The invention discloses a method for fermenting high yield acanthomycin B by Aspergillus oryzae. The method is as follows: inoculating Aspergillus oryzae to fermentation medium and cultivating the fermentation broth containing acanthomycin B at 25 C, separating and purifying the fermentation broth, obtaining acanthoxin B, and controlling the species of carbon source and adding particles. The mycelial form of Aspergillus formation in the process of Aspergillus formation makes the mycelium appear small spheroid, so that the problems of high viscosity, low dissolved oxygen and insufficient mass transfer caused by long mycelium length in the fermentation are solved. By analyzing the key metabolic components in the ECB synthesis process, the strategy of adding the precursor in the fermentation process is optimized to make the fermentation product. The yield is more than doubled, so it has a good application prospect.
【技术实现步骤摘要】
一种利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法(一)
本专利技术涉及一种利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法。(二)
技术介绍
丝状真菌发酵过程中,其菌丝形态受生长条件及培养环境的影响,随着培养条件、培养基组成等的变化,菌丝形态会出现不同的类型,如无分支的菌丝、有分支且结构复杂的菌丝、菌丝团块、菌丝球等,表现出不同大小、密度及表面结构。此外,随时间变化,不同生长时期的菌丝体内部结构也会发生改变。丝状真菌在液体深层发酵中菌丝体通常呈现絮状、团状和球状三种形态。菌丝体形态对发酵液的粘度等影响较大,菌丝体形态不同,其产物也会发生改变,因此,在丝状真菌发酵过程中需要将其控制在最佳菌丝体形态,以利于目标产物的代谢合成。在发酵生产过程中,丝状真菌菌丝若形成絮状的菌丝体,会造成发酵液粘度增大,不利于营养物质和氧气的溶解、传递及分布,从而降低好氧发酵产物的产量,严重时会导致产物产率极低;若菌丝体形态呈现紧密的团块状,在团块内部,营养物质及氧气传递受阻,会导致内部出现营养匮乏及缺氧状态,影响菌丝体生长和产物合成,有时还会造成团块内部菌丝体发生自溶现象。深层液体发酵的孢子萌发出菌丝及菌丝延长的过程中,在孢子聚集及机械搅拌作用下,发酵液中的菌丝还可以形成大小适中的菌丝球,此时发酵液的传递效果好,菌丝体生长旺盛,目标代谢产物合成效率高。可以说菌丝体形态是工业发酵中获得目标产物产量最大化的主要影响因素。目前国内外棘白菌素B(ECB)均是利用微生物发酵法进行制备,其中主要是以构巢曲霉Aspergillusnidulans进行发酵。但是该类微生物发酵过程中会碰到一些难以克服的技术问题,如发酵 ...
【技术保护点】
1.一种利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法,其特征在于所述方法为:将构巢曲霉接种至发酵培养基,在25℃下培养,获得含棘白菌素B的发酵液,将发酵液分离纯化,获得棘白菌素B;所述发酵培养基终浓度组成为:碳源54~134g/L,氨基酸0.1~12g/L,蛋白胨8.6g/L,黄豆饼粉40.0g/L,花生油20.0g/L,K2HPO4·3H2O 3.2g/L,CaCl2 0.5g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,FeSO4·7H2O 0.5g/L,MnSO4·H2O 0.2g/L,CuSO4·5H2O 0.6g/L,溶剂为蒸馏水,pH值6~6.8,所述碳源为甘露醇、葡萄糖、甘油或油酸甲酯中的一种或两种任意比例的混合。
【技术特征摘要】
1.一种利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法,其特征在于所述方法为:将构巢曲霉接种至发酵培养基,在25℃下培养,获得含棘白菌素B的发酵液,将发酵液分离纯化,获得棘白菌素B;所述发酵培养基终浓度组成为:碳源54~134g/L,氨基酸0.1~12g/L,蛋白胨8.6g/L,黄豆饼粉40.0g/L,花生油20.0g/L,K2HPO4·3H2O3.2g/L,CaCl20.5g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,FeSO4·7H2O0.5g/L,MnSO4·H2O0.2g/L,CuSO4·5H2O0.6g/L,溶剂为蒸馏水,pH值6~6.8,所述碳源为甘露醇、葡萄糖、甘油或油酸甲酯中的一种或两种任意比例的混合。2.如权利要求1所述利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法,其特征在于所述发酵培养基中碳源为油酸甲酯。3.如权利要求1所述利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法,其特征在于所述发酵培养基中氨基酸为L-苏氨酸、L-鸟氨酸中的一种或两种任意比例的混合。4.如权利要求1所述利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B的方法,其特征在于所述发酵培养基中氨基酸由终浓度0.1~4.1g/L的L-苏氨酸和终浓度6.1g/L的L-鸟氨酸组成。5.如权利要求1所述利用构巢曲霉发酵高产棘白菌素B...
【专利技术属性】
技术研发人员:郑裕国,牛坤,胡晓龙,邹树平,吴旭萍,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。