确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变的方法、试剂盒以及引物技术

本发明专利技术公开了确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变的方法、试剂盒以及引物。其中，该方法包括：利用第一引物和第二引物对核酸样本进行PCR扩增，并且在PCR扩增体系中加入核酸探针，核酸探针对应两个预定位点之间至少一部分对应的核酸序列；检测反应体系的发光，以便确定核酸样本的预定位点是否存在已知突变，第一引物的近3’端包含与两个预定位点之一已知突变对应的碱基，第二引物的近3’端包含与另一个已知突变对应的碱基，核酸探针具有：发光基团，发光基团形成于核酸探针的5’端，调节基团，调节基团形成于核酸探针的3’端，并且调节基团可以调节发光基团的发光。利用该方法能够有效地确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域。具体而言，本专利技术涉及确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变的方法、试剂盒以及引物。
技术介绍
ApoE是一种载脂蛋白，其遗传多态性主要受控于两个SNP位点rs429358和rs7412，这两个SNP位点通过不同的核酸组合决定了 ApoE的三种等位基因型:ε 2(rs429358 为 T, rs7412 为 T)、ε 3 (rs429358 为 Τ, rs7412 为 C)、ε 4 (rs429358 为 C,rs7412为C)，这三种类型等位基因分别编码三种ApoE蛋白亚型，即ApoE2 (其蛋白序列的112位和158位均为半胱氨酸)、ApoE3 (其蛋白序列的112位为半胱氨酸，158位为精氨酸)、ApoE4 (其蛋白序列的112位和158位均为精氨酸)。因此，ApoE基因有ε 2/ ε 2、ε 3/ε3、和ε 4/ε 4三种纯合子型与ε 2/ε 3、ε 2/ε 4和ε 3/ε 4三种杂合子型。目前ApoE基因分型的方法主要有:传统DNA测序法、等位基因特异性寡核苷酸探针杂交法、聚合酶链反应-单链构象多态性法、聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变的方法，其特征在于，包括：利用第一引物和第二引物对所述核酸样本进行PCR扩增，并且在所述PCR扩增体系中加入核酸探针，所述核酸探针对应两个预定位点之间至少一部分的核酸序列；以及检测反应体系的发光，以便确定所述核酸样本的预定位点是否存在已知突变，其中，所述第一引物的近3’端包含与所述两个预定位点之一已知突变对应的碱基，所述第二引物的近3’端包含与所述两个预定位点另一个已知突变对应的碱基，所述第一引物和第二引物之一作为正向引物，所述第一引物和所述第二引物的另一个作为反向引物，所述核酸探针具有：发光基团，所述发光基团形成于所述核酸探针的5’端，调节基团，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许华曦，卜国军，张含，张云武，刘家珍，
申请(专利权)人：厦门人瑞生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35