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一种动物细胞融合的方法技术

技术编号:9791387 阅读:143 留言:0更新日期:2014-03-21 01:59
本发明专利技术公开了一种动物细胞融合的方法,包括以下步骤:A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心;取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作;取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1-2份GKN溶液,摇匀;取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀;取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置1-2min,再将溶液摇匀后,静置1-2min。本发明专利技术采用化学试剂使得动物细胞融合,可以快速、简单的将动物细胞融合。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
,尤其涉及。
技术介绍
动物细胞融合也称细胞杂交(cell hybridization),是指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞(hybrid cell)。病毒诱导融合仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。这类病毒的被膜中含有融合蛋白,可以介导病毒同宿主细胞融合,也可以介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后,这些病毒即可诱导细胞发生融合。很多化学试剂都能诱导细胞融合,如聚乙二醇(PEG),二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂,磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列,在去除这些物质之后,细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复的过程中相接处的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力,细胞膜融合,胞质流通,发生融合。化学诱导方法,操作方便,诱导融合的概率比较高,效果稳定,适用于动、植物细胞,但对细胞具有一定的毒性。PEG是被广泛使用的化学融合剂。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供,可以快速、简单的将动物细胞融口 ο为实现上述目的,本专利技术采用以下技术方案: ,包括以下步骤: A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心; B取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作; C取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1-2份GKN溶液,摇匀; D取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀; E取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置l_2min,再将溶液摇匀后,静置l_2min。所述氯化钠溶液浓度为0.85%。所述离心是以1000-1200r/min的速度离心5分钟。本专利技术的有益效果:本专利技术采用化学试剂使得动物细胞融合,可以快速、简单的将动物细胞融合。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术,并不用于限定本专利技术。实施例1: ,其特征包括以下步骤: A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心; B取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作; C取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1份GKN溶液,摇匀; D取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀; E取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置lmin,再将溶液摇匀后,静置lmin。氯化钠溶液浓度为0.85%。离心是以1000r/min的速度离心5分钟。实施例2: ,其特征包括以下步骤: A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心; B取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作; C取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1.5份GKN溶液,摇匀; D取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀; E取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置1.5min,再将溶液摇匀后,静置1.5min。氯化钠溶液浓度为0.85%。离心是以1100r/min的速度离心5分钟。实施例3: ,其特征包括以下步骤: A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心; B取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作; C取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加2份GKN溶液,摇匀; D取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀; E取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置2min,再将溶液摇匀后,静置2min。氯化钠溶液浓度为0.85%。离心是以1200r/min的速度离心5分钟。上述虽然结合实施例对本专利技术的【具体实施方式】进行了描述,但并非对本专利技术保护范围的限制,所属领域技术人员应该明白,在本专利技术的技术方案的基础上,本领域技术人员不需要付出创造性的劳动即可做出的各种修改或变形仍在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动物细胞融合的方法,其特征包括以下步骤:A?取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心;B?取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作;C?取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1?2份GKN溶液,摇匀;D?取以上溶液1份,加入3份GKN溶液,再次摇匀;E?取以上溶液1份,加入0.5份PEG,先静置1?2min,再将溶液摇匀后,静置1?2min。

【技术特征摘要】
1.一种动物细胞融合的方法,其特征包括以下步骤: A取离心管,加入冷藏的鸡血1份,加入4份氯化钠溶液摇匀,离心; B取出离心管,弃掉上清液,再加入4份氯化钠溶液,重复以上操作; C取离心管,弃掉上清液后,按照红细胞沉积的体积,加1-2份GKN溶液,摇匀; D取以上溶液1份,加...

【专利技术属性】
技术研发人员:简玉君
申请(专利权)人:简玉君
类型:发明
国别省市:

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