring for 5 to 20 minutes, then layering for 2 to 5 hours, centrifuging and collecting the supernatant; enzymatic hydrolysis II: adding modified silica to the supernatant after flocculation settling, stirring for 20 to 50 minutes, adjusting the pH to 5 to 6, controlling the temperature to 30 to 50 degrees C, and then adding the supernatant. The hyaluronidase was added to the hyaluronidase. The oscillating reaction was 10 20h. After the reaction was finished, the cells were heated to 90 and 100 degrees centigrade for 20 50min. Centrifugation was used to obtain the upper layer of the liquid.
【技术实现步骤摘要】
一种高生物利用度的硫酸软骨素制备方法
本专利技术属于制药领域,具体涉及一种高生物利用度的硫酸软骨素制备方法。
技术介绍
硫酸软骨素(Chondroitinsulfate)大量存在于动物软骨中,商品是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖。硫酸软骨素是糖胺聚糖的一种,主要含有硫酸软骨素A、硫酸软骨素C等黏性多糖成分,是由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖,并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。主要分为硫酸软骨素钠盐和硫酸软骨素钙盐等,常与葡萄糖胺配合使用,具有止痛,促进软骨再生的功效,用于治疗神经痛,偏头痛,关节痛,心脑血管疾病,同时也可以作为关节炎、滴眼液以及高血脂的辅助治疗用品。不仅如此,硫酸软骨素还可以作为食品、保健品的添加剂。在医药、化妆品、食品工业上具有广泛的用途,市场前景广阔。现有技术提取获得的硫酸软骨素分子量一般在20000~50000道尔顿之间,此分子量的软骨素产品存在口服吸收差、生物利用度低、疗效不稳定等缺点。而中低分子量的硫酸软骨素产品的体内吸收均明显优于普通分子量的产品,分子量越小则吸收率越高。美国专利USP3405120已证明,分子量在2000-6000道尔顿时,硫酸软骨素的药理活性最强,对防治动脉粥样硬化、风湿性炎症和伤口愈合等具有更好的疗效。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术提纯获取的硫酸软骨素分子量较大的缺陷,提供一种低分子量硫酸软骨素的制备方法,所得到的硫酸软骨素收率大、纯度高、平均分子量可控制在2000至6000道尔顿之间,适合工业化大生产。本专利技术的上述 ...
【技术保护点】
1.一种高生物利用度的硫酸软骨素制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:(1)预处理:将软骨与水混合后,加热至60‑90℃煮泡2‑5小时,沥去水;(2)碱化:向步骤(1)得到的软骨中加入NaOH水溶液,于20‑40℃碱化2‑5小时;(3)酶解Ⅰ:先将碱化后的溶液调pH至8.0‑9.0,再加入胰酶,于20‑40℃下酶解7‑10小时;酶解完成后升温至70‑90℃静置1‑3小时,再调pH至3‑5,冷却,离心,得酶解过滤液;(4)絮凝沉降:向酶解过滤液中加入絮凝剂,搅拌5‑20min后静置2‑5h使其分层,然后离心收集上清液;(5)酶解Ⅱ:向絮凝沉降后的上清液中加入改性二氧化硅,搅拌20‑50min后,调pH为5‑6,控制温度为30‑50℃,然后加入透明质酸酶,振荡反应10‑20h;反应结束后,加热至90‑100℃静置20‑50min,离心,取上层液体;(6)膜过滤:通过不同分子量的超滤膜过滤截留相应分子量的产品;(7)喷雾干燥:将膜过滤液经过陶瓷复合膜进行灭菌,然后在进风温度为190‑195℃,出口温度为90‑95℃下进行喷雾干燥,得到硫酸软骨素。
【技术特征摘要】
1.一种高生物利用度的硫酸软骨素制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:(1)预处理:将软骨与水混合后,加热至60-90℃煮泡2-5小时,沥去水;(2)碱化:向步骤(1)得到的软骨中加入NaOH水溶液,于20-40℃碱化2-5小时;(3)酶解Ⅰ:先将碱化后的溶液调pH至8.0-9.0,再加入胰酶,于20-40℃下酶解7-10小时;酶解完成后升温至70-90℃静置1-3小时,再调pH至3-5,冷却,离心,得酶解过滤液;(4)絮凝沉降:向酶解过滤液中加入絮凝剂,搅拌5-20min后静置2-5h使其分层,然后离心收集上清液;(5)酶解Ⅱ:向絮凝沉降后的上清液中加入改性二氧化硅,搅拌20-50min后,调pH为5-6,控制温度为30-50℃,然后加入透明质酸酶,振荡反应10-20h;反应结束后,加热至90-100℃静置20-50min,离心,取上层液体;(6)膜过滤:通过不同分子量的超滤膜过滤截留相应分子量的产品;(7)喷雾干燥:将膜过滤液经过陶瓷复合膜进行灭菌,然后在进风温度为190-195℃,出口温度为90-95℃下进行喷雾干燥,得到硫酸软骨素。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的NaOH水溶液质...
【专利技术属性】
技术研发人员:卢国定,
申请(专利权)人:宁波绿之健药业有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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