【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种低假阳性率的蛋白质相互作用检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1)?将荧光蛋白在特定位点切割成两个蛋白序列片段,荧光蛋白的N端和C端分别命名为FPN和FPC;2)将待测目标蛋白A的DNA序列与FPN基因序列同时插入到双表达载体中的一个启动子的下游,另一个待测蛋白B和与FPC基因序列同时插入双表达载体中的另一个启动子下游,从而构建了基于双表达载体的双分子荧光互补系统;3)将同时含有待测目标蛋白A和B的双分子荧光互补系统转染细胞,培养16~24小时以后,使用荧光显微镜观察光源刺激前后是否存在荧光;如果两目标蛋白存在相互作用,则荧光蛋白的N端和C端靠近,从而自发重组为完整荧光蛋白,产生荧光信号;如果没有或者只有极其微弱荧光,证明两目标蛋白之间无相互作用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:骆清铭,张智红,李向勇,潘少涛,
申请(专利权)人:华中科技大学,
类型:发明
国别省市:
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