通过端粒酶筛选抗癌中药的方法技术

技术编号:8903575 阅读:248 留言:0更新日期:2013-07-11 00:41
本发明专利技术涉及中药筛选方法,特别涉及一种通过端粒长度筛选抗衰老中药的方法;人胚肺二倍体成纤维细胞,在叔丁基过氧化氢的作用下加速其衰老,制作衰老细胞模型;在造模后,使用各种选取的中药浓缩复合物对细胞进行处理;处理结束后,提取细胞基因组DNA,检测其端粒长度,根据结果判断是否热性药物即具有抗衰老活性。???

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及筛选药物的方法,特别涉及。
技术介绍
端粒是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段DNA-蛋白质复合体,它与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽子”结构,能够维持染色体的完整。端粒DNA是由简单的DNA高度重复序列组成的,染色体末端沿着5’到3’方向的DNA链富含鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)两种核苷酸。在酵母和人中,端粒序列分别为Cl - 3A/TG1 一 3和TTAGGG/CCCTAA,并有许多蛋白与端粒DNA结合。端粒DNA主要功能有:第一,保护染色体不被核酸酶降解;第二,防止染色体相互融合;第三,为端粒酶提供底物,解决DNA复制的末端隐缩,保证染色体的完全复制。端粒、着丝粒和复制原点是染色体保持完整和稳定的三大要素。同时,端粒又是基因调控的特殊位点,常可抑制位于端粒附近基因的转录活性(称为端粒的位置效应,TPE)。在大多真核生物中,端粒的延长是由端粒酶催化的,另外,重组机制也介导端粒的延长。端粒酶与恶性肿瘤的关系非常密切。研究发现,在人类许多正常体细胞中检测不到端粒酶活性,而几乎所有的人类恶性肿瘤细胞中的端粒酶均呈现活性。代表性的研究是,Kim等利用高度敏感的TRAP本文档来自技高网...

【技术保护点】
通过端粒酶筛选抗癌中药的方法,其特征在于按如下步骤实施A、选取端粒酶阳性细胞:?HeLa细胞,乳腺癌MCF?7细胞,?白血病细胞U937,白血病细胞HL60,淋巴瘤细胞CA46;B、含10%小牛血清的1640培养基培养肿瘤细胞,细胞于37℃、5%?CO2培养箱中培养,待长满90%以上时,弃去瓶中原有的培养基,用PBS清洗两次,弃去,加入2ml?0.25%胰蛋白酶溶液于37℃培养箱中消化3min,转入刻度离心管中1000rpm离心3min,再加入2ml新鲜完全培养基重悬后,Cell?Counter计数;C、?将重悬后的细胞稀释至5×103cell/ml,每孔加100ul接种96孔细胞培养板,次日...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:叶亚东路易斯伊格纳罗张娟全利郝小江朱兆云滕凌朱文华胡娟肖慧潘鹂张俊杨紫俊
申请(专利权)人:常州亚当生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1