一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及微生物制剂及植物栽培技术领域，具体涉及一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用。本发明专利技术采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离丛枝菌根真菌的成熟孢子，然后接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；将原种菌剂接种至扩繁基质中播种玉米种子，对玉米培养6～10周，将扩繁基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质混合，得到丛枝菌根真菌菌剂，该菌剂可促进玉米在钼污染土壤中生长。

Arbuscular mycorrhizal fungus inoculum and its preparation method and Application

The invention relates to the field of microbial preparation and plant cultivation technology, in particular to an arbuscular mycorrhizal fungi preparation method and application thereof. The rhizosphere soil of plants in molybdenum mining area is collected, mature spores of arbuscular mycorrhizal fungi are separated by wet sieve method, and then inoculated on the root of maize seedlings. After inoculation, the maize seedlings grow on the culture medium for 3-4 months, the culture medium and the maize root system are separated, the maize root system is shredded, and then mixed with the culture medium. Arbuscular mycorrhizal mycorrhizal fungi were obtained by inoculating the original fungi into the propagation medium and sowing maize seeds. The maize was cultured for 6-10 weeks. The propagation matrix and maize root system were separated. The maize root system was shredded and then mixed with the propagation matrix to obtain the arbuscular mycorrhizal fungi, which could promote maize to grow in molybdenum-contaminated soil. Long.

【技术实现步骤摘要】
一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用
本专利技术涉及微生物制剂及植物栽培
，具体涉及一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用。
技术介绍
钼不仅是动植物生长所必需的营养元素之一，同时作为稀有元素，广泛应用于钢铁、电子、航天等产业，是非常重要的战略资源。我国钼储量居世界前列，辽宁、陕西、山西、河南、福建、江西等省均有钼矿，且储量大、开发条件好。钼矿及伴生钼矿开采和选矿产生的尾矿和采选矿废水可造成严重的水体和土壤钼污染。自Ferguson等首先报道反刍动物因食用高钼草导致钼中毒开始，环境的钼污染问题已引起国内外学者的高度重视。一般认为动物容易产生钼中毒症状，而植物对钼的抗性较强，但过量钼污染仍会对植物造成毒害作用，也必然会对玉米等植物的生长、产量以及品质造成较大的影响。玉米是一个广域的植物品种，易栽培、生长快，具有很高的生物量，针对我国人多地少、土壤中低度污染突出的问题，利用分布广、易生长、生物量大的能源和经济作物开展生态修复具有“边生产-边修复”的明显优势，因此玉米成为了在土壤修复中的理想作物。根据发表于《环境科学》(0250-3301(2008)03-0709-05)的《玉米对受污染河道复合沉积物的修复》，玉米的根际作用促使沉积物中微生物种类和数量增加，酶活性的提高也促进了玉米对沉积物中污染物的修复进程；根据发表于《辽宁工程技术大学学报》(1008-0562(2010)02-0313-03)的《污染河道沉积物的植物修复》，玉米的根际作用增加了沉积物中微生物的数量，增强了酶活性，对修复沉积物中重金属污染具有良好效果。因此，需要找到促进玉米在重金属污染的环境中生长的方法。丛枝菌根真菌不仅能够改善植物营养，对植物的抗逆能力也具有极大地促进作用。根据发表于《环境科学》(0250-3301(2013)05-1915-07)的《丛枝菌根真菌对稀土尾矿中大豆生长和稀土元素吸收的影响》，在稀土尾矿中，接种AM真菌G.versiforme与大豆成功建立了共生关系；接种显著提高了大豆植株对P和K吸收，降低了C:P与N:P比，促进了大豆的生长。根据发表于《草业学报》(2017.26(2):69-77)的《镉污染和接种丛枝菌根真菌对紫花苜蓿生长和氮吸收的影响》，在镉浓度为12mgCd/kg条件下，接种丛枝菌根真菌Gv菌种显著增加了紫花苜蓿的株高、根瘤菌数量、地上部分生物量，总生物量，地上部分和全株吸氮量。中国专利技术专利CN2015102328763公开了一种提高沙枣抗盐碱能力的丛枝菌根真菌，提供一株丛枝菌根真菌，该菌株具有较高的承受盐碱胁迫的能力，为利用菌根-植物联合修复盐碱地提供理论依据。中国专利技术专利CN201310004329.0公开了一种用丛枝菌根真菌菌剂促进大田甘蔗生长的方法，采用该专利技术生产的丛枝菌根菌剂作为大田甘蔗接种物，促进甘蔗对土壤中养分和水分的吸收，提高甘蔗的抗旱性，产量提高10％以上。丛枝菌根真菌可以通过改善植物的营养状况来提高植物的产量和品质，也可以提高抗旱性、抗盐碱、抗病或抗重金属等。但是上述文章或公开的专利技术专利没有涉及到丛枝菌根真菌在重钼污染的条件下使用，利用丛枝菌根真菌促进玉米在重钼污染条件下生长还未见报道和专利公开。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足和缺点，本专利技术的首要目的在于提供一种丛枝菌根真菌菌剂的制备方法。本专利技术的另一目的在于提供上述制备方法制得的丛枝菌根真菌菌剂，该菌剂可以促进重钼污染土壤中玉米的生长。本专利技术的再一目的在于提供上述丛枝菌根真菌菌剂的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种丛枝菌根真菌菌剂的制备方法，包含如下步骤：(1)采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离根际土壤中的丛枝菌根真菌的成熟孢子，得到丛枝菌根真菌孢子；将丛枝菌根真菌孢子接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，然后去除玉米地上部分，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质再次混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；(2)将步骤(1)制得的丛枝菌根真菌原种菌剂接种至扩繁基质中，混匀，得到含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；然后将含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质铺覆至厚度为10～20cm，浇水至田间持水量的50～70％，播种玉米种子，播种后表面覆盖厚度为1～2cm的含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；对玉米培养6～10周，其中，每天在光照8000～12000lux、温度28～35℃的条件下培养13～14h，在黑暗18～25℃的条件下培养10～11h；玉米生长过程中，浇灌含有1/2磷营养元素的Hoagland营养液并根据干湿状况进行浇水，控制基质含水量为田间持水量的30～70％；(3)玉米生长6～10周后，去除玉米地上部分，将扩繁基质与玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质再次混合，得到丛枝菌根真菌菌剂；步骤(1)中所述的玉米幼苗优选为播种2周的玉米幼苗；步骤(1)中所述的培养基质优选为包含细河沙和蔗渣的混合基质；所述的细河沙和蔗渣的质量比优选为(4～6)：1；所述的细河沙优选通过如下预处理：细河沙过2mm筛子，用水冲洗至水清，然后用蒸馏水浸泡3天，并再用蒸馏水冲洗3次；然后在121℃条件下，灭菌2h，冷却，在无菌环境下铺成小于1cm的薄层，自然风干1周；所述的蔗渣优选通过如下预处理：将蔗渣粉碎，过10～100目筛，灭菌；步骤(1)中所述的培养基质的厚度优选为10～15cm；步骤(1)中所述的生长的具体操作优选为：在玉米生长过程中每2周一次浇灌1次Hoagland营养液；步骤(1)中所述的丛枝菌根真菌原种菌剂为经丛枝菌根真菌孢子繁殖后所获得的菌剂，包括培养基质以及培养基质中的丛枝菌根真菌孢子、菌丝以及玉米根系；步骤(2)中所述的丛枝菌根真菌原种菌剂的接种量优选为15～20wt％；步骤(2)中所述的扩繁基质的厚度优选为15cm；步骤(2)中所述的扩繁基质优选为细河沙；所述的细河沙优选通过如下预处理：细河沙过2mm筛子，用水冲洗至水清，然后用蒸馏水浸泡3天，并再用蒸馏水冲洗3次；然后在121℃条件下，灭菌2h，冷却，在无菌环境下铺成小于1cm的薄层，自然风干1周；步骤(2)中所述的玉米的培养条件优选为：每天在光照10000lux、温度30℃的条件下培养14h，在黑暗20℃的条件下培养10h；步骤(2)中所述的浇水的条件优选为：控制基质含水量为田间持水量的40～50％，每2天浇一次；步骤(2)中所述的含有1/2磷营养元素的Hoagland营养液优选每1周浇灌1次，用量按照补足基质含水量达到田间持水量的30～70％为止；步骤(3)中所述的玉米根系剪碎后长度小于0.5cm；步骤(3)中所述的丛枝菌根真菌菌剂的含水量不低于田间持水量的30％；步骤(3)中所述的丛枝菌根真菌菌剂优选随时收获，随时施用；若需要存放，要存放于0～4℃的条件下，并在1周内施用；一种丛枝菌根真菌菌剂，通过上述制备方法制备得到；所述的丛枝菌根真菌菌剂在钼污染土壤改良及玉米栽培领域中的应用；一种利用上述丛枝菌根真菌菌剂促进玉米在钼污染土壤中生长的方法，包括如下步骤：将上述丛枝菌根真菌菌剂施加到钼污染土壤中，然后再进行玉米栽培；所述的丛枝菌根真菌高效菌剂的接种量优选为10～15wt％；本专利技术的原理：重钼污染本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种丛枝菌根真菌菌剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离根际土壤中的丛枝菌根真菌的成熟孢子，得到丛枝菌根真菌孢子；将丛枝菌根真菌孢子接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，然后去除玉米地上部分，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质再次混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；(2)将步骤(1)制得的丛枝菌根真菌原种菌剂接种至扩繁基质中，混匀，得到含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；然后将含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质铺覆至厚度为10～20cm，浇水至田间持水量的50～70％，播种玉米种子，播种后表面覆盖厚度为1～2cm的含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；对玉米培养6～10周，其中，每天在光照8000～12000lux、温度28～35℃的条件下培养13～14h，在黑暗18～25℃的条件下培养10～11h；玉米生长过程中，浇灌含有1/2磷营养元素的Hoagland营养液并根据干湿状况进行浇水，控制基质含水量为田间持水量的30～70％；(3)玉米生长6～10周后，去除玉米地上部分，将扩繁基质与玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质再次混合，得到丛枝菌根真菌菌剂。...

【技术特征摘要】
1.一种丛枝菌根真菌菌剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离根际土壤中的丛枝菌根真菌的成熟孢子，得到丛枝菌根真菌孢子；将丛枝菌根真菌孢子接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，然后去除玉米地上部分，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质再次混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；(2)将步骤(1)制得的丛枝菌根真菌原种菌剂接种至扩繁基质中，混匀，得到含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；然后将含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质铺覆至厚度为10～20cm，浇水至田间持水量的50～70％，播种玉米种子，播种后表面覆盖厚度为1～2cm的含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；对玉米培养6～10周，其中，每天在光照8000～12000lux、温度28～35℃的条件下培养13～14h，在黑暗18～25℃的条件下培养10～11h；玉米生长过程中，浇灌含有1/2磷营养元素的Hoagland营养液并根据干湿状况进行浇水，控制基质含水量为田间持水量的30～70％；(3)玉米生长6～10周后，去除玉米地上部分，将扩繁基质与玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质再次混合，得到丛枝菌根真菌菌剂。2.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的玉米...

【专利技术属性】
技术研发人员：石兆勇，张家成，徐寿霞，尹可敬，李珂，徐晓峰，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：河南,41