一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，其制备包括以下步骤：取杜仲粉碎后用95%的乙醇加热回流提取，减压回收浸膏；将总浸膏用2倍水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷萃取，减压回收溶剂，得到各部分的浸膏；将上面所得二氯甲烷部位的经100‑200目硅胶干法装柱进行划段，分为十个组分，并将第2个组分利用Sephadex LH‑20洗脱，最后利用300‑400目硅胶由纯氯仿，氯仿与丙酮洗脱得到化合物1和化合物3的纯品，以及化合物2的粗提物，将化合物2经HPLC分离，得到化合物2的纯品；化合物1为桦木酸，化合物2为羽扇豆醇，化合物3为桦木酸类似物。所述的化合物1‑3具有抗肿瘤活性，用于抗肿瘤药物的制备。

【技术实现步骤摘要】
一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物及其用途
本专利技术属于天然产物及医药
，具体涉及一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物及其用途。
技术介绍
杜仲又名思仙，为杜仲科植物杜仲EucommiaulmoidesOliver的干燥树皮，一属一种，是中国名贵滋补药材。其味甘，性温。有补益肝肾、强筋壮骨、调理冲任、固经安胎的功效。可治疗肾阳虚引起的腰腿痛或酸软无力，肝气虚引起的胞胎不固，阴囊湿痒等症。在《神农本草经》中被列为上品。现代研究杜仲具有清除体内垃圾，加强人体细胞物质代谢，防止肌肉骨骼老化，平衡人体血压，分解体内胆固醇，降低体内脂肪，恢复血管弹性，利尿清热，广谱抗菌，兴奋中枢神经，提高白血球药理作用。桦木酸是一种羽扇豆烷型的五环三萜,分布于桦木属及其他许多属植物中,是植物的次生代谢产物。在研究中发现,桦木酸本身毒性较低,对正常细胞中的外周血淋巴细胞和皮肤成纤维细胞没有毒性，其对肿瘤细胞的抑制作用是通过诱导细胞的程序性死亡完成的[1]。天然产物是最大最好的药物来源库并具有独特的生物活性机制，还有立体构型的优势。近年来，随着对肿瘤生物学、药理学研究的深入，天然抗肿瘤药物逐渐引起了化学家、药理学家的关注。研究发现，天然药物在抑制、杀伤肿瘤细胞、诱导细胞凋亡、影响相关蛋白和酶的作用、调节机体免疫、增强抗氧化作用等方面发挥重要的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物及其用途，即一种获取新天然小分子化合物的分离纯化方法，并进行后续活性研究(抗肿瘤活性)。本专利技术目的是通过下述方案得以实现：一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，其制备包括以下步骤：取杜仲粉碎后用95％的乙醇加热回流提取，减压回收浸膏；将总浸膏用2倍水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷萃取，减压回收溶剂，得到各部分的浸膏；将上面所得二氯甲烷部位的经100-200目硅胶干法装柱进行划段，分为十个组分，并将第2个组分利用SephadexLH-20洗脱，最后利用300-400目硅胶首先由纯氯仿洗脱，然后依次用氯仿和丙酮的混合溶液洗脱，氯仿与丙酮的洗脱比例为50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、3:1；氯仿与丙酮洗脱比例为3：1时洗脱得到化合物1和化合物3的纯品，以及化合物2的粗提物，将化合物2经HPLC分离，得到化合物2的纯品。化合物1为桦木酸，结构式：化合物2为羽扇豆醇，结构式：化合物3为桦木酸类似物，结构式：上述的一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，所述的化合物3的分离纯化方法也可以用HPLC进行分离，或者直接化学合成化合物3。上述的一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物的用途，所述化合物1-3具有抗肿瘤活性，用于抗肿瘤药物的制备。附图说明图1是化合物1的结构式。图2是化合物2的结构式。图3是化合物3的结构式。图4是化合物3的H谱。图5是化合物3的C谱。具体实施方式以下结合较佳实施例，对依据本专利技术提出的一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物及其用途具体实施方式、特征及其功效，详细说明如后。一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，其制备包括以下步骤：取杜仲粉碎后用95％的乙醇加热回流提取，减压回收浸膏；将总浸膏用2倍水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷萃取，减压回收溶剂，得到各部分的浸膏；将上面所得二氯甲烷部位的经100-200目硅胶干法装柱进行划段，分为十个组分，并将第2个组分利用SephadexLH-20洗脱，最后利用300-400目硅胶首先由纯氯仿洗脱，然后依次用氯仿和丙酮的混合溶液洗脱，氯仿与丙酮的洗脱比例为50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、3:1；氯仿与丙酮洗脱比例为3：1时洗脱得到化合物1和化合物3的纯品，以及化合物2的粗提物，将化合物2经HPLC分离，得到化合物2的纯品。本专利技术化合物结构鉴定：化合物1(桦木酸)：核磁共振的13C-NMR和DEPT显示该化合物11有30个碳信号，分别为6个甲基，11个亚甲基，6个次甲基和7个季碳。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ4.95(1H,brs,Hβ-29),4.77(1H,brs,Hα-29),3.50(1H,dd,J＝15.9,7.4Hz,H-3),2.25(1H,m,H-19),1.79,0.99,0.97,0.96,0.88,0.85(Me-30,Me-27,Me-23,Me-26,Me-25,Me-24),0.67(1H,d,J＝8.7Hz,H-5).13C-NMR(125MHz,CDCl3):δC:39.5(C1),28.7(C2),78.1(C3),39.3(C4),55.9(C5),18.8(C6),34.8(C7),41.1(C8),51.0(C9),37.5(C10),21.2(C11),26.1(C12),38.6(C13),42.9(C14),31.2(C15),32.9(C16),56.7(C17),47.8(C18),49.8(C19),151.4(C20),30.3(C21),37.5(C22),28.3(C23),14.9(C24),16.4(C25),16.4(C26),14.9(C27),178.9(C28),110.0(C29),19.5(C30)。[2]化合物2(羽扇豆醇)：核磁共振的13C-NMR和DEPT显示该化合物10有30个碳信号，分别为7个甲基，11个亚甲基，6个次甲基和6个季碳。1H-NMR(500MHz,CDCl3):δ4.88(1H,brs,Hβ-29),4.74(1H,brs,Hα-29),3.34(1H,m,H-3),2.15(1H,m,H-19),1.77(3H,s,Me-30),1.03,0.99,0.97,0.85,0.80,0.79(Me-26,Me-27,Me-23,Me-25,Me-28,Me-24),0.69(1H,d,J＝10.0Hz,H-5).13C-NMR(125MHz,CDCl3):δC:37.6(C1),27.6(C2),78.2(C3),39.6(C4),55.9(C5),18.8(C6)34.7(C7),41.3(C8),50.8(C9),37.4(C10),19.3(C11),25.8(C12),37.5(C13),43.0(C14),27.6(C15),34.9(C16),43.0(C17),48.4(C18),48.6(C19),150.1(C20),30.1(C21),39.6(C22),28.3(C23),16.2(C24),16.4(C25),16.5(C26),15.0(C27),18.8(C28),110.0(C29),19.3(C30)。[2]化合物3：核磁共振的13C-NMR和DEPT显示该化合物3有41个碳信号，分别为7个甲基，20个亚甲基，6个次甲基和8个季碳。1HNMR(500MHz,CDCl3):δ0.86(C11’H3),0.87(C24H3),1.22、1.58(C1H2),0.88(C23H3),1.18、1.56(C15H2),1.32、1.62(C11H2),1.34、1.66(C12H2),0.96(C25H3/C26H3/C27H3),1.26(C5’H2/C6’H2/C7’H2)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，其特征在于：其制备包括以下步骤：取杜仲粉碎后用95%的乙醇加热回流提取，减压回收浸膏；将总浸膏用2倍水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷萃取，减压回收溶剂，得到各部分的浸膏；将上面所得二氯甲烷部位的经100‑200目硅胶干法装柱进行划段，分为十个组分，并将第2个组分利用Sephadex LH‑20洗脱，最后利用300‑400目硅胶首先由纯氯仿洗脱，然后依次用氯仿和丙酮的混合溶液洗脱，氯仿与丙酮的洗脱比例为50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、3:1；氯仿与丙酮洗脱比例为3：1时，洗脱得到化合物1和化合物3的纯品，以及化合物2的粗提物，将化合物2经HPLC分离，得到化合物2的纯品；化合物1为桦木酸，结构式：

【技术特征摘要】
1.一种从杜仲分离纯化的桦木酸及类似物，其特征在于：其制备包括以下步骤：取杜仲粉碎后用95%的乙醇加热回流提取，减压回收浸膏；将总浸膏用2倍水混悬后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷萃取，减压回收溶剂，得到各部分的浸膏；将上面所得二氯甲烷部位的经100-200目硅胶干法装柱进行划段，分为十个组分，并将第2个组分利用SephadexLH-20洗脱，最后利用300-400目硅胶首先由纯氯仿洗脱，然后依次用氯仿和丙酮的混合溶液洗脱，氯仿与丙酮的洗脱比例为50:1、30:1、20:1、15:1、10:1、3...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭艾娟，钱文丹，吕世明，陈波利，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52