链霉菌及其在防治十字花科根肿病中的应用制造技术

技术编号:8858739 阅读:205 留言:0更新日期:2013-06-27 02:15
本发明专利技术公开了一种链霉菌及其在防治十字花科根肿病中的应用,该链霉菌菌种包括疮痂链霉菌(Streptomyces?scabiei)WS-24926?CCTCC?NO:M?2012393和/或尖孢链霉菌(Streptomyces?cuspidosporus)WS-29246?CCTCC?NO:M?2012413。所述链霉菌经过发酵后产生具有强烈抑菌作用的发酵菌液,该发酵菌液可用于制备抗植物十字花科根肿病的生防悬浮剂和生防缓释胶囊剂,用于十字花科根肿病的生物防治。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物农药
,具体是指一种链霉菌及其在防治十字花科根肿病中的应用
技术介绍
十字花科根肿病(plasmodiophoa brassicae Woron)是一种世界性土传病害,致病菌为芸苔根肿菌,属于一种专性寄生低等鞭毛菌(也有学者将其归入粘菌),目前尚无法人工培养。主要危害十字花科蔬菜如:大白菜、甘蓝、萝卜等。其病菌以孢子囊在土壤或未腐熟的厩肥中越冬越夏,对不良环境抵抗力强,一般能存活十年以上。田间最初侵染源来自土壤和未腐熟的厩肥带菌。病菌又可随菜苗、泥土携带传播到无病区。病菌从菜苗的幼根或根毛侵入,并刺激根部细胞加速分裂,造成根部畸形肿大,导致植株输导组织受阻,地上部生长缓慢,叶片萎蔫,重者根部腐烂,植株死亡。近年,根肿病在湖北、云南、四川、贵州、浙江、福建等地高山十字花科蔬菜种植区发生严重,已成为制约我国高山大白菜、甘蓝、萝卜反季节生产的主要因素之一,其中尤以大白菜、甘蓝受害最重,严重地块甚至绝收,每亩损失3000元以上。目前,防治十字花科根肿病常用方法主要包括撒石灰调节土壤pH、轮作、种植抗病品种等,但由于存在土壤板结、经济效益差、不耐储运等缺点,上述措施均未大面积推广。常规杀菌剂有多菌灵、福美双、代森锰锌等,但防效均不明显,防效表现较好的是日本石原株式会社的50%氟啶胺SC与10%氰霜唑SC组合,但由于抑制种子萌发及使用成本高昂(每亩近400元)等原因,也尚未得到大面积推广应用。关于十字花科根肿病生物农药在真菌、放线菌、芽孢杆菌等方面均有一定的研究报道,并且取得了一定的成绩,如日本研究者将大白菜播种在从麦田、油菜田、白菜地及草地采回的土壤中,从大白菜根中分离得到大量内生真菌,通过盆栽试验筛选获得2株内生真菌(Heteroconium chaetospira)H4007,M4006,病指分别为23,15, 显著高于其他属种处理及空白对照,通过种子处理显示有促生作用;有研究者利用(Phoma glomerata) JCM 9972有效控制根肿病的发生;也有国外研究者通过温室和田间试验得到可抑制根肿病菌的3个木霉菌株(TC32,TC45和TC63)和I个链霉菌菌株(S99);韩国研究人员从大白菜根部分离获得81株内生放线菌,通过大白菜根肿病盆栽试验,获得3株具有开发潜力的内生放线菌,其中2株(Microbispora rosea)和(subsp.rosea)防效分别为 58% 和 33%, I 株(Streptomyces olivochromogenes)防效达 42% ;我国四川农大研究人员从四川根际土中分离出I株灰红链霉菌(Streptomyces griseoruber),其对大白菜根肿病盆栽实验防效达到73.69%;何月秋等研究人员从大白菜根际土壤中分离到I株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)XF-l,其对根肿病的室内防效达85%,田间防效达68.6^84.8% ;长江大学将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)与固氮类芽孢杆菌(Paenibacillus azotofixans)用于根肿病综合防治,防效达到85%。链霉菌具有抗生作用,还具有可田间定殖等作为生物农药予以开发的优点。美国环境保护署美国环保局2012年公布了 I项疮痂链霉菌(Streptomyces acidiscabies)RL-1lO用于除草的生物农药研究计划。全球已登记在册的链霉菌农药共有6种,登记国家和地区分别为韩国、欧盟、乌克兰、加拿大、美国,具体为(Streptomyces colombiensis)(韩国)、(Streptomyces kasugaensis)(韩国)、(Streptomyces griseoviridis)K61 (欧盟、力口拿大、美国)、(Streptomyces albus)(乌克兰)、(Streptomyces avermitilis)(乌克兰)、(Streptomyces lydicus) WYEC 108 (加拿大、美国),防治对象主要为真菌病害包括叶部病害与土传性病害(其中S.avermitilis用于防治甲虫与叶螨)。但截至目前,尚无防治十字花科根肿病的链霉菌农药登记。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是要提供一种具有防治十字花科根肿病用途的链霉菌,该链霉菌包括疮痂链霉菌(Sti ^ptomyces scabiei ) WS-24926 CCTCC NO:M 2012393 和 / 或尖孢链霉菌(Streptomyces cuspidosporus)WS_29246 CCTCC NO:M 2012413。本专利技术所提供的疮痂链霉菌(Streptomyces scabiei)WS_24926已于2012年10月10日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC);保藏登记号为CCTCC M 2012393 ;保藏地点为:中国、武汉、武汉大学。尖抱链霉菌(Streptomyces cuspidosporus)WS_29246 已于 2012 年 10 月 18 日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC);保藏登记号为CCTCC M 2012413,保藏地点为:中国、武汉、武汉大学。所述疮痂链霉菌(Streptomyces scabiei) WS-24926是从湖南浏阳远郊植物根际土壤中分离得到的。综合疮痂链霉菌(Streptomyces scabiei)WS_24926的形态学特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析的结果,将其鉴定为疮痂链霉菌。具体鉴定结果如下:( I)菌体的形态特征疮痂链霉菌(Streptomyces scabiei) WS-24926菌株在ISP-2固体培养基上,菌落干燥、表面不光滑,有突起,浅灰色;孢子多,链状,短棍状,大小(长1.5 μ m-2 μ m,宽0.6 μ m-0.8 μ m),灰色,气丝乳白色或灰色,有螺旋孢子丝产生;色素不明显;在察氏固体培养基上无色素产生,气丝及孢子堆白色,基丝无色。在天门冬素固体培养基上培养基丝黄色,气丝及孢子堆灰白色,无色素产生。(2)生理生化特性不产生黑色素,能利用糊精、吐温40、L 一阿拉伯糖、D-木糖、琥珀酸单甲酯、丙酮酸、丙二醇、D-核糖、D-L-α -憐酸甘油。不能利用:吐温80、α _环糊精、糖原、甘露聚糖、D-阿拉伯糖、D-果糖、D-纤维二糖、D-半乳糖、D-半乳糖醛酸、D-甘露醇、a -D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、麦芽糖、乳果糖、D-甘露糖、L-丙氨酸、D-丙氨酸、琥珀酸、L-丙氨酰甘氨酸、L-丙氨酸胺、L-谷氨酸、腺苷、肌苷、胸苷、L-鼠李糖、尿苷、蔗糖、水杨苷、6-磷酸-D-果糖、6-磷酸-D-葡萄糖。(3) 16SrDNA 序列分析疮痂链霉菌(Streptomyces scabiei)WS_24926菌株经PCR技术,DNA测序仪分析,该菌株的16SrDNA序列由1391个碱基组成。用BLAST程序对疮痂链霉菌(Sti^ptomycesscabiei) WS-24926的16SrDNA序列和GenBank中已登录的16SrDNA序列进行核昔酸同源性比较,结果与已报道的疮痂链霉菌(S.scabiei) ATCC 49173 (T)(登录号AB02本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种链霉菌,包括疮痂链霉菌(Streptomyces?scabiei)WS?24926?CCTCC?NO:M?2012393和/或尖孢链霉菌(Streptomyces?cuspidosporus)WS?29246?CCTCC?NO:M?2012413。

【技术特征摘要】
1.一种链霉菌,包括疮痂链霉菌(Sti^ptomyces scabiei ) WS-24926 CCTCC NO:M 2012393 和 / 或尖孢链霉菌(Sti^ptomyces cuspidosporus) WS-29246 CCTCC NO:M2012413。2.—种权利要求1所述链霉菌在防治十字花科根肿病中的应用。3.一种利用权利要求1所述链霉菌制备而成的防治十字花科根肿病的生防悬浮剂,其特征在于:所述生防悬浮剂按重量百分比由1(Γ80%的发酵菌液、0.riO%的分散剂、0.5^5%的乳化剂、0.riO%的增稠剂、0.riO%的防腐剂、(Γ3.0%的消泡剂、(Γ10.0%的防冻剂和余量的水组成,其中,所述发酵菌液是由所述链霉菌发酵得到的菌液。4.一种利用权利要求1所述链霉菌制备而成的防治十字花科植物根肿病的生防缓释胶囊剂,其特征在于:所述生防缓释胶囊剂包括f 3份重量的发酵菌液、f 3份重量的阿拉伯胶或者海藻胶、Γ3份重量的明胶或者羧甲基纤维素钠,其中,所述发酵菌液是由所述链霉菌发酵得到的菌液。5.根据权利要求3所述的生防悬浮剂,其特征在于:所述分散剂为木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、萘磺酸钠甲醛缩合物、脂肪酰胺-N-甲基牛磺酸盐、烷基磺基琥珀酸钠盐、二丁基萘磺酸钠、十二烷基硫酸钠、多芳基酚聚氧乙烯醚和乙二胺四乙酸盐中的任选一种或者几种;所述乳化剂为烷基苯磺酸盐、烷基醇聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚、山梨酸酯和多元醇脂肪酸酯中任选一种或者几种;所述增稠剂为黄原胶、明胶、阿拉伯胶、瓜胶、海藻酸钠、可溶性淀粉、杂多糖、羧甲基纤维素钠、羧乙基纤维素钠、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、聚丙...

【专利技术属性】
技术研发人员:龙同万中义王开梅杨自文曹春霞张志刚张亚妮闵勇廖先清方伟江爱兵朱志刚姚经武张遵霞
申请(专利权)人:湖北省生物农药工程研究中心
类型:发明
国别省市:

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