利用改进的目的基因表达盒进行植物转化的方法技术

本发明专利技术公开了一种转化植物的方法。该方法包括将如下DNA片段导入目的植物中的步骤：5’-核基质结合区序列-启动子-目的基因编码序列-终止子-核基质结合区序列-3’。本发明专利技术通过转化GUS报告基因比较了不加SAR序列与加SAR序列的线性载体的转化效率及GUS基因的表达稳定性。同时，采用加SAR序列的线性载体转化抗逆相关基因GmDREB3，通过PCR的方法鉴定转基因小麦中插入片段的完整性，结果表明，本发明专利技术改进的最小表达框转化技术可提高小麦基因枪转化效率；同时，提高了目的基因在转基因小麦中的表达效率及遗传稳定性，且片段完整性良好；本发明专利技术为获得安全转基因小麦提供了新思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种转化植物的方法，特别涉及一种将目的基因以DNA片段的形式(含有目的基因表达盒)导入目的植物中的方法。
技术介绍
基因枪转化法具有转化效率高、无宿主限制、简单易操作等优点，在小麦转化中得到广泛应用，目前小麦遗传转68. 8%是采用基因枪转化。而传统的小麦基因枪转化法多以环形载体转化为主，导致载体骨架序列伴随目的基因同时整合进植物基因组，外源片段拷贝数高，目的基因的低表达甚至外源基因沉默，同时，载体框架序列中含有的抗生素抗性基因增加了转基因植物的安全隐患。最近的研究还发现，载体骨架序列会引起外源基因发生不同程度的重排、断裂，导致遗传不稳定。早在1991年，Artelt等就指出，载体框架结构在转基因中都会产生负面影响，因此需要对经典的基因枪法进行改进和创新。Uze 等(Uz6, M, Potrykus, I and Sautter, C. Single-stranded DNA in thegenetictransformation of wheat(Triticum aestivum L.): transformation fequencyand intergrati本文档来自技高网...

【技术保护点】
转化植物的方法，包括将目的基因导入目的植物中的步骤；所述目的基因是通过如下DNA片段导入目的植物中的：5’?核基质结合区序列?启动子?目的基因?终止子?核基质结合区序列?3’。

【技术特征摘要】
2012.10.31 CN 201210427963.01.转化植物的方法，包括将目的基因导入目的植物中的步骤；所述目的基因是通过如下DNA片段导入目的植物中的 5’ -核基质结合区序列-启动子-目的基因-终止子-核基质结合区序列-3’。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述核基质结合区序列如序列表中序列I所示。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述启动子为Ubiquitin启动子。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述Ubiquitin启动子的序列如序列表...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈明，徐惠君，马有志，徐兆师，李连城，苏瑞波，杜丽璞，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：