一种捕蝇草组织培养育苗方法技术

本发明专利技术公开了一种捕蝇草组织培养育苗方法，包括以下步骤：（1）培养基制备、（2）外植体制备、（3）诱导培养、（4）生根培养以及（5）套袋驯化。本发明专利技术解决了传统播种繁殖、叶插繁殖成功率极低、繁殖效率缓慢等问题，运用采用本发明专利技术所述的方法进行捕蝇草组织培养育苗，培养基繁殖系数达到4~5，繁殖一批仅需4~6个月的时间，具有繁殖系数高、繁殖速度快的特点，而且繁育出来的种苗具有与母体相同的植物特征，抗性好。大大解决了捕蝇草繁殖困难的问题，有利于捕蝇草进行规模化、工厂化生产。

A tissue culture seedling method

The invention discloses a flytrap tissue culture method, which comprises the following steps: (1) preparation of the culture medium, explant preparation, (2) (3) (4), induction of rooting and acclimation of bagging (5). The invention solves the traditional seed propagation, cutting propagation problems leaves is very low, the breeding efficiency of slow success rate, using the method of the invention of the seedling culture medium flytrap organization, the propagation coefficient reached 4~5, breeding a number of only 4~6 months, has the characteristics of high propagation coefficient, propagation speed but, it has the characteristics of plant breeding seedling and the same parent, good resistance. It has solved the difficult problem of propagation of the Venus flytrap, for Venus flytrap for large-scale, industrialized production.

【技术实现步骤摘要】
一种捕蝇草组织培养育苗方法
本专利技术涉及植物组织培养育苗
，具体涉及一种捕蝇草组织培养育苗方法。
技术介绍
捕蝇草（Dionaeamuscipula），英文名称为VenusFlytrap，是原产于北美洲的一种多年生草本植物，是一种非常有趣的食虫植物。随着人们生活水平日益改善，越来越多的花友开始种植捕蝇草。然而，在原产地的捕蝇草在生存上却受到人类活动的威胁。人口快速增加因而剥夺捕蝇草的生存空间，而且因为人为干预、自然野火的发生，使得这些原产地开始长出一些小型灌木，遮蔽捕蝇草的阳光，造成一些捕蝇草品种的濒临灭绝。捕蝇草的繁殖方式主要是播种繁殖和叶插繁殖。采用播种繁殖存在的问题为：捕蝇草可以自花授粉，但通常得进行人工授粉才确实会结果，捕蝇草因雌雄蕊不会一起成熟，人工授粉较难成功，捕蝇草的种子不耐保存，且种子非常细小直径不到一毫米，不易保存，极易损坏。采用叶插繁殖存在的问题为：采用叶插繁殖新芽形成很慢，并且不同品种对温湿度，光照等要求不一样，叶插繁殖难以成功。采用传统播种繁殖、叶插繁殖，有着成功率极低，繁殖效率缓慢等缺点，难以满足捕蝇草市场需求。目前，关于捕蝇草的繁殖研究很少，国内进行工厂化生产捕蝇草的企业很少，还没有一种关于捕蝇草组织培养育苗的方法，因此在一定程度上制约了捕蝇草的工厂化生产。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：提供一种捕蝇草组织培养育苗方法，提高捕蝇草组培苗栽培的成活率，节约成本，为捕蝇草工厂化生产提供关键技术。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种捕蝇草组织培养育苗方法，包括以下步骤：（1）培养基制备：培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基，诱导增殖培养基为2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9；生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9；将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中，采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用；（2）外植体制备：在春夏季节，选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体，取新发出且鲜绿的芽头作为外植体，并进行消毒、清洗；（3）诱导培养：接种器具进行灭菌，双手消毒后，将步骤（2）中制备得到的外植体在超净工作台内，按无菌操作要求把外植体置于步骤（1）制备得到的诱导增殖培养基中，外植体伤口处接触到诱导增殖培养基，盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天，即可诱导培养出完整小植株；（4）生根培养：将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤（1）制备得到的生根培养基中进行生根培养2~3个月；（5）套袋驯化：将生根培养得到幼苗取出，用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中，用透光的袋子罩住整株植株，放置在散光通风处闷养20-30天后取走袋子即可。优选的，步骤（2）中外植体消毒、清洗步骤是：先用流水冲洗30min，之后用吸水纸吸干水份，然后于超净工作台上用75%的乙醇浸泡1~3min，期间不断摇晃外植体，再用无菌水冲洗3~5遍后用无菌镊子取出放置在浓度为0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min，期间不断摇晃外植体，再用无菌水冲洗5~8遍后用无菌镊子取出放置在无菌吸水纸上吸干水份，即可。优选的，步骤（3）中，进行诱导培养时，培养室温度控制在25℃，湿度40~50%，光照4500Lux每天10小时。优选的，步骤（4）中，生根培养的温度控制在25℃，光照5500Lux每天12小时。优选的，步骤（5）中，泥炭土与珍珠岩混合基质中泥炭土与珍珠岩的体积比为4:1。本专利技术的有益效果：采用上述方法后，本专利技术解决了传统播种繁殖、叶插繁殖成功率极低、繁殖效率缓慢等问题，运用本专利技术进行捕蝇草组织培养育苗，培养基繁殖系数达到4~5，繁殖一批仅需4~6个月的时间，具有繁殖系数高、繁殖速度快的特点，而且繁育出来的种苗具有与母体相同的植物特征，抗性好。大大解决了捕蝇草繁殖困难的问题，有利于捕蝇草进行规模化、工厂化生产。具体实施方式下面结合具体的实施例对专利技术进行进一步介绍：一种捕蝇草组织培养育苗方法，包括以下步骤：（1）培养基制备：培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基，诱导增殖培养基为2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9；生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9；将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中，采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用；（2）外植体制备：在春夏季节，选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体，取新发出且鲜绿的芽头作为外植体，并进行消毒、清洗；其中，外植体消毒、清洗步骤是：先用流水冲洗30min，之后用吸水纸吸干水份，然后于超净工作台上用75%的乙醇浸泡1~3min，期间不断摇晃外植体，再用无菌水冲洗3~5遍后用无菌镊子取出放置在浓度为0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min，期间不断摇晃外植体，再用无菌水冲洗5~8遍后用无菌镊子取出放置在无菌吸水纸上吸干水份，即可；（3）诱导培养：接种器具进行灭菌，双手消毒后，将步骤（2）中制备得到的外植体在超净工作台内，按无菌操作要求把外植体置于步骤（1）制备得到的诱导增殖培养基中，外植体伤口处接触到诱导增殖培养基，盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天，培养室温度控制在25℃，湿度40~50%，光照4500Lux每天10小时，即可诱导培养出完整小植株；（4）生根培养：将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤（1）制备得到的生根培养基中进行生根培养2~3个月，生根培养的温度控制在25℃，光照5500Lux每天12小时；（5）套袋驯化：将生根培养得到幼苗取出，用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中，泥炭土与珍珠岩的体积比为4:1，用透光的袋子罩住整株植株，放置在散光通风处闷养20-30天后取走袋子即可。以上内容是结合具体的优选实施方式对本专利技术所作的进一步详细说明，不能认定本专利技术的具体实施只局限于这些说明。对于本专利技术所属
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种捕蝇草组织培养育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）培养基制备：培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基，诱导增殖培养基为2/3MS+6‑BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9；生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9；将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中，采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用；（2）外植体制备：在春夏季节，选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体，取新发出且鲜绿的芽头作为外植体，并进行消毒、清洗；（3）诱导培养：接种器具进行灭菌，双手消毒后，将步骤（2）中制备得到的外植体在超净工作台内，按无菌操作要求把外植体置于步骤（1）制备得到的诱导增殖培养基中，外植体伤口处接触到诱导增殖培养基，盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天，即可诱导培养出完整小植株；（4）生根培养：将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤（1）制备得到的生根培养基中进行生根培养2~3个月；（5）套袋驯化：将生根培养得到幼苗取出，用1000倍多菌灵浸泡10min后流水冲洗后种植于泥炭土与珍珠岩混合基质中，用透光的袋子罩住整株植株，放置在散光通风处闷养20‑30天后取走袋子即可。...

【技术特征摘要】
1.一种捕蝇草组织培养育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）培养基制备：培养基包括诱导增殖培养基和生根培养基，诱导增殖培养基为2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+琼脂5g/L+ph5.9；生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+琼脂5g/L+ph5.9；将配制好的诱导增殖培养基和生根培养基分别以每瓶80ml装入培养瓶中，采用121℃、0.5MPa进行灭菌25min后冷却凝固备用；（2）外植体制备：在春夏季节，选用成熟健壮4年以上的捕蝇草作为外植体母体，取新发出且鲜绿的芽头作为外植体，并进行消毒、清洗；（3）诱导培养：接种器具进行灭菌，双手消毒后，将步骤（2）中制备得到的外植体在超净工作台内，按无菌操作要求把外植体置于步骤（1）制备得到的诱导增殖培养基中，外植体伤口处接触到诱导增殖培养基，盖好培养瓶盖后放置于消毒后的培养室内进行培养30天，即可诱导培养出完整小植株；（4）生根培养：将诱导培养得到的完整小植株在超净工作台内按无菌要求转接入步骤（1）制备得到的生根培养基中进行生根培养2~3个月；（5）套袋驯化：将生...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹强，周明辉，任广标，蔡凤相，刘芳，
申请(专利权)人：六盘水黔丰农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52