侦测致死系统的方法技术方案

本发明专利技术提供一种利用标志细胞内核因子A(NFA)的表达侦测病患是否存在致死系统的方法。另一方面，本发明专利技术提供一种方法用以预测是否具有转移的潜能以及是否处在发展转移的风险中，且该方法用于侦测病患的预后。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术有助于确认及侦测癌症微转移；及预测不同类型的癌症病患(不论癌症的病因起源)预后的方法、套组以及其用途。本专利技术进一步提供一种方法与套组帮助预测病患是否具有转移潜能的疾病以及是否罹患全身性转移的风险。
技术介绍
大部分的死亡源自癌症，此是由于转移性病灶所致。然而，在过去50年来，因癌症研究而产生近200万篇论文后，我们尚未了解癌细胞转移是何时以及如何发生。目前可以确定的是:转移是癌细胞与其微环境间发展过程的最终产物；且全身性癌症的发展可能是由于原发性肿瘤的平行发展，和源自早期有传播性的上皮细胞与间质样肿瘤细胞(MTC)/间质样肿瘤干细胞(MTSC)所产生的转移，而上述有传播性的上皮细胞与间质样肿瘤细胞(MTC)/间质样肿瘤干细胞(MTSC)则是经由肿瘤细胞与基质细胞两者所产生的复合诱导物，将上皮-间质转换(EMT)稳定改编而产生的。然而，作为主要协调者以调节此复合网络的关键信号分子至今仍然尚未被证实。此外，学界普遍认为光依赖细胞培养与动物实验可能无法为全身性临床肿瘤学的研究上提供精确的模型。虽然自肿瘤移植实验可得到独具价值的结果，但是在扼要的解读、诠释此一整体性结果的数据上，则需要被强调且慎重执行，且这些结论须以癌症病患中的自发性肿瘤模式进行验证。例如，一些动物模式，譬如源自于发展肿瘤或转移的细胞株的异种移植，且这种针对人类癌症，特别是与旁分泌、自分泌及内分泌复合网络模式有关的保真度是备受质疑的。这也许可以解释为何在产生近两百万篇癌症论文后，我们尚未了解转移是何时以及如何发生，而得知此基本机制在癌症死亡率上具有相当大的影响。这也解释为何历经过去50年的全面性癌症研究，以目前的治疗方式往往无法治愈癌症病患。得自于实验室细胞培养与动物实验的关键结果，肯定必须以人类临床样本与癌症病患的肿瘤进行验证。相较于单一癌症细胞疾病的领域，结合分子、细胞及全身临床肿瘤学的领域，使我们对于癌症的了解更加深入。此外，癌症是涉及在一般典型的癌细胞、宿主基质及骨髓细胞(BMC)相互之间的协同进化作用，并伴随着充作媒介的趋化因子与细胞因子网络，此网络是关于一多向性的信号网络机制。因此除了同时针对癌细胞组成物之外，还更需要针对癌症相关的基质以及涉及转移前微环境形成、异常骨髓(BM)微环境形成及原发性内分泌煽动的全身散播的骨髓细胞(BMC)，如此应该可改善大部份癌症病患的治疗、整体存活及最重要的生活质量。然而，在癌症发展期间，关于肿瘤-EMT-基质协同进化信号的恶性循环，与在细胞与全身临床肿瘤学上的最具潜力的分子信号标的仍有待证实。最初，核因子A(NF A)是经确定为一种ATP Mg-依赖蛋白磷酸酶的特定细胞膜与细胞质的活化因子A，但后来被称为一种多受质/多功能的脯氨酸导引蛋白激酶(PDPK)。由于在激酶结构域上的序列同源性极高，NFA因此被视为GSK3的亚型(肝醣合成酶激酶3)，且更名为GSK-3 α。虽然GSK3/GSK-3 β与NFA/GSK-3 α两者在激酶结构域上结构相似且长期以来多被视为两种密切相关的信号分子，然而当根据本专利技术中所证实的人类临床研究时，这些信号分子的功能并非等同于先前在果蝇与啮齿动物中的研究。此外，深入的研究及大多数的注意力都集中在GSK-3 β上，却以GSK-3之名称之，并未在许多领域的研究上对此GSK-3有进一步详尽的说明，且抑制此种激酶可能会导致肿瘤形成，所以如何治疗糖尿病而不引发癌症，便成为一个重要的课题。因此，NFA的独特角色已被忽略超过十年。为避免不必要的混淆，NFA —词将用以充分说明这个新的多受质/多功能激酶举足轻重的重要角色，以供更全面、完善的癌症控制的应用。无论癌症的病因为何，如果在细胞内单一独特分子的表现及病患的疾病状态之间存在着可被预测的关系，那将会大受激赏。然而关于一种利用细胞内分子的表现情形，以评估、判断病患罹患不可治愈疾病的风险的方法目前并无成功的先例。
技术实现思路
相较于单一癌症细胞疾病的领域，结合分子、细胞及全身临床肿瘤学的领域，使我们对于癌症的了解更加深入。此外，癌症是涉及在一般典型的癌细胞、宿主基质及骨髓细胞(bone marrow cell,BMC)相互之间的协同进化作用，并伴随着充作媒介的趋化因子与细胞因子网络，此网络是关于一多向性的信号网络机制。因此除了同时针对癌细胞组成物之外，还更需要针对癌症相关的基质以及涉及转移前微环境形成、异常骨髓(BM)微环境形成及原发性内分泌煽动的全身散播的骨髓细胞(BMC)，如此应该可改善大部份癌症病患的治疗、整体存活及最重要的生活质量。相对于I3DPK Fa/GSK-3 α (主要与主流癌症研究相关)与主要着重于如上述主流癌细胞的先前成果，本专利技术是关于一种通过一般典型的癌细胞、宿主基质及骨髓细胞(BMC)间的趋化因子与细胞素的网络，以检视TOPK在该前述几种细胞相互之间的作用与协同进化作用所扮演的角色。利用此新的方法，证实roPK Fa/GSK-3 α在寄生基质与骨髓细胞(BMC)中的异常表现，在测定转移潜能上，扮演着决定性与指标性的角色。癌症病患若在一般典型的癌细胞、寄生基质及骨髓细胞(BMC)之中，发现I3DPK Fa/GSK-3 α在相互作用与协同进化作用上有异常表现，则倾向于发展转移性疾病。因此，在一般典型的癌细胞、寄生基质及骨髓细胞(BMC)间的相互作用与协同进化作用的情况下，若带有I3DPKFa/GSK-3 α的异常表达，则在本专利技术中统称为“致死系统”。本文所提供的致死系统为有助于检测转移的普遍适用的预测因子，无论癌症病因起源为何，有助于监测不同类型癌症病患中的疾病状态与治疗反应及其用途。更值得一提的是，该致死系统为一种可靠的预测因子，无论病因起源为何，可用于检测是否病患具有转移及处于发展转移的风险。因此，一方面，本专利技术提供的是一种检测方法，用来检测细胞表现型态的存在，较佳的是关于可用以指出病患是否具有致死系统的标志细胞，该方法包括取得病患的生物性样本；在生物样本中，测定标志细胞中的NFA的表达，其中在该病患标志细胞中的NFA的表达是指出致死系统的存在，其中该标志细胞为间质肿瘤细胞(MTC)。在一些实施例中，NFA的表达是通过分析NFA蛋白质含量而决定，例如使用对NFA专一抗体的免疫分析法。在其它方面，该表达可 通过评估其活性、蛋白质、mRNA或DNA含量进行测定。生物性样本可为骨髓、脐带血、周边血液、组织样本、腹水、胸膜积水或体液。另一方面，生物性样本中的致死系统的辨识可用于预测癌症病患的预后，且预测是否病患具有转移潜能及处于发展转移的风险。另一方面，本专利技术所提供的是一种用以测定生物样本中致死系统的存在的诊断套组，该诊断套组至少包括用来测定该样本中NFA表现的试剂，以及用来评估致死系统的存在，共同包装于容器内的印刷操作说明。亦可包括其它检测试剂。再者，另一方面，本专利技术所提供的是一种预测方法，该方法用于预测癌症病患的预后，且预测病患是否具有转移潜能及是否处于发展转移的风险中。该方法包括取得病患的生物性样本；测定该样本中的NFA的表达，其中NFA的表达是用以预测该病患是否正处于发展转移的风险之中。在一些实施例中，NFA的表达是通过分析NFA蛋白质含量而决定，例如使用对NFA专一抗体的免疫分析法。在其它方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.07.22 US 61/366,679;2011.07.19 US 13/186,1001.一种“致死系统”的侦测方法，包括: 取得病患的生物性样本； 测定所述生物性样本中的标志细胞；及 测定所述标志细胞中NFA分子的表达； 其中，当所述生物性样本所包含的标志细胞中测定出具有NFA分子的表达，则表示病患具有“致死系统”。2.如权利要求1所述的方法，其中所述标志细胞选自骨髓细胞、癌症相关纤维母细胞、循环肿瘤细胞、循环肿瘤干细胞、上皮肿瘤细胞、上皮肿瘤干细胞、癌症干细胞、肿瘤繁殖细胞、造血干/源祖细胞、间质干细胞、间质肿瘤细胞、间质肿瘤干细胞、肿瘤伴生巨噬细胞或骨髓细胞中的一种或多种。3.如权利要求1所述的方法，其中所述标志细胞为间质肿瘤细胞。4.如权利要求1所述的方法，其中所述生物性样本选自骨髓、脐带血、周边血液、组织样本、腹水、胸膜积水或体液中的一种或多种。5.如权利要求1所述的方法，其中所述NFA的表达是通过评估NFA蛋白质mRNA、DNA或活性含量。6.一种预测癌症病患预后状态的方法，包括: 取得癌症病患的生物性样本； 测定在所述生物性样本中的标志细胞；及 测定在所述标志细胞中NFA分子的表达； 通过测定所述生物性样本中的标志细胞的NFA分子的表达，以判断所述癌症病患具有预后不佳的状态。7.如权利要求6...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨孝德，
申请(专利权)人：杨孝德，
类型：
国别省市：