一种抗原保存缓冲液制造技术

本发明专利技术提供一种抗原保存缓冲液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清蛋白浓度为5‑50g/L、所述海藻糖浓度为20‑300g/L、所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01‑0.1mol/L、所述Proclin300浓度为0.01‑0.2％；且所述混合液的pH值范围为6.5‑7.5，本申请的抗原保存缓冲液，能大大降低抗原降解速度，保持抗原生物活性，提高抗原的稳定性，延长抗原保存时间。

【技术实现步骤摘要】
一种抗原保存缓冲液[
]本专利技术涉及缓冲液
，尤其涉及一种能有效保持抗原的稳定性，极大地提高抗原的保存时间的抗原保存缓冲液。[
技术介绍
]生物芯片技术发源自20世纪90年代初，它利用先进的微型化技术，将数以万计的生物样品与复杂的功能结构集成在一块几平方厘米的芯片上，实现高集中，高通量，高精度的快速检测与分析。利用芯片的点样技术，将多种蛋白包被在芯片表面，然后捕获生物样品中的蛋白质，被捕获的蛋白质可以通过后续的手段进行分析，如荧光成像、质谱分析等。这种新型的蛋白质分析方法可以取代传统的蛋白印迹法和酶联免疫吸附法，可以快速的、高通量的研究疾病相关蛋白或蛋白质之间的相互作用，在医疗诊断领域具有重要的作用。目前很多以蛋白芯片为载体的体外诊断试剂被推向市场。这些蛋白芯片的开发与质量控制需要用标准浓度的抗原对其性能进行评估，由于灵敏度要求，抗原需要被稀释至很低的浓度，在低浓度下，大部分抗原的的稳定性都会受到不同程度的影响，发生活性降低或者降解的情况，从而影响蛋白芯片的开发与质控。单一的缓冲液很难使抗原在低浓度下保持稳定，有些制造商加入动物血清来保持抗原稳定，这增加了安全风险，且不易保持批间的一致性。因此，开发一种有效保持抗原稳定性的缓冲液对蛋白芯片，甚至体外诊断试剂领域有着重要的意义。[
技术实现思路
]为克服现有技术所存在的问题，本专利技术提供一种能有效保持抗原的稳定性，极大地提高抗原的保存时间的抗原保存缓冲液。本专利技术解决技术问题的方案是提供一种抗原保存缓冲液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清蛋白浓度为5-50g/L、所述海藻糖浓度为20-300g/L、所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.1mol/L、所述Proclin300浓度为0.01-0.2％；且所述混合液的pH值范围为6.5-7.5，优选地，所述牛血清蛋白浓度为10-30g/L。优选地，所述海藻糖浓度为30-100g/L。优选地，所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.05mol/L。优选地，所述Proclin300浓度为0.05-0.2％。优选地，所述牛血清蛋白浓度为10-20g/L。优选地，所述海藻糖浓度为30-50g/L。优选地，所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.02mol/L。优选地，所述Proclin300浓度为0.05-0.1％。与现有技术相比，本专利技术一种抗原保存缓冲液通过同时采用牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300进行混合并得到最终pH值范围为6.5-7.5的混合溶液，经过多次重复性的实验，并控制各组成成分在混合溶液中的浓度值大小，借助于本申请提供的技术方案，使用本申请的抗原保存缓冲液，能大大降低抗原降解速度，保持抗原生物活性，提高抗原的稳定性，延长抗原保存时间，当将本专利技术的抗原保存缓冲液用于抗原保存时，该缓冲液与目前常用缓冲液相比，在-20℃的保存条件下，能够更长时间保持抗原的生物活性，同时有效降低抗原降解速度，使抗原更稳定，混合溶液的pH值为6.5-7.5，由此，本申请中通过采用上述pH值的混合液，可以进一步在较长时间内保持抗原的生物活性和稳定性。[附图说明]图1是本专利技术一种抗原保存缓冲液与对比抗原保存缓冲液在37℃保存CEA、NSE、Cyfra21-1、AFP抗原，第0、1、2、3、4天检测的荧光扫描图。图2是本专利技术一种抗原保存缓冲液与对比抗原保存缓冲液在37℃保存CEA、NSE、Cyfra21-1、AFP抗原，测得的CEA抗原荧光值从第0至第4天的变化趋势图。图3是本专利技术一种抗原保存缓冲液与对比抗原保存缓冲液在37℃保存CEA、NSE、Cyfra21-1、AFP抗原，测得的NSE抗原荧光值从第0至第4天的变化趋势图。图4是本专利技术一种抗原保存缓冲液与对比抗原保存缓冲液在37℃保存CEA、NSE、Cyfra21-1、AFP抗原，测得的Cyfra12-1抗原荧光值从第0至第4天的变化趋势图。图5是本专利技术一种抗原保存缓冲液与对比抗原保存缓冲液在37℃保存CEA、NSE、Cyfra21-1、AFP抗原，测得的AFP抗原荧光值从第0至第4天的变化趋势图。[具体实施方式]为使本专利技术的目的，技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本专利技术，并不用于限定此专利技术。请参阅图1至图5，本专利技术一种抗原保存缓冲液1由牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清蛋白浓度为5-50g/L、所述海藻糖浓度为20-300g/L、所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.1mol/L、所述Proclin300浓度为0.01-0.2％；且所述混合液的pH值范围为6.5-7.5通过同时采用牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300进行混合并得到最终pH值范围为6.5-7.5的混合溶液，经过多次重复性的实验，并控制各组成成分在混合溶液中的浓度值大小，借助于本申请提供的技术方案，使用本申请的抗原保存缓冲液，能大大降低抗原降解速度，保持抗原生物活性，提高抗原的稳定性，延长抗原保存时间，当将本专利技术的抗原保存缓冲液用于抗原保存时，该缓冲液与目前常用缓冲液相比，在-20℃的保存条件下，能够更长时间保持抗原的生物活性，同时有效降低抗原降解速度，使抗原更稳定，混合溶液的pH值为6.5-7.5，由此，本申请中通过采用上述pH值的混合液，可以进一步在较长时间内保持抗原的生物活性和稳定性。目前保持抗原蛋白质活性的方法通常是将抗原长期保存在-20℃以下的环境中或者是冷冻干燥，并且不能冻融，而在2-8℃存放一周或37℃破坏一天，其生物活性就损失50％以上。由于-20℃保存或者冷冻干燥的抗原蛋白具有保存成本高和不方便使用等缺点。优选地，所述牛血清蛋白浓度为10-30g/L。优选地，所述海藻糖浓度为30-100g/L。优选地，所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.05mol/L。优选地，所述Proclin300浓度为0.05-0.2％。优选地，所述牛血清蛋白浓度为10-20g/L。优选地，所述海藻糖浓度为30-50g/L。优选地，所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.02mol/L。优选地，所述Proclin300浓度为0.05-0.1％。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提出了上述的抗原保存缓冲液在保存抗原中的用途，根据本专利技术的具体实施例，通过采用本专利技术的抗原保存缓冲液能够有效保持抗原的活性和稳定性，具体地，在37℃下保存4天，其特定蛋白的活性依然保持在初始值的80％以上。实施例1：按照以下浓度和组分配制本专利技术抗原保存缓冲液：10g/L牛血清白蛋白、30g/L海藻糖、0.01mol/L磷酸盐缓冲盐溶液、0.1％Proclin300。用1M氢氧化钠溶液或1M盐酸溶液调节pH值至7.4，待完全混匀后，用0.22μm滤膜过滤2-8℃保存待用。实施例2：按照以下浓度和组分配制本专利技术抗原保存缓冲液：5g/L牛血清白蛋白、20g/L海藻糖、0.01mol/L磷酸盐缓冲盐溶液、0.01％Proclin300。用1M氢氧化钠溶液或1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗原保存缓冲液，其特征在于：包括由牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清蛋白浓度为5‑50g/L、所述海藻糖浓度为20‑300g/L、所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01‑0.1mol/L、所述Proclin300浓度为0.01‑0.2％；且所述混合液的pH值范围为6.5‑7.5。

【技术特征摘要】
1.一种抗原保存缓冲液，其特征在于：包括由牛血清白蛋白、海藻糖、磷酸盐缓冲盐溶液以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清蛋白浓度为5-50g/L、所述海藻糖浓度为20-300g/L、所述磷酸盐缓冲盐溶液浓度为0.01-0.1mol/L、所述Proclin300浓度为0.01-0.2％；且所述混合液的pH值范围为6.5-7.5。2.如权利要求1所述的一种抗原保存缓冲液，其特征在于：所述牛血清蛋白浓度为10-30g/L。3.如权利要求1所述的一种抗原保存缓冲液，其特征在于：所述海藻糖浓度为30-100g/L。4.如权利要求1所述的一种抗原保存...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖滔，王国新，唐梅杰，陈敏文，
申请(专利权)人：深圳清华大学研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44