附加糖链的多肽和含有该多肽的医药组合物制造技术

本发明专利技术为附加糖链的多肽和含有该多肽的医药组合物。为了提供对生长抑素受体具有亲和性、且与生长抑素相比血中稳定性提高的附加糖链的多肽。所述附加糖链的多肽的特征在于：其是生长抑素或其类似物中至少1个氨基酸被附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽。

Polypeptides attached to sugar chains and pharmaceutical compositions containing the polypeptide

The present invention is a polypeptide with an additional sugar chain and a pharmaceutical composition containing the polypeptide. To provide a polypeptide with an affinity to the somatostatin receptor and an additional sugar chain to increase the stability of the blood in comparison with the somatostatin. The polypeptide of the additional sugar chain is characterized by that it is a polypeptide of at least 1 amino acids in the somatostatin or its analogues which are substituted by amino acids substituted by the amino acid attached to the sugar chain.

【技术实现步骤摘要】
附加糖链的多肽和含有该多肽的医药组合物
本专利技术涉及附加糖链的多肽、和含有该多肽的医药组合物。
技术介绍
生长抑素是存在于中枢神经系统及周边组织两者中的环肽。生长抑素最初分离自哺乳类的下丘脑，被鉴定为来自脑下垂体前叶的生长激素分泌物的重要抑制剂。该肽广泛地分布于例如下丘脑、胰腺、消化道等中，经由与生长抑素受体的结合而发挥作用。此外，生长抑素因抑制脑下垂体中的生长激素(GH)的分泌、抑制促甲状腺激素(TSH)分泌，以及抑制消化道中的胃泌素、选择素、胆囊收缩素(CCK)、VIP(VasoactiveIntestinalPolypeptide，血管活性肠肽)、胰腺中的胰高血糖素、胰岛素等各种激素的分泌而为人知晓。另外，还已知生长抑素具有抑制消化道蠕动的作用。具有结构式：Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(序列编号1)的天然的生长抑素(也作为生长激素释放抑制因子(SRIF)而为人知晓)最初是由Guillemin及合作研究者分离。该生长抑素通过与受体家族相互作用而发挥其效果。已知生长抑素受体(SSTR)存在1至5的亚型(SSTR1～SSTR5)，其中SSTR2分布于GH分泌性人脑下垂体腺瘤、中枢神经系统、脑下垂体前叶、视网膜、肾上腺髓质、胃、十二指肠黏膜、小肠、结肠的各组织、以及胰腺兰氏小岛的胰高血糖素分泌性A细胞中。此外，已知每个这些受体也在各种肿瘤中进行表达，例如据报道：在功能性脑下垂体腺瘤中，SSTR1与SSTR5进行表达；在胃肠道肿瘤中，除了SSTR2以外，SSTR1、SSTR3也进行表达；在嗜铬细胞瘤中，SSTR3进行表达；在前列腺癌中，SSTR1和SSTR5进行表达；在结肠直肠癌中，SSTR5进行表达(非专利文献1)。此外，SSTR4据报道可作为具有拮抗性调节作用的受体而发挥功能、以及有可能在青光眼相关的疾病的治疗中较为重要(非专利文献2)。正因为如此，生长抑素及其类似物对于生长抑素相关疾病或各种肿瘤是潜在地有用的治疗药。另一方面，天然存在的生长抑素由于血中半衰期为较短的2～3分钟，所以表现出生物利用度较小和作用的持续时间较短这两个不理想的性质，因此使作为治疗剂的使用或应用受限。基于该理由，为找出在效力、活体稳定性、作用的持续时间、或考虑生长激素、胰岛素或胰高血糖素的释放抑制的选择性中任一方面均优异的生长抑素类似物，业界不断开发出各种生长抑素类似物。作为可在临床上利用的最先得到承认的生长抑素类似物，报道有奥曲肽(Octreotide)(专利文献1和专利文献2)，已知该奥曲肽对生长抑素受体SSTR2、SSTR3、和SSTR5具有亲和性。奥曲肽是开发为由8个氨基酸构成的环状肽，该奥曲肽具有作为显示生长抑素的生物活性的重要部分的4个氨基酸(Phe-Trp-Lys-Thr)的序列，在该序列的两末端具有形成双硫(S-S)键的Cys，和进一步在其两末端的Cys的外侧具有D-Phe与Thr(ol)。该奥曲肽可通过利用其氨基酸序列使血中半衰期提高，而获得作用的持续性，此外，与生长抑素相比，对生长激素(GH)的选择性较高，这使得其具有强效的作用。包括这种奥曲肽在内的生长抑素类似物可用于患有激素分泌性及激素依赖性肿瘤的患者的治疗。目前已利用奥曲肽治疗与作为神经内分泌系统肿瘤的转移性类癌肿瘤相关的症状(潮红、腹泻、心脏瓣膜疾病和腹痛)和与血管活性肠肽(VIP)分泌腺瘤相关的症状(水性腹泻)。例如，在类癌和VIP产生性肿瘤中，奥曲肽抑制其活性因子的分泌和作用。因此，在以大量分泌性腹泻为特征的VIP产生性肿瘤中，生长抑素类似物可以通过抑制VIP分泌，以及通过直接影响肠道分泌，而使其腹泻减轻。然而，另一方面，有报道指出许多神经内分泌肿瘤对诸如奥曲肽等生长抑素类似物具有耐性(非专利文献3)。此外，还有报告指出将奥曲肽用于肢端肥大症的治疗，但对于约三分之一的肢端肥大症患者并无效果。进一步，有报告指出对于大半的类癌肿瘤患者，奥曲肽仅在施用初期发挥效果，若时间延长，则会引起急速减敏(tachyphylaxis)(速增耐性、急速免疫)。进一步，有报道指出对于抑制初期的库欣氏病(Cushing'sdisease)患者产生促肾上腺皮质激素(ACTH)，奥曲肽并未显示出任何效果。由于如上所述的问题，对于表达多种生长抑素受体的肿瘤，期望开发出可以如天然的生长抑素那样以较高的亲和性与多种受体亚型结合的生长抑素类似物，且有提示指出这种对生长抑素受体具有亲和性的生长抑素类似物有可能对用之前的生长抑素类似物无治疗效果的患者或具有耐性的患者也具有效果(非专利文献4)。因此，期望开发出具有与天然存在的生长抑素类似的结构、同样地对生长抑素受体具有亲和性、且与生长抑素相比具有延长的血中半衰期的生长抑素类似物。另一方面，已明确糖链在活体内担负的各种作用，为使血中的半衰期延长，还提出有对奥曲肽附加糖链的方法(例如，专利文献3)。然而，由于其结构的复杂性和多样性使得研究进展缓慢，糖链的种类或附加糖链的位置不能说已达到最适合。尚未报道有克服了之前的生长抑素类似物的问题的附加糖链的多肽。[现有技术文献][专利文献][专利文献1]美国专利第4,310,518号[专利文献2]美国专利第4,235,886号[专利文献3]日本专利特开平03-014599号[非专利文献][非专利文献1]CurrrentOpinioninPharmacology,2004,Vol.4,pp.608-613[非专利文献2]J.Med.Chem.2003,Vol.46,pp.5587-5596[非专利文献3]MolEndocrinol,2010,Vol.24(1),pp.240-249[非专利文献4]MolecularandCellularEndocrinology,Vol.286,2008,pp.69-74
技术实现思路
[专利技术所要解决的问题]本专利技术的目的在于提供一种附加糖链的多肽，所述附加糖链的多肽对生长抑素受体具有亲和性，且与生长抑素相比血中稳定性提高。[解决问题的技术手段]本专利技术的专利技术人等为解决上述问题而反复进行研究，结果发现了可以维持对生长抑素受体的亲和性，且血中稳定性提高的附加糖链的多肽。即，本专利技术涉及附加糖链的多肽，其特征在于，其是在选自由以下的(A)～(F)所组成的组中多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽：(A)由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14；(B)在由以序列编号1表示的氨基酸序列的构成的SRIF14中，1个或多个氨基酸缺失、经置换或附加的多肽；(C)SRIF14的类似物；(D)相对于包含以序列编号1表示的氨基酸序列的SRIF14，具有80％以上的同源性的多肽；(E)在(A)～(D)中，在N末端侧进一步含有N个(其中，N为1以上20以下的整数)氨基酸的多肽；和(F)在(A)～(D)中，在C末端侧进一步含有M个(其中，M为1以上6以下的整数)氨基酸的多肽；且对生长抑素受体具有亲和性。此处，在本专利技术的附加糖链的多肽的一个实施方案中，特征在于：所述经附加糖链的氨基酸置换的氨基酸为相当于SRIF14中的第19位的氨基酸。此外，在本专利技术的附加糖链的多肽的一个实施方案中，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
附加糖链的多肽，其特征在于，其是在选自由以下的(A)～(F)所组成的组中的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽：(A)由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14；(B)在由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14中，1个或多个氨基酸缺失、经置换或附加的多肽；(C)SRIF14的类似物；(D)相对于由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14，具有80％以上的同源性的多肽；(E)在(A)～(D)中，在N末端侧进一步含有N个(其中，N为1以上20以下的整数)氨基酸的多肽；和(F)在(A)～(D)中，在C末端侧进一步含有M个(其中，M为1以上6以下的整数)氨基酸的多肽；且对生长抑素受体具有亲和性。

【技术特征摘要】
2011.09.04 JP 2011-1922021.附加糖链的多肽，其特征在于，其是在选自由以下的(A)～(F)所组成的组中的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽：(A)由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14；(B)在由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14中，1个或多个氨基酸缺失、经置换或附加的多肽；(C)SRIF14的类似物；(D)相对于由以序列编号1表示的氨基酸序列构成的SRIF14，具有80％以上的同源性的多肽；(E)在(A)～(D)中，在N末端侧进一步含有N个(其中，N为1以上20以下的整数)氨基酸的多肽；和(F)在(A)～(D)中，在C末端侧进一步含有M个(其中，M为1以上6以下的整数)氨基酸的多肽；且对生长抑素受体具有亲和性。2.如权利要求1所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述经附加糖链的氨基酸置换的氨基酸为相当于SRIF14中的第19位的氨基酸。3.如权利要求1所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述附加糖链的多肽是在所述(E)的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽，其中，所述经附加糖链的氨基酸置换的至少1个氨基酸存在于所述(E)的多肽的N末端侧的所述N个氨基酸的任一个。4.如权利要求1所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述附加糖链的多肽是在所述(F)的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽，其中，所述经附加糖链的氨基酸置换的至少1个氨基酸存在于所述(F)的多肽的C末端侧的所述M个氨基酸的任一个。5.如权利要求1所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述附加糖链的多肽是在所述(E)的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽，进一步，附加在N末端侧的所述N个氨基酸的序列以X-Y-表示，其中，X表示L个(其中，L为1以上6以下的整数)任意的氨基酸的序列，且，Y为选自由以下的(1)～(15)所组成的组中的序列：(1)Lys、(2)Arg-Lys、(3)Glu-Arg-Lys、(4)Arg-Glu-Arg-Lys、(5)Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(6)Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(7)Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(8)Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(9)Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(10)Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(11)Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(12)Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(13)Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、(14)Ser-Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys、和(15)在上述序列(2)～(14)中，1个或多个氨基酸缺失、经置换或附加的序列。6.如权利要求5所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述经附加糖链的氨基酸置换的至少1个氨基酸存在于代表表示附加在所述(E)的多肽的N末端侧的所述N个氨基酸的序列的X-Y-中的X的L个氨基酸的任一个。7.如权利要求3所述的附加糖链的多肽，其特征在于，附加在N末端侧的所述N个氨基酸经由连接子而连接至所述N末端侧。8.附加糖链的多肽，其特征在于，其是在选自由以下的(A)～(F)所组成的组中的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽：(A)由以序列编号2表示的氨基酸序列构成的SRIF28；(B)在由以序列编号2表示的氨基酸序列构成的SRIF28中，1个或多个氨基酸缺失、经置换或附加的多肽；(C)SRIF28的类似物；(D)相对于由以序列编号2表示的氨基酸序列构成的SRIF28，具有80％以上的同源性的多肽；(E)在(A)～(D)中，在N末端侧进一步含有J个(其中，J为1以上6以下的整数)氨基酸的多肽；和(F)在(A)～(D)中，在C末端侧进一步含有K个(其中，K为1以上6以下的整数)氨基酸的多肽；且对生长抑素受体具有亲和性。9.如权利要求8所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述经附加糖链的氨基酸置换的氨基酸为选自由下述氨基酸所组成的组中的至少1个氨基酸：相当于SRIF28中的第1位的氨基酸、相当于SRIF28中的第5位的氨基酸、相当于SRIF28中的第9位的氨基酸、相当于SRIF28中的第12位的氨基酸、相当于SRIF28中的第13位的氨基酸、相当于SRIF28中的第14位的氨基酸、和相当于SRIF28中的第19位的氨基酸。10.如权利要求8所述的附加糖链的多肽，其特征在于，所述附加糖链的多肽是在所述(E)的多肽中，至少1个氨基酸经附加糖链的氨基酸置换的附加糖链的多肽，其中，所述经附加糖链的氨基酸置换的至少1个...

【专利技术属性】
技术研发人员：落合洋文，下田泰治，深江一博，前田政敏，石井一之，吉田健太，手塚克成，田鹤圭亮，
申请(专利权)人：株式会社糖锁工学研究所，
类型：发明
国别省市：日本,JP