一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测及鉴别方法技术

本发明专利技术提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片质量检测及鉴别方法。本发明专利技术的桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，建立了桑白皮与蜜桑白皮饮片HPLC指纹图谱，明确了桑白皮与蜜桑白皮饮片的化学成分差异，阐明了炮制对桑白皮化学成分的影响，且本法相较于已有报道的薄层层析法，稳定性更好，准确度更高。为桑白皮与蜜桑白皮饮片鉴别提供了新方法。

A Method for Quality Detection and Identification of Cortex Mori and Cortex Mori Decoctions

The invention provides a method for quality detection and identification of mulberry white peel and honey mulberry white peel pieces. The method for quality detection of mulberry bark and honey mulberry bark decoction pieces of the invention has established the HPLC fingerprint of mulberry bark and honey mulberry bark Decoction pieces, clarified the difference of chemical composition between mulberry bark and honey mulberry white bark Decoction pieces, clarified the influence of processing on chemical composition of mulberry white bark, and the method has better stability and higher accuracy than the thin layer chromatography method reported previously. It provides a new method for the identification of Cortex Mori and Cortex Mori.

【技术实现步骤摘要】
一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测及鉴别方法
本专利技术具体涉及一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测及鉴别方法。
技术介绍
桑白皮为桑科植物桑(MorusalbaL.))的干燥根皮，秋末叶落时至次春发芽前采挖根部，刮去黄棕色粗皮，纵向剖开，剥取根皮，晒干即得。其为临床常用中药，主要功效为泻肺喘、利水消肿，临床常用于治疗肺热喘咳、水肿、尿少以及面部肌肤浮肿等症。桑白皮中主要含有二苯乙烯类成分和黄酮类成分。古代本草如《名医别录》等记载其治消渴，单用即有效。相关报道其有利尿、降压、降糖、镇痛、镇静、镇咳、祛痰、平喘、抗炎、抗菌、及抗癌等作用。蜜桑白皮为桑白皮的炮制加工品，寒泻之性缓和，偏于润肺止咳，多用于肺虚喘咳，并常与补气药或养阴药合用。由于桑白皮药材与蜜桑白皮的外观性状相似，并且与同属植物单纯从外形特征上很难区分。目前市场上有用同属植物的根皮作桑白皮入药，也易将桑白皮与蜜桑白皮混淆。中药指纹图谱是一种多指标的质量控制模式，虽然它不能代替含量测定，但它比测定任何单一成分所提供的信息却丰富得多，可以比较全面地反映所含化学成分的种类和数量，能够更加有效地体现出中药成分的整体性和综合作用。HPLC法具有高效、快速、灵敏、重现性好、应用范围广等特点，在中药的质量控制及中药有效成分研究等方面都是重要的分析手段。目前对桑白皮与蜜桑白皮饮片的鉴定，局限于外观和薄层层析法。如任婧昱，姜文红，曹飞，张清波.桑白皮与蜜桑白皮及其相近品种的鉴别研究[J].方药研究，2015.2.61‐62.，采用显微鉴别、薄层色谱法对桑白皮与蜜桑白皮及其相近品种进行鉴别区分。但是未能明确桑白皮与蜜桑白皮饮片的主要化学成分，不能说明炮制对桑白皮化学成分的影响。且还需结合显微观察才能做出判断。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛对照品，加4050％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入60～70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.05～0.15％磷酸水溶液(v/v)为流动相B梯度洗脱；波长为280nm；梯度洗脱程序如下：进一步地，步骤1)所述桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛的浓度为每1ml分别含80μg、30μgl、30μg、30μg、30μg、30μg的溶液。进一步地，步骤2)所述桑白皮或蜜桑白皮饮片待测样品与60％甲醇的质量体积比为1g:200mL。进一步地，步骤2)所述提取为超声提取，提取功率为600W，提取频率为25kHz，提取时间20min。进一步地，步骤3)所述的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；所述流动相B为0.1％磷酸水溶液(v/v)；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样量为10μl。本专利技术还提供了一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的鉴别方法，其特征在于：它包括如下步骤：(1)取待检桑白皮或蜜桑白皮饮片粉末制备供试品溶液；(2)按前所述的高效液相色谱法检测；(3)分析检测结果。进一步地，所述的高效液相色谱法检测的桑白皮饮片指纹图谱中应呈现8个特征峰，其中与紫云英苷参照物相应的峰为S峰，与桑皮苷A参照物相应的峰为峰1。计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内，相对保留时间分别为：0.759(峰2)、0.795(峰3)、1.000(峰4,S)、1.618(峰5)、1.802(峰6)、1.986(峰7)、2.218(峰8)。更进一步地，所述的峰4,S为紫云英苷；峰5为桑根酮C；峰6为桑黄酮G；峰8为桑辛素。进一步地，所述的高效液相色谱法检测的蜜桑白皮饮片指纹图谱中应呈现10个特征峰，其中与紫云英苷参照物相应的峰为S峰，与桑皮苷A参照物相应的峰为峰3。计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内，相对保留时间分别为：0.165(峰1)、0.215(峰2)、0.752(峰4)、0.792(峰5)、1.000(峰6,S)、1.619(峰7)、1.808(峰8)、1.988(峰9)、2.248(峰10)。更进一步地，所述的峰2为5‐羟甲基糠醛；峰6,S为紫云英苷；峰7为桑根酮C；峰8为桑黄酮G；峰10为桑辛素。本专利技术的一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，明确了桑白皮与蜜桑白皮饮片的化学成分差异，阐明了炮制对桑白皮化学成分的影响，且方法简单，稳定性好，精密度高，为桑白皮与蜜桑白皮饮片鉴别提供了新方法。防止临床上将桑白皮与蜜桑白皮饮片混用，保证了用药安全。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1桑白皮饮片特征图谱，峰1：桑皮苷A；峰4,S：紫云英苷；峰5：桑根酮C；峰6：桑黄酮G；峰8：桑辛素；S1‐S27依次为：SBP180101、SBP180102、SBP180103、SBP180104、SBP180105、SBP180106、SBP180110、SBP180111、SBP180112、SBP180113、SBP180117、SBP180118、SBP180120、SBP180121、SBP180122、SBP180123、SBP180124、SBP180125、SBP180126、SBP180127、SBP180128、SBP180129、SBP180130、SBP180132、SBP180133、SBP180134、SBP180139。图2蜜桑白皮饮片特征图谱，峰2:5‐羟甲基糠醛；峰3：桑皮苷A；峰6,S：紫云英苷；峰7：桑根酮C；峰8：桑黄酮G；峰10：桑辛素；S1‐S27依次为：MSBP180101、MSBP180102、MSBP180103、MSBP180104、MSBP180105、MSBP180106、MSBP180110、MSBP180111、MSBP180112、MSBP180113、MSBP180117、MSBP180118、MSBP180120、MSBP180121、MSBP180122、MSBP180123、MSBP180124、MSBP180125、MSBP180126、MSBP180127、MSBP180128、MSBP180129、MSBP180130、MSBP180132、MSBP180133、MSBP180134、MSBP180139。图3桑白皮饮片特征对照图谱，峰1：桑皮苷A；峰4,S：紫云英苷；峰5：桑根酮C；峰6：桑黄酮G；峰8：桑辛素。图4蜜桑白皮饮片特征对照特征图谱，峰2：5‐羟甲基糠醛；峰3：桑皮苷A；峰6,S：紫云英本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛对照品，加40～50％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入60～70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.05～0.15％磷酸水溶液为流动相B梯度洗脱；波长为280nm；梯度洗脱程序如下：

【技术特征摘要】
1.一种桑白皮与蜜桑白皮饮片的质量检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：1)参照物溶液的制备：取桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛对照品，加40～50％甲醇制成参照物溶液；2)供试品溶液的制备：取待检样品粉末，加入60～70％甲醇提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；3)分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.05～0.15％磷酸水溶液为流动相B梯度洗脱；波长为280nm；梯度洗脱程序如下：2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述桑皮苷A、桑辛素、桑黄酮G、桑根酮C、紫云英苷、5‐羟甲基糠醛的浓度为每1ml分别含80μg、30μgl、30μg、30μg、30μg、30μg；所述甲醇浓度为50％。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述桑白皮或蜜桑白皮饮片待测样品与60％甲醇的质量体积比为1g:200mL；所述甲醇浓度为60％。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2)所述提取为超声提取，提取功率为600W，提取频率为25kHz，提取时间20min。5.根据权利要求1所述的鉴别检测方法，其特征在于：步骤3)所述的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；所述流动相B为0.1％磷酸水溶液；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样量为10μl。6.一种桑白皮与...

【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，费文波，张玉婷，周维，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51