具有转录调控域和蛋白转导域的融合蛋白以及含有其的转录因子功能抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及融合蛋白，其具有蛋白转导域和转录因子的转录调控域，还涉及含有该融合蛋白的转录因子功能抑制剂。依据本发明专利技术的融合蛋白可被用于有效地治疗各种与转录因子有关的缺陷。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有转录调控域和蛋白转导域的融合蛋白以及含有其的转录因子功能抑制剂
本专利技术涉及一种具有蛋白转录因子转录调控域与蛋白转导域的融合蛋白，以及一种含有该物质的转录因子功能抑制剂。
技术介绍
转录因子是一种用于控制基因转录的组分，它可通过与DNA中特定序列的结合或与其他因子的结合而调节转录活性。如果这种结合或相互作用未正确进行，有可能引发与转录因子的失常或缺陷有关的各种疾病。在1998年，首次报导了蛋白转导域(ProteinTransductionDomain:PTD)的特性，即部分HIV-TAT蛋白质可有助于将生物反应调节剂输送到细胞内。迄今已发现约50种不同的蛋白转导域，且Tat、VP22、AntpHP4和Hph-1已时常用于基础和治疗研究。已证明，这些PTD可有效地将大于120kDa的蛋白质在短时间内输送到细胞内，且DNA/RNA或无法送达的化合物可通过蛋白转导域而被转导到细胞内。蛋白转导域是一种新颖的药物输送系统，用于促进生物反应调节剂跨越BBB(BloodBrainBarrier，血脑屏障)通过细胞内传递被输送到脑内，或通过诸如皮肤、鼻腔或眼部等局部给药途径被输送到体内。因此，基于如下事实，即转录因子通过其与DNA或其他蛋白质的相互作用而发挥作用，本专利技术人实现了生成含有部分转录因子和蛋白转导域的融合蛋白。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术旨在提供一种转录因子功能抑制剂，其中含有蛋白转导域与转录因子的转录调控域，以及提供一种用于治疗与转录因子的失常或缺陷有关的疾病的药物组合物，其中含有上述融合蛋白以及药学上可接受的赋形剂。此外，本专利技术旨在提供一种用于治疗与人体内转录因子的失常或缺陷有关的疾病的方法，包括给患者服用有效量的含有蛋白转导域与转录因子的转录调控域的融合蛋白。此外，本专利技术旨在提供一种含有蛋白转导域与转录因子的转录调控域的融合蛋白，编码该融合蛋白的核酸，含有该核酸的载体，以及包含该载体的宿主细胞。此外，本专利技术旨在提供一种用于生成融合蛋白的方法，包括在宿主细胞中表达载体的步骤，且该载体含有编码转录因子的转录调控域的基因以及编码蛋白转导域的基因。技术方案在本专利技术的一实施方式中，“转录调控域”(TMD，TranscriptionModulationDomain:interactome)是指转录因子的一部分，这部分转录因子参与到与在转录过程中起重要作用的分子或因子的功能性互动中，这些分子或因子例如，但不限于，DNA、RNA、转录共激活剂、转录抑制因子、增强子结合因子或配体，或这部分转录因子参与到二聚/多聚(dimerization/multimerization)过程或核定位(nuclearlocalization)中。在一实施方式中，本专利技术提供一种转录因子功能抑制剂，该抑制剂包括含有蛋白转导域和转录因子的转录调控域的融合蛋白。进一步地，实施方式中的转录因子从下列集合中选出：RORγt(Retinoicacid-relatedorphanreceptorgammat，维甲酸相关孤儿受体伽马t)、Tbet(T-box21，T-框21)、GATA-3(GATAbindingprotein3，GATA结合蛋白3)、FOXP3(ForkheadboxP3，叉头框P3)、RORα4(Retinoicacid-relatedorphanreceptoralpha4，维甲酸相关孤儿受体阿尔法4)、HIF-1/2α(Hypoxiainduciblefactor1/2α，缺氧诱导因子1/2α)、STAT(Signaltransducersandactivatorsoftranscription，信号转导物和转录激活物)、PPARγ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorgamma，过氧化物酶体增殖物激活受体γ)、p53、AP-1、NFκB(nuclearfactorkappa-B，核因子卡帕-B)、NKx2.5(NK2transcriptionfactorrelated,locus5，NK2转录因子相关，位点5)、FOXO(ForkheadboxO，叉头框O)、RELA(v-relreticuloendotheliosisviraloncogenehomologA，v-rel禽网状内皮组织增殖病毒致癌基因同源物A)和Runx(runt-relatedtranscriptionfactor，侏儒相关转录因子)。进一步地，实施方式中的转录因子从下列集合中选出：RORγt(Retinoicacid-relatedorphanreceptorgammat)、Tbet(T-box21)、GATA-3(GATAbindingprotein3)和FOXP3(ForkheadboxP3)。进一步地，实施方式中的蛋白转导域从下列集合中选出：HP4、Hph-1、Mph-1、Sim-2、Tat、VP22、Antp(Antennapedia，控制触角的基因)、Pep-1(peptide，缩氨酸)、PTD-5、R9(arginine，精氨酸)、7R和CTP(Cytoplasmictransductionpeptide，细胞质转导肽)。实施方式中的蛋白转导域可具有序列编号为1的氨基酸序列。实施方式中的转录因子的转录调控域可以是DNA结合结构域或蛋白质相互作用结构域。转录因子的转录调控域包括从下列集合中选出的一或多种：螺旋-转折-螺旋(Helix-turn-helix)结构域、锌指(Zincfinger)结构域、亮氨酸拉链(Leucinezipper)结构域、翼状螺旋(Wingedhelix)结构域、翼状螺旋环螺旋(Wingedhelixturnhelix)结构域、螺旋-环-螺旋(Helix-loop-helix)结构域、HMG-框(HMG-box)结构域和叉头(forkhead)结构域。转录因子的转录调控域包括从下列集合中选出的一或多种：与DNA相互作用的域、RNA、转录共激活因子、转录抑制因子、增强子结合因子和配体、参与到二聚/多聚(dimerization/multimerization)过程中的域以及参与到核定位(nuclearlocalization)中的域。实施方式中的转录因子的转录调控域可具有序列编号为2至6的序列。实施方式中的融合蛋白可具有序列编号为7至11的序列。在一实施方式中，本专利技术提供一种含有蛋白转导域与转录因子的转录调控域的融合蛋白。进一步地，实施方式中的转录因子从下列集合中选出：RORγt(Retinoicacid-relatedorphanreceptorgammat)、Tbet(T-box21)、GATA-3(GATAbindingprotein3)、FOXP3(ForkheadboxP3)、RORα4(Retinoicacid-relatedorphanreceptoralpha4)、HIF-1/2α(Hypoxiainduciblefactor1/2α)、STAT(Signaltransducersandactivatorsoftranscription)、PPARγ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorgamma)、p53、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.08.20 KR 10-2010-0080864;2010.12.10 KR 10-2011.一种转录因子功能抑制剂，其特征在于，包括融合蛋白，所述融合蛋白包括RORγt（Retinoicacid-relatedorphanreceptorgammat）的转录调控域和蛋白转导域，其中RORγt的转录调控域由如序列编号2所示的氨基酸组成，且所述蛋白转导域由如序列编号1所示的氨基酸组成，其中所述RORγt的转录调控域包括DNA结合结构域和蛋白质相互作用结构域。2.一种转录因子功能抑制剂，其特征在于，包括融合蛋白，所述融合蛋白包括FOXP3（ForkheadboxP3）的转录调控域和蛋白转导域，其中所述融合蛋白由如序列编号10所示的氨基酸序列组成，其中所述FOXP3的转录调控域包括DNA结合结构域和蛋白质相互作用结构域。3.一种转录因子功能抑制剂，其特征在于，包括融合蛋白，所述融合蛋白包括GATA-3（GATAbindingprotein3）的转录调控域和蛋白转导域，其中所述融合蛋白由如序列编号8所示的氨基酸序列组成，其中所述GATA-3的转录调控域包括DNA结合结构域和蛋白质相互作用结构域。4.一种转录因子功能抑制剂，其特征在于，包括融合蛋白，所述融合蛋白包括Tbet（T-box21）的转录调控域和蛋白转导域，其中所述融合蛋白由如序列编号9所示的氨基酸序列组成，其中所述Tbet的转录调控域包括DNA结合结构域和蛋白质相互作用结构域。5.一种融合蛋白，其特征在于，包括RORγt（Retinoicacid-relatedorphanreceptorgammat）的转录调控域和蛋白转导域，其中RORγt的转录调控域由如序列编号2所示的氨基酸组成，且所述蛋白转导域由如序列编号1所示的氨基酸组成，其中RORγt的转录调控域包括DNA结合结构域和蛋白质相...

【专利技术属性】
技术研发人员：李尚揆，朴兑錀，成睿庆，赵真映，朴钟铉，梁常和，
申请(专利权)人：李尚揆，
类型：
国别省市：