一种利用白酒酒糟生产微生物饲料益生菌剂的方法技术

一种利用白酒酒糟生产微生物饲料益生菌剂的方法，步骤如下：（1）向酒糟中加入水，过筛，加入酸性蛋白酶溶液，水解，调节pH，再加入糖化酶溶液，水解，经浓缩，制得酒糟提取液；（2）取布拉德酵母菌发酵液，植物乳杆菌，地衣芽孢杆菌发酵液，混合后，制得混合液，混合液经分离菌体，制得混合湿菌体；（3）配制保护液和复合载体；（4）将混合湿菌体与保护液混合均匀，然后分别加入酒糟提取液和复合载体，混合均匀后干燥，制得微生物饲料益生菌剂。本发明专利技术以酒糟为主要原料，通过添加适量的营养物质，以液态形式培养三种益生菌，制备复合微生物饲料益生菌剂，提高了酒糟的附加值，利用微生物发酵的方法处理酒糟，解决了酒糟利用的难题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物技术

技术介绍
近几年，我国白酒年产量约为900万吨，随之而来的副产品酒糟的年产量约为1500万吨。白酒酒糟是白酒生产最大的副产品，其中残存未能完全利用的淀粉、被富集的蛋白质、代谢产物氨基酸、维生素、矿物元素、微生物菌体等营养物质，如表I所示，这些营养成分可进行多方面的综合利用。表I白酒酒糟成分.1 11成分ii+Aj埤 11成分 水份01.U5灰分IHftii 粉7, 总 ft* AfiIH H2.SIHUKilH.m 发酸 乙in 77WiO, On IHfTffLItL 4 ο.15 HUItilJj2.s;ifta i a现在全国一年的饲料用粮大概占全国粮食总产量的23%左右，白酒酿造行业每年耗粮达2000多万吨，而酒糟生产干饲料所节省的饲料用粮，相当于酿酒的30%。一个年产万吨的白酒厂年产酒糟3万吨，可生产干饲料7000吨，所节省的饲料用粮，相当于酿酒耗粮的30%。目前，处理酒糟的传统方法是用做家畜饲料，酒糟中虽然含有丰富的蛋白质、维生素、微量元素、无氮浸出物、糖类、丰富的磷、钾等营养成分，但是酒糟适口性差、消化率较低、严重地影响了酒糟的饲用价值和饲养效果。我国养殖业规模世界第一、同时各种抗生药物大量使用，对人类健康造成的危害日益严重。随着世界上许多国家对抗生素使用的限制，抗生素在动物养殖饲料中大量使用的行为将被禁止。益生菌具有改善饲养动物消化系统生态环境、抵抗病原菌的作用，是目前替代抗生药物的理想选择。中国专利文献CN102715342A (申请号201210178380.9)公开了一种基于白酒糟和杂柏的微生物饲料的加工方法，其以白酒糟为原料经过脉孢菌、曲霉一期发酵预处理，充分降解白酒糟的木质素、纤维素和淀粉，再添加部分棉柏经芽孢杆菌和酵母菌二期发酵，吸收霉菌降解废弃物产生的营养物质及霉菌本身解体的营养物质。然后添加豆柏和菜子柏，接种乳酸菌、双歧杆菌经三期厌氧发酵成成品。该方法需要进行三期发酵，耗费时间长，并且生产工艺过长，容易沾染杂菌， 从而导致生产成本高。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供。本专利技术的技术方案如下:，步骤如下:(I)向酒糟中加入2 5倍重量的水，在室温搅拌条件下浸泡15 30min，过20目筛，向滤液中加入滤液重量0.01 0.1%的酸性蛋白酶溶液，酸性蛋白酶溶液酶活为50000U/ml，在40 55°C下水解2 4h，然后调节pH至4.0 5.0，加入滤液重量0.1 0.5%的糖化酶溶液，糖化酶溶液酶活为100000U/ml，在60 65°C下水解4 6h，制得水解液，然后将水解液浓缩至原体积的20% 50%，制得酒糟提取液；(2)取活菌浓度为1.0 1.5X 109CFU/ml的布拉德酵母菌(Saccharomycesboulardii)发酵液50 60份，活菌浓度为3.0 3.5X109CFU/ml的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)发酵液 20 30 份，活菌浓度为 1.0 1.2X 109CFU/ml 的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)发酵液20 30份,混合后,制得混合液,混合液经分离菌体，制得混合湿菌体；(3)配制海藻糖质量浓度为5 8%、维生素C质量浓度为0.05 1%、乳糖质量浓度为I 5%的保护液；将玉米淀粉和沸石粉按质量比(I 2): (I 2)的比例混合均匀，制得复合载体；(4)将步骤(2)制得的混合湿菌体与步骤(3)制得的保护液按质量比(I 2):(I 2)的比例混合均匀，然后分别按步骤(2)制得的混合液重量的40 60%各加入步骤(O制得的酒糟提取液和步骤(3)制得的复合载体，混合均匀后经40 50°C干燥，制得微生物饲料益生菌剂。制得的微生物饲料益生菌剂中活菌总数> 109eFU/g。根据本专利技术优选的，所述步骤(I)中的酒糟中，总糖8 10wt%，还原糖0.2 0.5wt%,总氮I 1.5wt%,纤维素10 15wt%，含水量60 65wt%，酸度2 2.5wt%,余量为粗脂肪和无机盐及杂质。根据本专利技术优选的，所述步骤(2)中的布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii)为保藏号ATCC MYA796的布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii) Sb48或保藏号CICC31992的博拉迪酵母菌(Saccharomyces boulardii)(注:布拉德酵母与博拉迪酵母均为boulardii的中文音译，菌株分类名称以拉丁名称为准)。植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号CICC22696 ；地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)为保藏号为CFCC2698的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)或保藏号为CFCC2741的地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)。根据本专利技术优选的，所述步骤(2)中的分离为经15000rpm连续离心分离或加入絮凝剂沉淀过夜分离。根据本专利技术优选的,所述步骤(2)中布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii)发酵液按如下方法制备:a、取斜面活化的布拉德酵母菌菌种接入种子培养基中，在温度30°C、摇瓶转速180rpm的条件下,摇瓶培养24 30小时,制得种子液；b、按重量百分比5%的接种量将种子液接种于发酵培养基中，在温度30°C、转速200rpm的条件下，培养24 30小时，制得二级种子液；C、按重量百分比10%的接种量将二级种子液流加接种至发酵培养基中，在温度30°C、转速200rpm的条件下，培养30 36小时，制得活菌浓度为1.0 1.5 X 109CFU/ml的布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii)发酵液。根据本专利技术进一步优选的，所述步骤a中，种子培养基每升含有如下组分:葡萄糖40g，蛋白胨lg，水定容至1L，pH5.5，121°C灭菌20分钟。根据本专利技术进一步优选的，所述步骤b和c中，发酵培养基组分如下，均为重量百分比:1 2%的葡萄糖或废糖蜜，0.5 1%的硫酸铵，0.5 1%的玉米浆，余量为酒糟提取液，调节PH为5.5，121°C灭菌20分钟。根据本专利技术优选的,所述步骤(2)中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)发酵液按如下方法制备:(i)取半固体穿刺活化的植物乳杆菌菌种接入种子培养基中，在温度37°C条件下，静置厌氧培养12 24小时，制得种子液；(ii)按重量百分比5%的接种量将种子液接种于发酵培养基中，在温度37°C条件下，静置厌氧培养12 24小时，制得二级种子液。(iii)按重量百分比10%的接种量将二级种子液流加接种至发酵培养基中，在温度37°C条件下，静置厌氧发酵培养24 36小时，制得活菌浓度为3.0 3.5X109CFU/ml的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)发酵液。根据本专利技术进一步优选的，所述步骤(i)中，种子培养基每升含有如下组分:葡萄糖20g，蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸二胺2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用白酒酒糟生产微生物饲料益生菌剂的方法，其特征在于，步骤如下：（1）向酒糟中加入2～5倍重量的水，在室温搅拌条件下浸泡15～30min，过20目筛，向滤液中加入滤液重量0.01～0.1%的酸性蛋白酶溶液，酸性蛋白酶溶液酶活为50000U/ml，在40～55℃下水解2～4h，然后调节pH至4.0～5.0，加入滤液重量0.1～0.5%的糖化酶溶液，糖化酶溶液酶活为100000U/ml，在60～65℃下水解4～6h，制得水解液，然后将水解液浓缩至原体积的20%～50%，制得酒糟提取液；（2）取活菌浓度为1.0～1.5×109CFU/ml的布拉德酵母菌（Saccharomyces?boulardii）发酵液50～60份，活菌浓度为3.0～3.5×109CFU/ml的植物乳杆菌（Lactobacillus?plantarum）发酵液20～30份，活菌浓度为1.0～1.2×109CFU/ml的地衣芽孢杆菌（Bacillus?licheniformis）发酵液20～30份，混合后，制得混合液，混合液经分离菌体，制得混合湿菌体；（3）配制海藻糖质量浓度为5～8%、维生素C质量浓度为0.05～1%、乳糖质量浓度为1～5%的保护液；将玉米淀粉和沸石粉按质量比（1～2）:（1～2）的比例混合均匀，制得复合载体；（4）将步骤（2）制得的混合湿菌体与步骤（3）制得的保护液按质量比（1～2）:（1～2）的比例混合均匀，然后分别按步骤（2）制得的混合液重量的40～60%各加入步骤（1）制得的酒糟提取液和步骤（3）制得的复合载体，混合均匀后经40～50℃干燥，制得微生物饲料益生菌剂。...

【技术特征摘要】
1.一种利用白酒酒糟生产微生物饲料益生菌剂的方法，其特征在于，步骤如下: (1)向酒糟中加入2 5倍重量的水，在室温搅拌条件下浸泡15 30min，过20目筛，向滤液中加入滤液重量0.01 0.1%的酸性蛋白酶溶液，酸性蛋白酶溶液酶活为50000U/ml，在40 55°C下水解2 4h，然后调节pH至4.0 5.0，加入滤液重量0.1 0.5%的糖化酶溶液，糖化酶溶液酶活为100000U/ml，在60 65°C下水解4 6h，制得水解液，然后将水解液浓缩至原体积的20% 50%，制得酒糟提取液； (2)取活菌浓度为1.0 1.5X109CFU/ml的布拉德酵母菌(Saccharomycesboulardii)发酵液50 60份，活菌浓度为3.0 3.5X109CFU/ml的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)发酵液 20 30 份，活菌浓度为 1.0 1.2X 109CFU/ml 的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)发酵液20 30份,混合后,制得混合液,混合液经分离菌体，制得混合湿菌体； (3)配制海藻糖质量浓度为5 8%、维生素C质量浓度为0.05 1%、乳糖质量浓度为I 5%的保护液； 将玉米淀粉和沸石粉 按质量比(I 2): (I 2)的比例混合均匀，制得复合载体； (4)将步骤(2)制得的混合湿菌体与步骤(3)制得的保护液按质量比(I 2): (I 2)的比例混合均匀，然后分别按步骤(2)制得的混合液重量的40 60%各加入步骤(I)制得的酒糟提取液和步骤(3)制得的复合载体，混合均匀后经40 50°C干燥，制得微生物饲料益生菌剂。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(I)中的酒糟中，总糖8 10wt%，还原糖0.2 0.5wt%,总氮I 1.5wt%,纤维素10 15wt%，含水量60 65wt%，酸度2 2.5wt%,余量为粗脂肪和无机盐及杂质。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii)为保藏号 ATCC MYA796 的布拉德酵母菌(Saccharomycesboulardii) Sb48 或保藏号 CICC31992 的博拉迪酵母菌(Saccharomyces boulardii)； 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)为保藏号CICC22696的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)； 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)为保藏号为CFCC2698的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)或保藏号为CFCC2741的地衣芽抱杆菌(Bacilluslicheniformis)。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的分离为经15000rpm连续离心分离或加入絮凝剂沉淀过夜分离。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中布拉德酵母菌(Saccharomyces boulardii)发酵液按如下方法制备: a、取斜面活化的布拉德酵母菌菌种接入种子培养基中，在温度30°C、摇瓶转速180rpm的条件下，摇瓶培养24 30小时，制得种子液； b、按重量百分比5%的接种量将种子液接种于发酵培养基中，在温度30°C、转速200rpm的条件下，培养24 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王瑞明，赵殿臣，杜新勇，王腾飞，李丕武，范志勇，
申请(专利权)人：山东轻工业学院，古贝春集团有限公司，
类型：发明
国别省市：