4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了4β‑氨基取代鬼臼毒素类衍生物及其合成方法和应用，本发明专利技术将具有芳香杂环化合物蒽醌、喹唑啉、喹啉、吲哚、吲唑、嘧啶作为取代基团分别引入到鬼臼毒素或4′‑去甲基表鬼臼毒素C环4位得到式(V)所示的鬼臼类衍生物。体外肿瘤细胞活性抑制实验表明，本发明专利技术式(V)所示化合物大多数的抗肿瘤活性较鬼臼毒素类成药“依托泊苷”的抗肿瘤活性有显著提高。

【技术实现步骤摘要】
4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物及其制备方法和应用
本专利技术属于鬼臼毒素类衍生物领域，具体涉及4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物及其制备方法，本专利技术还涉及所述4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
技术介绍
鬼臼毒素(Podophyllotoxin)和4′-去甲基表鬼臼毒素(4′-Demethylepipodophyllotoxin)的结构如图1中式(I)和(II)所示，鬼臼毒素和4′-去甲基表鬼臼毒素是从鬼臼毒素类植物(如：桃儿七、山荷叶、八角莲等)中提取的具有广谱抗肿瘤活性的天然活性先导化合物，但强烈的毒副作用和生物利用度差等缺点，限制了它们在临床的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一类具有良好抗肿瘤活性的4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物；本专利技术的目的之二是提供一种制备所述4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物的方法；本专利技术的目的之三是将所述4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物应用于制备临床用抗肿瘤药物。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的：一类具有抗肿瘤活性的4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物或其药学上可接受的盐，所述鬼臼毒素类衍生物的结构式为(V)所示：其中，R1选自R2为氢或-CH3。本专利技术采用的1-氨基蒽醌、2-氨基蒽醌、1，2-二氨基蒽醌、1，5-二氨基蒽醌、2，6-二氨基蒽醌、2，4-二氨基喹唑啉、6-氨基喹啉、5-氨基喹啉、5-氨基异喹啉、8-氨基喹啉、8-氨基喹哪啶、5-氨基吲唑、6-氨基吲唑、7-氨基吲唑、5-氨基吲哚、6-氨基吲哚、7-氨基吲哚、2-(2-氨基苯基)苯并咪唑和N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶是芳香杂环化合物，如图2所示，以其作为取代基团有利于鬼臼毒素和4′-去甲基表鬼臼毒素C环4位β构型的形成，得到抗肿瘤活性进一步提高，毒副作用降低的鬼臼毒素类衍生物。本专利技术提供的制备上述式(V)所示化合物的方法，包括以下步骤：A.通过碘取代反应，在鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位引入碘，形成碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素，如图1式III和IV；B.通过亲核取代反应，将反应单体引入所述碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位。所述反应单体可以为1-氨基蒽醌、2-氨基蒽醌、1，2-二氨基蒽醌、1，5-二氨基蒽醌、2，6-二氨基蒽醌、2，4-二氨基喹唑啉、6-氨基喹啉、5-氨基喹啉、5-氨基异喹啉、8-氨基喹啉、8-氨基喹哪啶、5-氨基吲唑、6-氨基吲唑、7-氨基吲唑、5-氨基吲哚、6-氨基吲哚、7-氨基吲哚、2-(2-氨基苯基)苯并咪唑或N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶。所述碘取代反应在以下条件下进行，将鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素溶于乙腈中，加入NaI或KI，再加入适量三氯化硼乙醚催化，搅拌进行反应，即得。其中，所述鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素与NaI或KI的摩尔比可以为1∶1～1.5，例如1∶1～1.3，又如1∶1。所述三氯化硼乙醚在冰浴条件下滴加，滴加完后在一定温度下搅拌反应。所述的亲核取代反应在以下条件下进行，将所述反应单体与碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素溶于有机溶剂中，再加入适量的催化剂和缚酸剂，搅拌进行反应，即得。上述碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素为碘取代反应后，经旋干得到的产物。其中，所述反应单体与碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素的摩尔比可以是3∶1～1∶1，例如1∶1。在本专利技术中，所述有机溶剂可以为四氢呋喃、丙酮、氯仿、乙醇或乙腈，所述催化剂可以为BaCO3，所述缚酸剂可以为三乙胺或吡啶。其中，所述亲核取代反应先在冰浴条件下反应，反应时间可以为0.5～5h，例如1～3h，然后在一定温度下反应，反应时间可以为5～72h，例如13～15h。本专利技术中，碘取代反应和亲核取代反应中所述一定温度为15～40℃，例如20～30℃。本专利技术中，所述碘取代反应搅拌转速可以为100～600转/分钟。上述制备方法还包括：将亲核取代反应后的反应液过滤，滤液旋干后，使用硅胶柱层析或反相色谱柱制备分离，即得纯化的4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物产物。优选的，所述的硅胶柱层析的分离方法包括：(1)硅胶柱层析为正相硅胶柱层析，以洗脱剂装柱并平衡，所述的洗脱剂优选是体积比为20∶1的氯仿和丙酮，或者35∶1的二氯甲烷和甲醇，或者1∶1的石油醚∶乙酸乙酯体系；反相色谱柱所选液相流动相的体积比为5∶5的乙腈和水，或者为6∶4的甲醇和水，或者为5∶5的甲醇和水，最优体系为乙腈∶水＝5∶5；(2)将待分离纯化的样品以洗脱液或者流动相溶解，进行上样洗脱，收集洗脱液，将样品旋干，得纯化的4β-氨基取代鬼臼毒素类衍生物产物。体外肺癌HepG2、宫颈癌Hela、肺癌A549、乳腺癌MCF7细胞活性抑制的测试表明，本专利技术制备的式(V)所示化合物的抗肿瘤活性较鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素的抗肿瘤活性有显著提高。试验结果表明，本专利技术式(V)所示化合物可制备成抗肿瘤药物，临床应用于抗肿瘤治疗。本专利技术提供的抗肿瘤药物组合物，包括有效量的式(V)所示的化合物或其盐和药学上可接受的载体，即将药学上可接受用量的式(V)化合物或其盐，与药学上可接受的载体配合后，按本领域常规的制剂方法将其制备成任意一类适宜的药物组合物。通常该药物组合物适合于口服给药和注射给药，也适合其他的给药方法，例如经皮给药。该药物组合物可以是片剂、胶囊、粉剂、颗粒、锭剂、栓剂，或口服液或无菌胃肠外悬液等液体制剂形式。该组合物可以是大或小容量注射剂、冻干粉针、无菌粉分装等制剂形式。为了达到给药的一致性，本专利技术药物组合物优选为单剂形式。用于口服给药的单剂形式可以是片剂和胶囊，并可含有常规赋形剂诸如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；压片润滑剂，例如硬脂酸镁；崩解剂，例如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠或微晶纤维素，或药学上可接受的湿润剂，诸如十二烷基硫酸钠。附图说明图1是鬼臼毒素、4′-去甲基表鬼臼毒素、I-鬼臼毒素和I-4′-去甲基表鬼臼毒素的结构式；图2是1-氨基蒽醌、2-氨基蒽醌、1，2-二氨基蒽醌、1，5-二氨基蒽醌、2，6-二氨基蒽醌、2，4-二氨基喹唑啉、6-氨基喹啉、5-氨基喹啉、5-氨基异喹啉、8-氨基喹啉、8-氨基喹哪啶、5-氨基吲唑、6-氨基吲唑、7-氨基吲唑、5-氨基吲哚、6-氨基吲哚、7-氨基吲哚、2-(2-氨基苯基)苯并咪唑和N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶的结构式。图3是本专利技术式(V)所示化合物。具体实施方式下面通过具体实施例，对本专利技术的技术方案做进一步说明。本专利技术所采用原料和设备若非特指，均可从市场购得或是本领域常用的，实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。试验材料1、鬼臼毒素和4′-去甲基表鬼臼毒素：均购自西安和霖生物工程有限公司；2、1-氨基蒽醌、2-氨基蒽醌、1，2-二氨基蒽醌、1，5-二氨基蒽醌、2，6-二氨基蒽醌、2，4-二氨基喹唑啉、6-氨基喹啉、5-氨基喹啉、5-氨基异喹啉、8-氨基喹啉、8-氨基喹哪啶、5-氨基吲唑、6-氨基吲唑、7-氨基吲唑、5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式(V)所示的化合物或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.一种式(V)所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中，R1选自R2为氢或-CH3。2.一种制备权利要求1所述化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.通过碘取代反应，在鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位引入碘，形成碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素；B.通过亲核取代反应，将反应单体引入所述碘代鬼臼毒素或碘代4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位，所述反应单体可以选自1-氨基蒽醌、2-氨基蒽醌、1，2-二氨基蒽醌、1，5-二氨基蒽醌、2，6-二氨基蒽醌、2，4-二氨基喹唑啉、6-氨基喹啉、5-氨基喹啉、5-氨基异喹啉、8-氨基喹啉、8-氨基喹哪啶、5-氨基吲唑、6-氨基吲唑、7-氨基吲唑、5-氨基吲哚、6-氨基吲哚、7-氨基吲哚、2-(2-氨基苯基)苯并咪唑或N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述碘取代反应在以下条件下进行，将鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素溶于乙腈中，加入NaI或KI，再加入三氯化硼乙醚，搅拌，所述鬼臼毒素或4′-去甲基表鬼臼毒素与NaI或KI的摩尔比为1∶1～1.5，例如1∶1～1.3，又如1...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤亚杰，赵巍，
申请(专利权)人：汤亚杰，
类型：发明
国别省市：湖北,42