一种免疫荧光组织化学技术制造技术

本发明专利技术属于免疫分析和生物技术应用领域，具体为一种免疫荧光组织化学技术，解决现有免疫荧光组织化学技术在使用过程中存在诸多缺陷的问题，包括：初染，分析蛋白A和蛋白B在待测细胞或组织切片的表达情况；然后复染：利用磷酸盐缓冲液清洗待测细胞或组织切片，镜检观察至荧光消失；重新封闭；孵育待测细胞或组织切片中所含待测蛋白C的相应一抗，然后孵育荧光素标记的二抗；DAPI复染；普通荧光显微镜镜检、拍照，得到待测蛋白C的镜检照片，与初染得到的镜检照片进行叠加，分析已测蛋白A、B和待测蛋白C的表达情况。操作可控性强、特异性强、准确度高、用较低的实验成本实现较高的研究要求，为临床免疫荧光组织化学研究提供广泛的应用范围。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫分析和生物技术应用领域，具体为一种免疫荧光组织化学技术。
技术介绍
免疫荧光组织化学技术是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一，是由Coons和他的同事(1941)建立。免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成为免疫荧光组织(或细胞)化学技术。它与葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域；与激光技术、电子计算机、扫描电视和双光子显微镜等技术结合发展为定量免疫突光组织化学技术；突光激活细胞分类器Fluorescin activated cell sorter (FACS)的应用，激光共聚焦显微镜的问世，使免疫荧光细胞技术发展到更高阶段，开创了免疫荧光技术的新领域。细胞显微分光光度计与图像分析仪的结合使免疫荧光组织化学的定量检测更加准确。80年代到90年代相继又有新的荧光素的出现，均在流式细胞仪和激光共聚焦显微镜中得到广泛应用。免疫荧光组织化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗体(或抗原)标记上荧光素，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫荧光组织化学技术，其特征是包括以下步骤：（1）初染①、制备待测细胞或组织切片；②、用H2O2/甲醇处理，降低内源性过氧化物酶所造成的非特异性背景；③、暴露抗原结合位点；④、封闭；?⑤、同时或单独孵育待测细胞或组织切片中所含待测蛋白A的相应一抗和所含待测蛋白B的相应一抗，?⑥、同时或单独孵育待测蛋白A的荧光素标记的二抗和待测蛋白B的荧光素标记的二抗；⑦、DAPI初染；⑧、普通荧光显微镜镜检、拍照，分析蛋白A和蛋白B在待测细胞或组织切片的表达情况；（2）复染①、利用磷酸盐缓冲液清洗进行初染后的待测细胞或组织切片，镜检观察至荧光消失；②、重新封闭；????③、孵育待测细胞或组织切片中所含待测...

【技术特征摘要】
1.一种免疫荧光组织化学技术，其特征是包括以下步骤 (1)初染 ①、制备待测细胞或组织切片； ②、用H2O2/甲醇处理，降低内源性过氧化物酶所造成的非特异性背景； ③、暴露抗原结合位点； ④、封闭; ⑤、同时或单独孵育待测细胞或组织切片中所含待测蛋白A的相应一抗和所含待测蛋白B的相应一抗， ⑥、同时或单独孵育待测蛋白A的荧光素标记的二抗和待测蛋白B的荧光素标记的二抗; ⑦、DAPI初染； ⑧、普通荧光显微镜镜检、拍照，分析蛋白A和蛋白B在待测细胞或组织切片的表达情况； (2)复染 ①、利用磷酸盐缓冲液清洗进行初染后的待测细胞或组织切片，镜检观察至荧光消失; ②、重新封闭； ③、孵育待测细胞或组织切片中所含待测蛋白C的相应一抗，然后孵育荧光素标记的二抗； ④、DAPI复染 ⑤、普通荧光显微镜镜检、拍照，得到待测蛋白C的...

【专利技术属性】
技术研发人员：覃秀桃，王耀琴，杨利军，郑海亮，许素铭，张旻，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：