胶原/纤维蛋白胶-VEGF与间充质干细胞复合构建的双层皮肤覆盖物及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合间充质干细胞构建的双层皮肤覆盖物及其制备方法和应用。具体的说是采用胶原与含有VEGF的纤维蛋白胶复合制成双层组织工程支架材料，与脐带间充质干细胞共同孵育后制成仿生的双层皮肤覆盖物。本发明专利技术所制备的胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合间充质干细胞构建双层皮肤覆盖物降解性能与皮肤生长速率适宜，机械性能可控，是一种新颖仿生皮肤覆盖物，促进表皮和真皮的修复，促进血管内皮的生长，用于皮肤表层及全层创面修复，加速愈合，达到理想的创面修复效果，对临床皮肤创面的修复具有重要意义。另外，本发明专利技术还公开了上述双层皮肤覆盖物的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学材料领域，涉及一种胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合间充质干细胞构建双层皮肤覆盖物及其制备方法和应用。
技术介绍
皮肤是人体最大的器官，由于炎症、溃疡、外伤、肿瘤术后以及先天畸形等原因常造成皮肤的缺损和异常。目前皮肤缺损的常规治疗方法有自体、异体或异种皮移植，由于自体皮来源有限，异体皮、异种皮移植仍存在一定的免疫排斥反应，且有传播疾病的危险，难以满足临床应用的需要，大面积的缺损仅靠创面自身难以实现皮肤的再生，需要足够的皮肤替代物进行修复。故寻找一种理想的皮肤替代物一直是临床上急需解决的难题。组织工程皮肤产品的研制成功为治疗皮肤的急性和慢性损伤提供了一个极有前景的治疗方法。组织工程产品主要 由种子细胞和支架材料构建而成。如何获得一种比较理想的组织工程皮肤，种子细胞和支架材料的选择就成了关键。目前，干细胞在创伤修复和再生中的应用成为学者们关注的热点。人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stemcells,UCMSCs)来源于早期中胚层，具有跨胚层向多组织细胞分化的潜能，在适宜的体外环境下可分化为皮肤细胞、内皮细胞、骨细本文档来自技高网...

【技术保护点】
胶原/纤维蛋白胶?VEGF复合UCMSCs双层皮肤覆盖物，其特征在于该双层皮肤覆盖物包括胶原/纤维蛋白胶?VEGF双层支架和UCMSCs的活性层，其中VEGF分布在纤维蛋白胶层，两层具有不同的孔隙率。

【技术特征摘要】
1.胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合UCMSCs双层皮肤覆盖物，其特征在于该双层皮肤覆盖物包括胶原/纤维蛋白胶-VEGF双层支架和UCMSCs的活性层，其中VEGF分布在纤维蛋白胶层，两层具有不同的孔隙率。2.权利要求1所述胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合UCMSCs双层皮肤覆盖物，其中胶原层孔隙直径为(130. O±24. 5) Mffl，胶原层厚度为(O. 18±O. 045) cm，胶原/纤维蛋白胶-VEGF 双层支架材料厚度为(O. 25±O. 095) cm。3.权利要求1所述胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合UCMSCs双层皮肤覆盖物，其中胶原层孔隙率为(74. 8± 10. 8) %，胶原/纤维蛋白胶-VEGF双层支架的孔隙率为(64. 5 ±6. 9) %。4.权利要求1所述的胶原/纤维蛋白胶-VEGF复合UCMSCs双层皮肤覆盖物的制备方法，其特征在于包括胶原/纤维蛋白胶-VEGF双层支架的制备，步骤如下(O胶原溶胀液与丙二酸溶液配制质量浓度为O. 39Γ1. 0%的胶原溶液，搅拌均匀后注入不锈钢模具，预冻后冷冻干燥得到胶原海绵状固体；(2)将上述胶原海绵状固体浸入戊二醛溶液进行化学交联，清洗后再次进行冷冻干燥制备得到胶原多孔支架；(3)将胶原多孔支架装入聚乙烯薄膜小袋中，封口后Y射线6°Co，2X106rad辐射灭菌；(4)将VEGF的PBS溶液与纤维蛋白原混合成含VEGFlmg/ml后，加入凝血酶，制备纤维蛋白月父;(5 )将上述纤维蛋白胶迅速加入胶原支架层，静置20分钟形成胶原/纤维蛋白胶-VEGF 双层支架。5.根据权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈红丽，南文滨，张慧，李永海，刘涌涛，刘瑞，林俊堂，丰慧根，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：