The invention relates to the field of medical biological dressing, in particular to a preparation method of GelMA hydrogel three-dimensional double-layer excipient for human acellular amniotic membrane. The method is a method for preparing GelMA hydrogel/human acellular amniotic membrane three-dimensional double-layer dressing by electrospinning combined with optical cross-linking technology. The specific preparation method is: gelatin is grafted with methacrylic anhydride (MA) to form methacrylic acid. GelMA was prepared by electrospinning, which covered human acellular amniotic membrane (D_HAM) with porous fibers. The three-dimensional bilateral bioactive dressing was prepared by adding photoinitiator Irgacure 2959 to cross-link. The dressing was freeze-dried, sterilized by gamma irradiation and packaged under sterile conditions. The invention has good anti-inflammation, anti-infection and biocompatibility, and can promote rapid healing of oral mucosal wounds.
【技术实现步骤摘要】
GelMA水凝胶人脱细胞羊膜三维双层辅料的制备方法
本专利技术涉及医用生物敷料领域,具体地说,是一种GelMA水凝胶人脱细胞羊膜三维双层辅料的制备方法。
技术介绍
口腔黏膜位置相对特殊,它覆盖口腔表面,前方与唇部皮肤相连,后方与咽喉黏膜相连,通过抵抗机械性刺激、限制毒性物质、微生物入侵及唾液的分泌等发挥口腔保护作用。严重粘膜病变、肿瘤手术等对口腔粘膜创伤严重,常引起较大的口腔粘膜缺损,以往采用打碘仿油纱包覆盖创面,邻近瓣转移修复如颊脂垫瓣、腭瓣、颈阔肌瓣等,不仅增加手术难度及创伤,而且引起供区不同程度的功能障碍及并发症。打碘仿油纱包覆盖创面,导致术后疤痕畸形,引起张口受限、舌活动受限等。理想的口腔黏膜缺损替代材料应具有以下特点:1)造价低;2)保存期长;3)使用方便,手术操作简单,易于固定;4)无抗原性;5)具有持久性;6)具有柔韧性;7)对细菌具有屏障作用;8)对不规则创面顺应性好;9)不会过度增生。目前尚无满足以上所有条件的理想替代物。人羊膜位于胎盘的最内层,为厚度20-500um的半透明膜,拥有优越的细胞外基质成分,被公认为具有革命性改进的生物材料。人脱细胞羊膜作为一种特殊的细胞外基质,取材较易,数量较多。人脱细胞羊膜是一种脱细胞材料,主要成分是纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白多糖及生长因子,已被广泛应用于各部位损伤修复,如角膜移植、皮肤缺损、软骨损伤后的修复及外周神经再生等领域,并获得良好的治疗效果。实践已证明人脱细胞羊膜是一种良好的创面覆盖敷料,其具有良好的生物相容性、稳定性,还具有一定的血管弹性、可塑变形性、抗炎、抗感染、无 ...
【技术保护点】
1.一种GelMA水凝胶人脱细胞羊膜三维双层辅料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:脱细胞羊膜(D‑HAM)的制备:选择肝炎病毒抗原、梅毒抗体及人免疫缺陷病毒抗体均为阴性的剖腹产的产妇,无菌操作下取胎膜,钝性分离去除绒毛膜组织,保留羊膜层,将羊膜转移到补充有抗生素及抗菌剂的无菌PBS中反复冲洗去除血凝块,然后用0.2% EDTA在37℃下处理30分钟,接着于0.5mol/L氢氧化钠溶液中浸泡30秒,此后将其转移到5%氯化铵中剧烈摇晃,通过剧烈晃动和刮擦从羊膜中去除细胞,最后用PBS洗涤三次,冻干后备用;步骤二:GelMA水凝胶电纺液的制备:将20g明胶与200mlPBS混合放入预热的60℃水浴中搅拌溶解至透明黄色液体,用泵将16ml甲基丙烯酸酐以4ml/min的速度在避光条件下滴入上述液体并充分搅拌2小时,加入预热好的800mlPBS搅拌反应15min注入14‑16KD透析袋中用去离子水透析一周,一周后将取出透析袋中溶液,选用0.45um滤纸过滤后放入‑20℃冰箱预冻12小时,之后冻干备用;步骤三:三维双层敷料的制备:取100mg‑120mg加1ml六氟异丙醇配成电纺液,将步 ...
【技术特征摘要】
1.一种GelMA水凝胶人脱细胞羊膜三维双层辅料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:脱细胞羊膜(D-HAM)的制备:选择肝炎病毒抗原、梅毒抗体及人免疫缺陷病毒抗体均为阴性的剖腹产的产妇,无菌操作下取胎膜,钝性分离去除绒毛膜组织,保留羊膜层,将羊膜转移到补充有抗生素及抗菌剂的无菌PBS中反复冲洗去除血凝块,然后用0.2%EDTA在37℃下处理30分钟,接着于0.5mol/L氢氧化钠溶液中浸泡30秒,此后将其转移到5%氯化铵中剧烈摇晃,通过剧烈晃动和刮擦从羊膜中去除细胞,最后用PBS洗涤三次,冻干后备用;步骤二:GelMA水凝胶电纺液的制备:将20g明胶与200mlPBS混合放入预热的60℃水浴中搅拌溶解至透明黄色液体,用泵将16ml甲基丙烯酸酐以4ml/min的速度在避光条件下滴入上述液体并充分搅拌2小时,加入预热好的800mlPBS搅拌反应15min注入14-16KD透析袋中用去离子水透析一周,...
【专利技术属性】
技术研发人员:张强,刘明艳,郭军,常财旺,朱锦跃,孟志兵,葛自力,
申请(专利权)人:张强,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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