用于治疗基质矿化障碍的方法、组合物、和试剂盒技术

本发明专利技术提供了用于治疗基质矿化障碍如低磷酸酯酶症的方法、组合物、和试剂盒。具体地，本发明专利技术提供了具有融合于免疫球蛋白的Fc域的可溶性碱性磷酸酶的多肽。例如，可以将上述多肽皮下给予患者，以利用酶替代疗法来治疗低磷酸酯酶症。本发明专利技术还涉及编码上述多肽的核酸以及上述核酸用于治疗基质矿化障碍的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗基质矿化障碍的方法、组合物、和试剂盒
技术介绍
本专利技术涉及基质矿化障碍如低磷酸酯酶症(HPP)的治疗。HPP是由在ALPL基因中的一个或多个功能缺去突变所引起的罕见的遗传性疾病，上述基因编码组织非特异性碱性磷酸酶(TNALP ；a.k.a骨/肝/肾型ALP)。在成骨细胞和软骨细胞中的碱性磷酸酶缺乏会损害骨骼矿化，从而导致佝偻病或骨软化。HPP的严重性取决于它的发作年龄。围产期HPP，HPP的最严重形式，导致在子宫内几乎完全没有骨矿化并且可以引起死产(死胎)。婴儿HPP，在6个月的年龄以前诊断的，导致骨骼矿化的受损，其可以导致骨折和畸形。童年期HPP可以引起乳牙的过早缺失和佝偻病。最后，成年HPP可以引起应力骨折以及关节炎和焦磷酸盐关节病的发作。鉴于基质矿化障碍如HPP对受影响患者，尤其是婴儿和儿童的可怕的近期和长期影响，所以需要开发用于治疗基质矿化障碍的方法和组合物。
技术实现思路
在本专利技术中，已经令人惊奇地发现，在HPP小鼠模型中，缺乏聚天冬氨酸或聚谷氨酸区的碱性磷酸酶-Fe融合蛋白可以有效地治疗HPP。因此，本专利技术提供了包含sALP-Fc或Fc-sALP多肽的组合物和包含编码sALP-Fc或Fc_sALP多肽的核酸的组合物。本专利技术还提供了方法和试剂盒，用于利用上述多肽和核酸来治疗基质矿化障碍如HPP和它的相关的表型。因此，在一个方面，本专利技术提供了用于治疗主体的基质矿化障碍的方法，该方法包括给予主体治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含:(a)多肽，其包含结构Z-sALP-Y-Fc-X或结构Z-Fc-Y-sALP-X ;以及(b)药用赋形剂，其中sALP是碱性磷酸酶的胞外域；X、Y、和Z各自不存在或是至少一个氨基酸的氨基酸序列；以及多肽并不包含长于三个连续天冬氨酸或谷氨酸残基的聚天冬氨酸或聚谷氨酸区。在另一个方面，本专利技术提供了药物组合物，该药物组合物包含:(a)多肽，该多肽包含结构Z-sALP-Y-Fc-X或结构Z-Fc-Y-sALP-X ;和(b)药用赋形剂，其中sALP是碱性磷酸酶的胞外域；X、Y、和Z各自不存在或是至少一个氨基酸的氨基酸序列；以及多肽并不包含长于三个连续天冬氨酸或谷氨酸残基的聚天冬氨酸或聚谷氨酸区。在又一个方面，本专利技术提供了用于治疗主体的基质矿化障碍的方法，该方法包括给予主体治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含:(a)编码多肽的分离的核酸，上述多肽包含结构Z-sALP-Y-Fc-X或结构Z-Fc-Y-sALP-X ;和(b)药用赋形剂，其中sALP是碱性磷酸酶的胞外域；X、Y、和Z各自不存在或是至少一个氨基酸的氨基酸序列；以及分离的核酸并不编码包含长于三个连续天冬氨酸或谷氨酸残基的聚天冬氨酸或聚谷氨酸区的氨基酸序列。在另一个方面，本专利技术提供了药物组合物，其配制用于治疗主体的基质矿化障碍，上述药物组合物包含:(a)编码多肽的分离的核酸，上述多肽包含结构Z-sALP-Y-Fc-X或结构Z-Fc-Y-sALP-X ;和(b)药用赋形剂，其中sALP是碱性磷酸酶的胞外域；X、Y、和Z各自不存在或是至少一个氨基酸的氨基酸序列；以及分离的核酸并不编码包含长于三个连续天冬氨酸或谷氨酸残基的聚天冬氨酸或聚谷氨酸区的氨基酸序列。在本专利技术的任何实施方式中，多肽可以可选地包含结构Z-sALP-Y-Fc-X。在任何实施方式中，多肽可选地并不包含长于两个连续天冬氨酸或谷氨酸残基的聚天冬氨酸或聚谷氨酸区。在任何实施方式中，多肽可选地并不包含骨靶向部分。在任何实施方式中，sALP的氨基酸序列可选地包括或由SEQ ID NO:15的氨基酸残基23-508组成。例如，sALP的氨基酸序列可选地包括或由SEQ ID NO:15的氨基酸残基23-512 组成。在任何实施方式中，sALP的氨基酸序列可选地包括或由SEQ ID NO:16的氨基酸残基18-498组成。例如，sALP的氨基酸序列可以可选地包括或由SEQ ID NO:16的氨基酸残基18-502组成。在任何实施方式中，sALP的氨基酸序列可选地包括与SEQ ID NO:5具有至少85%(例如，至少95%或99% )序列同一性的氨基酸序列。例如，sALP的氨基酸序列可选地包括 SEQ ID NO:5 或由 SEQ ID NO:5 组成。在任何实施方式中，Fe可以可选地包括Ch2域、Ch3域和铰链区。例如，Fe可选地是免疫球蛋白的恒定域，和述免疫球蛋白选自由IgG-1、IgG-2、IgG-3、IgG-3和IgG_4组成的组。在特定的实施方式中，免疫球蛋白是IgG-1。在其它特定的实施方式中，Fe包括与SEQID NO:3具有至少85% ( 例如，至少95%或99% )序列同一性的氨基酸序列。例如，Fe的氨基酸序列可选地包括SEQ ID NO:3或由SEQ ID NO:3组成。在任何实施方式中，Z可选地不存在。在任何实施方式中，Y可选地为两个氨基酸残基(例如，亮氨酸-赖氨酸)。在任何实施方式中，X可选地不存在。在任何实施方式中，Z和X可以均不存在，以及Y可以不存在或可以是至少一个氨基酸的氨基酸序列。例如，多肽可以由结构sALP-Y-Fc或结构Fc-Y-sALP组成。在多肽由结构sALP-Y-Fc或Fc-Y-sALP组成的一些实施方式中，Y可以由两个氨基酸残基(例如，亮氨酸-赖氨酸)组成。例如，多肽可以由结构sALP-Y-Fc组成。可选地，sALP的氨基酸序列是SEQ ID NO:5的氨基酸序列，Y的氨基酸序列是亮氨酸-赖氨酸，和/或Fe的氨基酸序列是SEQ ID NO:3的氨基酸序列。例如，多肽的氨基酸序列可以由SEQ ID NO:4的氨基酸序列组成。在任何实施方式中，多肽的氨基酸序列可选地包括与SEQ ID NO:4具有至少85%(例如，至少95%或99% )序列同一性的氨基酸序列。例如，多肽的氨基酸序列可以可选地包括 SEQ ID NO:4 或由 SEQ ID NO:4 组成。在任何实施方式中，多肽可选地被聚乙二醇化或糖基化。 在任何实施方式中，药物组合物可选地包括多肽的二聚物。在任何实施方式中，药用赋形剂可选地包括盐水。在任何实施方式中，可选地冷冻干燥药物组合物。在本专利技术的任何方法中，可选地通过皮下、静脉内、口服、鼻、肌内、舌下、鞘内、或皮内途径来给予药物组合物。在某些实施方式中，皮下给予药物组合物。例如，本专利技术的方法可以可选地包括以约0.5mg/kg/天至约10mg/kg/天(例如，约2mg/kg/天至约3mg/kg/天)的剂量将包含本专利技术的多肽的药物组合物给予主体。在其它实施例中，上述方法包括将药物组合物给予主体，一周一次至七次(例如，一周三次)。在本专利技术的任何方法中，基质矿化障碍可选地为低磷酸酯酶症(例如，婴儿HPP、童年期HPP、围产期HPP、成年HPP、或牙齿型低碱性磷酸酯酶症)。在本专利技术的任何方法中，可选地以治疗有效量给予药物组合物以治疗HPP表型，其选自由HPP相关的癫痫发作、乳牙的过早缺失、不完全骨矿化、无机焦磷酸盐(PPi)的升高的血和/或尿水平、磷酸乙醇胺(PEA)的升高的血和/或尿水平、吡哆醛5'-磷酸(PLP)的升高的血和/或尿水平、不适当的体重增加、佝偻病、骨痛、焦磷酸钙二水合物晶体沉积、不发育、发育不全、和牙骨本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：菲利普·克里内，皮埃尔·莱昂纳多，
申请(专利权)人：阿莱克森国际制药有限公司，
类型：
国别省市：