用于治疗肾病综合征和有关病症的方法技术

本公开内容提供了一种用于治疗和/或预防肾病综合征（诸如但不限于MCD和MN）和与肾病综合征有关的病症（诸如但不限于、蛋白尿和水肿）以及糖尿病肾病、糖尿病、狼疮肾炎或原发性肾小球疾病的方法。本公开内容另外提供了用于减轻蛋白尿和本文讨论的其它疾病状态的方法。这样的方法包括：给受试者治疗性递送Angptl4多肽或Angptl4多肽衍生物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗肾病综合征和有关病症的方法关于联邦资助研究的声明联邦政府为本文所述的工作提供了资金支持，政府具有本专利技术的某些权利。
本公开内容涉及用于治疗和预防肾病综合征及其相关病症(例如，但不限于，蛋白尿和水肿)的方法。
技术介绍
肾病综合征(NS)是表示尿中蛋白损失(蛋白尿)、高脂血症(高胆固醇血症和高甘油三酯血症)和水肿的一般术语。肾病综合征涉及肾中的细胞(诸如足细胞)的病理学变化。蛋白尿被定义为，过量血清蛋白在尿中的存在。白蛋白尿(蛋白尿的一种特定类型)是这样的病理学状况：其中白蛋白存在于尿中。足细胞(或内脏上皮细胞)是在肾的肾小球毛细血管袢的外层中的细胞。肾小球过滤血液，阻挡大分子(诸如蛋白)，并允许小分子(诸如水、盐和糖)穿过，作为形成尿的第一步。足细胞的长突或“足突”围绕毛细血管，并接近以停留在肾小球基膜上。足突通过称作裂孔隔膜的多孔结构相连。肾小球毛细血管袢的最内层由有孔的内皮细胞组成。受肾病综合征影响的肾具有肾小球毛细血管袢的异常，所述异常会造成血液蛋白质的渗漏，从而导致蛋白尿。当蛋白损失在尿中时，它的血浆浓度下降，因而允许水迁移进身体的其它部位，这导致肿胀(称作水肿)。水肿常见于脚和腿、腰部或腹部(腹水)和眼周围，但是可以发生在任何地方，特别是响应于重力。另外，因为这种停留在体内的额外流体，人们经常增加体重、经历疲劳，且可能发现他们经常排尿更少。许多病症被归类为肾病综合征，包括轻微改变型肾病(MCD)、局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS)、膜性肾病(MN)(也称作膜性肾小球肾炎,MGN)和膜性增生性肾小球肾炎(MPGN)。多年来，当在光学显微镜下观察样本时，病理学家没有发现MCD组织中的变化，因此得名轻微改变型肾病。随着电子显微术的出现，现在已知是该疾病的标志的变化包括：足细胞足突的扩散损失，足细胞足突的空泡形成，和微绒毛在内脏上皮细胞上的生长。糖尿病肾病是肾病综合征的最常见原因。降解甘油三酯的酶(诸如脂蛋白脂肪酶(LPL))的活性的变化，可能引起高甘油三酯血症(2-4)。在肾病综合征和蛋白尿的病原学中涉及的某些蛋白质，诸如血管生成素-样4(Angptl4)，会抑制LPL的活性。肾病综合征的分子基础是未知的。已经在肾病综合征(诸如MCD、MN/MGN和MPGN)中观察到Angptl4水平的增加，但是增加的Angptl4循环水平尚未与肾病综合征中的蛋白尿的原因相关联。但是，以前尚未报道Angptl4在肾病综合征(诸如但不限于、MCD、FSGS、MN/MGN和MPGN)和相关病症(例如，但不限于，蛋白尿)中的作用。此外，有待确立蛋白尿和糖皮质激素敏感性在肾病综合征中的联系以及蛋白尿和高甘油三酯血症(肾病综合征的2种关键组分)之间的关联。设计成减轻蛋白尿的疗法，进一步使疾病机理的研究复杂化。例如，用于治疗MCD中的蛋白尿的糖皮质激素会独立地升高血浆甘油三酯水平(5)，且在某些形式的肾病综合征(诸如MCD)中，血浆甘油三酯水平的正常化落后于蛋白尿对糖皮质激素的应答(6)。附图说明图1显示了aP2-Angptl4TG大鼠的开发和表征。图1a显示了200μg人血浆的二维凝胶分析(n＝4位患者/组，显示了裁切的代表性印迹)，并证实了与MCD缓解的患者(即非蛋白尿患者)相比，在具有复发的轻微改变型肾病(MCD)的患者中和在具有膜性肾病(MN)的患者中，存在增加的Angptl4循环水平(用箭头指示)。图1b显示了Angptl4的脂肪组织特异性过表达的转基因(TG)大鼠模型(aP2-Angplt4TG)。图1c显示了Angptl4mRNA在aP2-Angptl4TG大鼠中的组织特异性的过表达(n＝3只大鼠/组)。WAT是白色脂肪组织，BAT是褐色脂肪组织。＊＊＊P＜0.001。图1d显示了200μg血浆的二维凝胶电泳，随后进行Angptl4的蛋白质印迹，并证实，杂合的aP2-Angptl4TG大鼠具有比野生型大鼠更高的Angptl4循环水平(3个月龄，n＝3印迹/组)。图1e显示了200μg血浆的二维凝胶电泳，随后进行抗-V5和抗-Angptl4抗体的蛋白质印迹，并证实了脂肪组织分泌的V5标记的Angptl4在aP2-Angptl4TG大鼠的血浆中的存在。图1f显示了来自aP2-Angptl4TG大鼠血浆的抗-N-端Angptl4免疫沉淀物的二维凝胶电泳，随后使用凝集素SNAI和抗-Angptl4抗体进行蛋白质印迹法，并证实了循环的唾液酸化的Angptl4在aP2-Angptl4中的存在。图1g显示了来自3个月龄杂合的aP2-Angptl4TG大鼠(n＝3只大鼠/组)的PAS染色的切片，并证实了正常的肾小球形态学(放大率400x)。图1h显示了在3个月杂合的aP2-Angplt4TG雄性大鼠中用抗-V5抗体来特异性地检测转基因蛋白的免疫金EM，并证实了在aP2-Angptl4TG大鼠的内皮表面上的选择性的金颗粒(用箭头指示)。图2显示了增加的Angptl4循环水平与蛋白尿/白蛋白尿的关联。图2a显示了通过GelCode蓝染色的SDSPAGE评估在不同的人和实验性疾病条件下的尿蛋白排泄(3μg/泳道，除了MCD缓解以外)，并证实在aP2-Angptl4TG大鼠中缺失显著的蛋白尿(用＊标记的泳道，箭头显示了在约70kDa处的完整白蛋白)。图2b显示了通过ELISA来评估白蛋白尿，并揭示，杂合的雌性aP2-Angptl4TG大鼠具有比野生型同胞仔更低的白蛋白尿(n＝6只大鼠/组)。图2c显示了通过ELISA来评估白蛋白尿，并揭示，杂合的雄性aP2-Angptl4TG大鼠具有比野生型同胞仔更低的白蛋白尿(n＝6只大鼠/组)。图2d显示了在野生型和aP2-Angptl4TG大鼠中诱导嘌罗霉素肾病(PAN)(一种肾病综合征模型)，并证实在aP2-Angptl4TG大鼠中比野生型同胞仔更少的蛋白尿(n＝8只大鼠/组)。＊P＜0.05,＊＊P＜0.01，相对于对应的对照。图2e显示了重组Angptl4对培养的肾小球内皮细胞(GEnC)具有保护作用。＊＊P＜0.01,＊＊＊P＜0.001，相对于对应的对照。图2f显示了在第6天Angptl4在野生型大鼠疾病模型(如PAN)中的增量调节仅是肾小球的，而在第10天(此时蛋白尿和肾小球Angptl4表达都处于下降)，观察到Angptl4在脂肪组织中的增量调节(n＝3大鼠/样品)。＊＊P＜0.01,＊＊＊P＜0.001，相对于对应的对照。图2g显示了在aP2-Angptl4TG大鼠中在基线时和在诱导PAN以后增加的Angptl4循环水平会导致与野生型大鼠相比增加的血浆甘油三酯水平。＊P＜0.05，相对于对应的对照。图2h显示了在aP2-Angptl4TG大鼠中在基线时和在诱导PAN以后增加的Angptl4循环水平会导致与野生型大鼠相比降低的肝素后脂蛋白脂肪酶(LPL)活性。＊P＜0.05，相对于对应的对照。图3显示了用于Taqman实时PCR的引物和探针(SEQIDNO.11-22)。图4显示了重组Angptl4会减轻人肾小球疾病动物模型中的蛋白尿。图4a显示了在Buffalo/Mna大鼠(一种FSGS模型)中的蛋白尿的减轻。在Buffalo/Mna大鼠模型中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.06.05 US 61/351,8661.中性pIAngptl4多肽在制备用于治疗受试者的肾病综合征的药物组合物中的用途，其中所述药物组合物被施用于所述受试者，且其中所述中性pIAngptl4多肽具有降低的脂蛋白脂肪酶抑制活性、耐受切割或前述的组合。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述肾病综合征被表征为轻微改变型肾病、局灶性节段性肾小球硬化症、膜性肾病/膜性肾小球肾炎、膜性增生性肾小球肾炎或糖尿病病症。3.根据权利要求1所述的用途，其中所述中性pIAngptl4多肽含有E40K置换或E40A置换，置换前的序列为SEQIDNO:1或3的序列。4.根据权利要求1所述的用途，其中所述中性pIAngptl4多肽含有E40K置换或E40A置换，置换前的序列为SEQIDNO:5或7的序列。5.根据权利要求1所述的用途，其中所述中性pIAngptl4多肽含有R161RKR164至G161SGS164置换，置换前的序列为SEQIDNO:1或3的序列。6.根据权利要求1所述的用途，其中所述中性pIAngptl4多肽具有降低的脂蛋白脂肪酶抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏曼特·丘格，
申请(专利权)人：UAB研究基金会，
类型：
国别省市：