一种罗非鱼亲子鉴定的方法技术

本发明专利技术公布了一种罗非鱼亲子鉴定的方法，包括以下步骤：（1）采集待鉴别的罗非鱼样品，提取基因组DNA；（2）用步骤（1）获得的基因组DNA为模板，选用9对微卫星引物进行PCR扩增；（3）对步骤（2）的PCR扩增产物进行电泳检测；（4）将电泳结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，进行聚类分析，根据个体聚类结果，进行亲子关系鉴定。本发明专利技术可以快速准确地对罗非鱼进行亲子鉴定，区分不同家系，在罗非鱼家系选育中有很大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公布了，包括以下步骤：（1）采集待鉴别的罗非鱼样品，提取基因组DNA；（2）用步骤（1）获得的基因组DNA为模板，选用9对微卫星引物进行PCR扩增；（3）对步骤（2）的PCR扩增产物进行电泳检测；（4）将电泳结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，进行聚类分析，根据个体聚类结果，进行亲子关系鉴定。本专利技术可以快速准确地对罗非鱼进行亲子鉴定，区分不同家系，在罗非鱼家系选育中有很大的应用价值。【专利说明】—种罗非鱼亲子鉴定的方法
本专利技术属于鱼类分子标记
，涉及。
技术介绍
罗非鱼(Tilapia)原产于非洲，该鱼上世纪50年代引入我国，得到了较快发展，现在我国已是世界上最大的罗非鱼生产国和出口国。目前，家系选育是广泛应用于水产育种中的一个方法。选一对亲本配组繁殖，得到的后代就是一个家系，用这种方法构建多个家系，再通过养殖对比试验，分析各家系的生长、性别比例、抗逆等性状。由于罗非鱼性腺发育不同步，一对一配组繁殖获得家系成功率较低，因此常用多尾亲本如I雄多雌或多雄I雌的方法来提高构建家系的成功率，这就需要对后代进行亲子鉴定来确定它们的父本和母本。另外，在养殖对比试验中，为减少环境的影响，常常将不同家系的鱼放在同一池塘中养殖，这样也需要进行亲子鉴定来区别不同的家系。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，有助于快速、准确对罗非鱼进行亲子鉴定和家系区分。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案:，包括以下步骤:(I)采集待鉴别的罗非鱼的血液、鳍条或其他组织样品，采用DNA提取法提取基因组 DNA ；(2)用步骤(1)获得的基因组DNA为模板，选用9个微卫星引物进行PCR扩增，这9对特异微卫星引物名称和序列列表如下；【权利要求】1.，其特征在于包括以下步骤: (1)采集待鉴别的罗非鱼样品的血样或鳍条，提取基因组DNA; (2)用步骤(1)获得的基因组DNA为模板，选用9个微卫星引物进行PCR扩增，这9对特异微卫星引物名称和序列列表如下:正向引物DNA序列~反向引物DNA序列~退火温 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于:所述步骤(2)中，在进行PCR扩增时，PCR反应总体积为10 μ L，其中含IOX反应缓冲液1.0μ L,Mg2+2mmol/L,dNTP200ymol/L,上下游引物各0.2 μ mol/L, Taq酶0.3U, DNA50ng~80ng,用灭菌双蒸懼水补足体积。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR反应条件为:94°C3min ；94°C 20s，退火 20s，72°C 20s, 25 ~30 个循环；72°C延伸 5min。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，使用的遗传分析软件为populations 软件和 MEGA3.1 软件。【文档编号】C12Q1/68GK103555847SQ201310549480【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月7日 优先权日:2013年11月7日 【专利技术者】李建林, 俞菊华, 唐永凯, 李红霞, 徐跑 申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种罗非鱼亲子鉴定的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）采集待鉴别的罗非鱼样品的血样或鳍条，提取基因组DNA；（2）用步骤（1）获得的基因组DNA为模板，选用9个微卫星引物进行PCR扩增，这9对特异微卫星引物名称和序列列表如下:（3）将步骤（2）获得的PCR扩增产物用8.0％的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳检测、银染法染色后，拍照；（4）将步骤（3）的电泳检测结果，进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，进行聚类分析，根据个体间的遗传距离聚类结果，进行亲子鉴定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李建林，俞菊华，唐永凯，李红霞，徐跑，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，
类型：发明
国别省市：