一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物及其应用，该标志物为血浆标志物miR‑106a‑3p，miR‑106a‑5p，miR‑20b‑5p，miR‑92a‑2‑5p，miR‑500a‑5p，miR‑501‑5p，miR‑188‑3p，miR‑let‑7f‑5p和miR‑98‑5p以及血清标志物miR‑106a‑5p，miR‑19b‑3p，miR‑20b‑5p，miR‑92a‑3p，miR‑501‑3p，miR‑502‑3p，miR‑532‑3p，miR‑532‑5p和miR‑188‑3p中的一种或多种。循环miRNA作为新型的生物标志物，具有稳定性好、微创易获取、灵敏性和特异性高的特点。这类分子标志物的开发利用将为包括肿瘤在内的各种疾病的诊断以及进一步治疗提供新的方向。本研究将更有针对性的得出具有临床诊断潜能的乳腺癌循环miRNA标记物。研究证实了这组miRNA作为诊断乳腺癌的无创标记物的可靠性以及可重复性。

【技术实现步骤摘要】
一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物及其应用
本专利技术属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物及其应用。
技术介绍
乳腺癌(BreastCancer,BC)是女性最常见的恶性肿瘤，据最新世界癌症报告(WorldCancerReport2014)，其占全球女性所患恶性肿瘤的25.2％。在中国，乳腺癌发病率呈上升趋势，2015年中国女性乳腺癌发病率居恶性肿瘤第一位，致死率居第六位。目前现有的检查手段如乳腺超声检查、钼靶检查、核磁共振检查以及空心针穿刺活检，均需有一定体积的肿瘤组织方能检测，在乳腺癌的早期诊断存在一定的局限性；而临床常用的如糖类抗原15-3(CA15-3)等肿瘤标志物，其敏感性或特异性不高。随着基因组学、蛋白组学以及代谢组学等生物技术的发展，越来越多的生物标志物已被发现或研究。因此，发现新的能够早期诊断乳腺癌的标记物指日可待，从而促进乳腺癌早期干预和治疗，延长病人的生存期。微小RNA(miRNAs)是一类进化保守、长度在18-25个左右的核苷酸的小非编码RNA分子，其通过转录后调控广泛参与机体的众多生理病理过程，包括肿瘤的发生、侵袭及转移等。miRNA的表达具有时间特异性以及组织特异性，一些miRNA能够参与特定的生理病理以及特异的疾病过程。研究发现，miRNA的表达在肿瘤中有不同程度的上调和下调，为其能够作为一种新兴的肿瘤标志物奠定了基础。2008年，Mitchell在外周血中检测到游离的miRNA，发现其能够稳定存在于外周血中，并且可以作为诊断肿瘤的无创标志物。这一研究发现拉开了全球众多研究者开始探索循环miRNA作为无创标志物的大幕。现已有研究证实了循环miRNA在乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、结直肠癌等肿瘤中的潜在诊断价值。但由于研究方法及纳入人群的差异，导致研究结果不完全一致。因此，本研究基于qRT-PCR的绝对定量法，通过对大样本的乳腺癌血清及血浆的研究，旨在寻找对乳腺癌具有潜在诊断价值的循环miRNA。并对这些miRNA在乳腺癌组织中以及外周外泌体中的表达进行验证，以进一步明确其与乳腺癌的关系。若根据这类miRNA设计针对于乳腺癌的诊断试剂盒，将会推动我国乳腺癌的诊治水平，也为将来对乳腺癌的进一步研究提供思路。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物。本专利技术的另一目的在于提供上述循环miRNA标志物及其引物在制备乳腺癌辅助诊断试剂盒以及在制备治疗乳腺癌的药物中的应用。本专利技术的又一目的在于提供用于乳腺癌辅助诊断和治疗的试剂盒及药物。本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：一种与乳腺癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物，该标志物为血浆标志物miR-106a-3p(CUGCAAUGUAAGCACUUCUUAC),miR-106a-5p(AAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG),miR-20b-5p(CAAAGUGCUCAUAGUGCAGGUAG),miR-92a-2-5p(GGGUGGGGAUUUGUUGCAUUAC),miR-500a-5p(UAAUCCUUGCUACCUGGGUGAGA),miR-501-5p(AAUCCUUUGUCCCUGGGUGAGA),miR-188-3p(CUCCCACAUGCAGGGUUUGCA),miR-let-7f-5p(UGAGGUAGUAGAUUGUAUAGUU)和miR-98-5p(UGAGGUAGUAAGUUGUAUUGUU)以及血清标志物miR-106a-5p(AAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG),miR-19b-3p(UGUGCAAAUCCAUGCAAAACUGA),miR-20b-5p(CAAAGUGCUCAUAGUGCAGGUAG),miR-92a-3p(UAUUGCACUUGUCCCGGCCUGU),miR-501-3p(AAUGCACCCGGGCAAGGAUUCU),miR-502-3p(AAUGCACCUGGGCAAGGAUUCA),miR-532-3p(CCUCCCACACCCAAGGCUUGCA),miR-532-5p(CAUGCCUUGAGUGUAGGACCGU)和miR-188-3p(CUCCCACAUGCAGGGUUUGCA)中的一种或多种。该循环miRNA标志物优选为血浆标志物miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清标志物miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中两种或两种以上的组合，进一步优选为血浆miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p十八种miRNA所组成的组合。上述的循环miRNA标志物在辅助诊断乳腺癌中的应用。上述的循环miRNA标志物在制备乳腺癌辅助诊断试剂盒或治疗乳腺癌药物中的应用。一种与乳腺癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物的引物，该引物包含血浆miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中的一种或多种miRNA的引物；优选为包含血浆miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中两种或两种以上miRNA的引物；进一步优选为包含血浆miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，mi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物，其特征在于，该循环标志物为血浆标志物miR‑106a‑3p，miR‑106a‑5p，miR‑20b‑5p，miR‑92a‑2‑5p，miR‑500a‑5p，miR‑501‑5p，miR‑188‑3p，miR‑let‑7f‑5p和miR‑98‑5p以及血清标志物miR‑106a‑5p，miR‑19b‑3p，miR‑20b‑5p，miR‑92a‑3p，miR‑501‑3p，miR‑502‑3p，miR‑532‑3p，miR‑532‑5p和miR‑188‑3p中的一种或多种。

【技术特征摘要】
1.一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物，其特征在于，该循环标志物为血浆标志物miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清标志物miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的位于X染色体上的循环miRNA标志物，其特征在于，该循环miRNA标志物为血浆标志物miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清标志物miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中两种或两种以上的组合，优选为血浆miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p十八种miRNA所组成的组合。3.权利要求1或2所述的位于X染色体上的循环miRNA标志物在辅助诊断乳腺癌中的应用。4.权利要求1或2所述的位于X染色体上的循环miRNA标志物在制备乳腺癌辅助诊断试剂盒或治疗乳腺癌药物中的应用。5.一种与乳腺癌辅助诊断相关的位于X染色体上的循环miRNA标志物的引物，其特征在于该引物包含血浆标志物miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR-501-5p，miR-188-3p，miR-let-7f-5p和miR-98-5p以及血清标志物miR-106a-5p，miR-19b-3p，miR-20b-5p，miR-92a-3p，miR-501-3p，miR-502-3p，miR-532-3p，miR-532-5p和miR-188-3p中的一种或多种miRNA的引物；优选为包含循环miRNA中血浆标志物miR-106a-3p，miR-106a-5p，miR-20b-5p，miR-92a-2-5p，miR-500a-5p，miR...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱伟，夏添松，周鑫，丁强，陈彦，李明卉，邹璇，
申请(专利权)人：朱伟，
类型：发明
国别省市：江苏,32