水样中马波沙星的含量检测方法技术

本方案公开了水样中化学残留物的检测技术领域的水样中马波沙星的含量检测方法。本发明专利技术采用非离子表面活性剂Triton X‑114和阴离子表面活性剂SDS为混合表面活性剂对水样中残留的马波沙星进行浊点萃取，避免了传统液液萃取中有机溶剂的大量使用，方法安全、绿色、环保。另外，此检测方法准确性高，线性关系、重复性、稳定性、日间精密度良好，回收率能达到检测分析的要求。能够实现对水样中残留马波沙星的快速、准确、高重现性、高回收率的测定，并且仪器价格相对低廉，操作简便快捷，对操作人员的技术素质要求较低，方法容易进行推广。适用于实际环境水样马波沙星残留的分析检测。

Determination of Mapofloxacin in Water Samples

The scheme discloses a method for determining the content of mapofloxacin in water samples in the technical field of detecting chemical residues in water samples. The present invention adopts non-ionic surfactant Triton X_114 and anionic surfactant SDS as mixed surfactants to extract residual mapofloxacin in water samples by cloud point extraction, avoiding the large use of organic solvents in traditional liquid-liquid extraction, and the method is safe, green and environmentally friendly. In addition, the detection method has high accuracy, good linear relationship, repeatability, stability and daytime precision, and the recovery rate can meet the requirements of detection and analysis. It can realize the rapid, accurate, high reproducibility and high recovery determination of residual mapofloxacin in water samples, and the instrument is relatively cheap, easy to operate, low technical quality requirements for operators, and easy to popularize. It is suitable for the analysis and detection of mapofloxacin residues in real environmental water samples.

【技术实现步骤摘要】
水样中马波沙星的含量检测方法
本专利技术涉及水样中化学残留物的检测
，具体涉及水样中马波沙星的含量检测方法。
技术介绍
马波沙星化学名为9-氟-2,3-二氢-3-甲基-10-(4-甲基-1-哌嗪基)-7-氧代-7H-吡啶-[3,2,1-ij](4,1,2)苯并恶二嗪-6-羧酸，分子式为C17H19FN4O4，是一种动物专用的新型氟喹诺酮类抗菌药，通过抑制细菌的DNA转录酶从而抑制细菌的生长，对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和支原体均有抗菌作用。马波沙星于1995年在英国上市，具有抗菌谱广、杀菌活性强、交叉反应少、组织渗透力强，消除半衰期长等优点，在兽医临床上应用较为广泛，常用于治疗敏感菌所引起的犬、猫、猪、牛的呼吸道、消化道、泌尿道及皮肤等感染，同时在治疗猪、牛、羊乳腺炎等方面也有较好的效果。马波沙星作为动物专用药，被广泛应用于养殖畜牧业。但动物对其吸收有限，大部分以药物原形式或其代谢物随粪尿排出，进入环境水域。由于其具有很强的耐微生物降解能力，在环境中直接作用于各种生物，诱发大量耐药菌，这些耐药微生物可能通过呼吸、食品、饮水、排泄、农业灌溉等途径在环境中传播，最终影响人类健康。因此，有必要建立对水样中马波沙星残留量进行检测的方法，以便于对水体进行净化处理，以免污染环境。然而，目前常用于检测氟喹诺酮类药物方法为高效液相色谱法、超高效液相色谱—串联质谱法、毛细管电泳法、酶联免疫法等。但具体针对马波沙星在水样中残留的检测技术研究较少，而且现有的这些技术实施成本高、操作复杂，不易于长期使用。
技术实现思路
本专利技术意在提供一种水样中马波沙星的含量检测方法，以解决现有检测技术实施成本高、操作复杂的技术问题。本方案中的水样中马波沙星的含量检测方法，包括以下步骤：步骤1)、马波沙星储备液的配制：精密称取5.0mg马波沙星标准品，用二次蒸馏水溶解并定容至50mL的容量瓶中，配制成100.0μg/mL的储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用；使用时用二次蒸馏水稀释至1.0μg/mL；步骤2)、聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：精密称取5.00g的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.05g/mL的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤3)、十二烷基硫酸钠溶液的制备：精密称取4.00g的十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.02g/mL的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤4)、氯化钠溶液的制备：精密称取60.00g的氯化钠固体于烧杯中，用适量二次蒸馏水完全溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.3g/mL的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤5)、样品溶液的制备：采集水样，并将采集后的水样经0.45μm滤膜过滤后，放置于棕色玻璃瓶中，3～5℃的冰箱保存备用；步骤6)、马波沙星的测定：准备两支离心管，分别移取2.0mL的马波沙星溶液和样品溶液于离心管中，依次加入上述步骤制备的十二烷基硫酸钠溶液0.5～5.0mL，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液0.1～1.0mL，氯化钠溶液1.0～4.0mL，混匀；再加入1mol/L的盐酸溶液，调节体系的pH＝1～14，用二次蒸馏水定容至10mL，再次摇匀；于室温下静置5.0～30.0min后进行离心；离心后取富集相采用荧光分光光度计进行测定，检测的激发波长为297.96nm、发射波长为505.97nm。本专利技术具备以下有益效果：本方案采用聚氧乙烯单叔辛基苯基醚(TritonX-114)和十二烷基硫酸钠(SDS)为混合胶束对水样中残留的马波沙星进行富集，避免了传统液液萃取中有机溶剂的大量使用，同时SDS胶束可以使马波沙星分子处于更加有序的微环境中，减小了其由于碰撞引起的能量损失和其他淬灭作用，使荧光强度增强，从而提高检测的灵敏度。通过向体系中加入非离子表面活性剂TritonX-114进行增溶和协同增敏，便生成了阴—非离子型混合胶束。由于阴离子表面活性剂SDS可使非离子表面活性剂TritonX-114在水溶液中的溶解度增大，从而使TritonX-114的浊点升高。此时向体系中添加盐析型电解质氯化钠可促进两相分离，使表面活性剂的浊点降低，在室温下即可实现浊点萃取。本专利技术操作简便、绿色环保、成本较低。另外，使用荧光分光光度法进行检测，仪器的检测限较低，灵敏度较高，适用于痕量物质的分析检测，能够实现对水样中残留加替沙星的快速、准确、高重现性、高回收率的测定，并且仪器价格相对低廉，操作简便快捷，对操作人员的技术素质要求较低，方法容易进行推广。适用于实际环境水样马波沙星残留的分析检测。进一步，步骤6)中离心转速为4000rpm，离心时间为5min。此条件下可以加快水相与富集相的分离，提高效率。进一步，步骤6)中离心后冰浴冷却5min再进行检测。进行该操作增加富集相粘性，更加便于水相与富集相更好的分离。进一步，步骤1)～步骤5)中，冰箱温度均为4℃。在冰箱温度为3～5℃的温度条件下，优选4℃存放溶液的稳定性更好。进一步，步骤6)中，十二烷基硫酸钠溶液的加入量为2mL，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液的加入量为0.3mL，氯化钠溶液的加入量为2mL。该条件下，固液两相的分离相关最佳，更佳有利于检测，提高检测的准确性。进一步，步骤6)中，采用无水乙醇稀释富集相并定容至3mL后再进行检测。在检测时采用富集相进行检测，富集相粘性太强会影响到检测结果，为了确保结果更准确，采用无水乙醇稀释富集相并定容至3mL可以有效的对富集相进行稀释。附图说明图1为不同表面活性剂对浊点萃取的影响；图2为本专利技术的马波沙星浊点萃取前后的激发光谱图；图3为本专利技术的马波沙星浊点萃取前后的发射光谱图；图4为pH在1～14范围内对浊点萃取的影响；图5为pH在1～4范围内对浊点萃取的影响；图6为SDS浓度对浊点萃取的影响；图7为TritonX-114浓度对浊点萃取的影响；图8为氯化钠浓度对浊点萃取的影响；图9为平衡温度对浊点萃取的影响；图10为平衡时间对浊点萃取的影响；图11为本专利技术马波沙星浊点萃取后的标准曲线。具体实施方式下面通过具体实施方式进一步详细的说明：附图说明：图中曲线a为浊点萃取前、曲线b为浊点萃取后。实施例1：水样中马波沙星的含量检测方法，包括以下步骤：步骤1)、马波沙星储备液的配制：精密称取5.0mg马波沙星标准品，马波沙星标准品是一般在98～100％含量的单品，在专门的化学试剂制造机构可直接购买，用二次蒸馏水溶解并定容至50mL的容量瓶中，配制成100.0μg/mL的储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用；使用时用二次蒸馏水稀释至1.0μg/mL；步骤2)、聚氧乙烯单叔辛基苯基醚(TritonX-114)溶液配制：精密称取5.00g的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.05g/mL的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤3)、十二烷基硫酸钠(SDS)溶液的制备：精密称取4.00g的十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.02g/mL的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤4)、氯化钠溶液的制备：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.水样中马波沙星的含量检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1)、马波沙星储备液的配制：精密称取5.0mg马波沙星标准品，用二次蒸馏水溶解并定容至50mL的容量瓶中，配制成100.0μg/mL的储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用；使用时用二次蒸馏水稀释至1.0μg/mL；步骤2)、聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：精密称取5.00g的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.05g/mL的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤3)、十二烷基硫酸钠溶液的制备：精密称取4.00g的十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.02g/mL的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤4)、氯化钠溶液的制备：精密称取60.00g的氯化钠固体于烧杯中，用适量二次蒸馏水完全溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.3g/mL的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤5)、样品溶液的制备：采集水样，并将采集后的水样经0.45μm滤膜过滤后，放置于棕色玻璃瓶中，3～5℃的冰箱保存备用；步骤6)、马波沙星的测定：准备两支的离心管，分别移取2.0mL马波沙星溶液和样品溶液于离心管中，依次加入上述步骤制备的十二烷基硫酸钠溶液0.5～5.0mL，聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液0.1～1.0mL，氯化钠溶液1.0～4.0mL，混匀；再加入1mol/L的盐酸溶液，调节体系的pH＝1～14，用二次蒸馏水定容至10mL，再次摇匀；于室温下静置5.0～30.0min后进行离心；离心后取富集相采用荧光分光光度计进行测定，检测的激发波长为297.96nm、发射波长为505.97nm。...

【技术特征摘要】
1.水样中马波沙星的含量检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1)、马波沙星储备液的配制：精密称取5.0mg马波沙星标准品，用二次蒸馏水溶解并定容至50mL的容量瓶中，配制成100.0μg/mL的储备液，在3～5℃的冰箱内保存备用；使用时用二次蒸馏水稀释至1.0μg/mL；步骤2)、聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液配制：精密称取5.00g的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚用二次蒸馏水溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.05g/mL的聚氧乙烯单叔辛基苯基醚溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤3)、十二烷基硫酸钠溶液的制备：精密称取4.00g的十二烷基硫酸钠用二次蒸馏水溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.02g/mL的十二烷基硫酸钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤4)、氯化钠溶液的制备：精密称取60.00g的氯化钠固体于烧杯中，用适量二次蒸馏水完全溶解，定容至200mL容量瓶中，摇匀制得浓度为0.3g/mL的氯化钠溶液，在3～5℃的冰箱保存备用；步骤5)、样品溶液的制备：采集水样，并将采集后的水样经0.45μm滤膜过滤后，放置于棕色玻璃瓶中，3～5℃的冰箱保存备用；步骤6)、马波沙星的测定：准备两支的离心管，分别移取2.0mL马波沙星溶液和...

【专利技术属性】
技术研发人员：余兰，姜坤妤，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52