岗松总黄酮的制备及其质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种从植物岗松干燥茎叶经提取、浓缩、分离、干燥而制得的总黄酮提取物，本发明专利技术采用薄层色谱法定性鉴别总黄酮，采用紫外-可见分光光度法测定岗松总黄酮含量，方法准确、稳定、操作简单，能适应工业生产的需要，可有效的控制岗松总黄酮提取物的质量。本发明专利技术岗松总黄酮提取物毒性小，具有抗炎、抑菌、镇痛等药理作用，制备方法合理、稳定、生产周期短，适合工业化生产。具有良好的开发前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种黄酮提取物制备领域，具体涉及一种。
技术介绍
天然植物提取物是以植物为原料，按照提取的目的需要，经过物理化学提取分离过程，定向获取和浓集植物中的某一种或多种有效成分，而不改变其有效成分结构而形成的产品。与传统草药和中成药相比，中药提取物至少知道一种或一类有效成分，有明确的定量指标，有害成分大部分被除去，从而在安全性上比传统植物药和中成药大大提高。此外，中药提取物还融合了现代制药新技术，属于新型中药产品，具有广阔的国际市场空间，其产业化有良好的发展前景，体现了中药产业的技术进步，适应了中药现代化的要求。岗松为桃金娘科植物岗松feecfca frutescens L.带有花果的干燥莖叶,现收载于《广西壮族自治区壮药材质量标准汇编》第一卷，曾收载于《中国药典》1977版。其功能主治为清利湿热，杀虫止痒。用于泄泻，腹痛，急性胃肠炎；外治滴虫性阴道炎，皮肤湿疹。研究表明岗松主要成分含有黄酮、有机酸、挥发油等类化合物，黄酮是植物中具有生物活性的一大类化合物，岗松含6，8- 二甲基山奈酚-3-0- α -鼠李糖苷、槲皮素、槲皮素-3-0- α -鼠李糖苷、杨梅素、杨梅素-3-0-α -鼠李糖苷等黄酮成分(题名岗松中的一个新黄酮醇苷类化合物作者卢文杰，牙启康，陈家源，刘布鸣，广西中医药研究院刊名药学学报，2008年，40 (10)，1032 1035)，槲皮素含量达O. 1% (题名高效液相色谱法测定岗松药材中槲皮素的含量作者林霄，刘布鸣，陈明生.等，广西中医药研究院刊名时珍国医国药，2009，20 (I) :102-103.)，杨梅素含量达O. 6% (题名岗松中杨梅素的含量测定作者陈明生，刘布鸣，林霄，等，广西中医药研究院刊名时珍国医国药，2010，21 (11):2771-2772.)。 岗松植物在我国分布广泛，资源相当丰富，但目前对岗松的应用不多，应用大多局限于提取挥发油，提油后的植物部分被作为废弃物丢弃，而岗松黄酮提取物未能得到应用，岗松药材未能得到充分的开发利用，严重地浪费了药材资源。所以研发一种是有必要的，利于开发岗松新的药用途径，并为药材资源的充分利用及提高其应用价值提供科学的依据。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种方法合理、稳定、生产周期短，适合工业化生产，具有抗炎、抑菌、镇痛等药理作用的岗松总黄酮的制备方法，及岗松总黄酮的质量控制方法。本专利技术是这样实现的本专利技术岗松总黄酮的制备方法，包括以下步骤1、乙醇加热回流提取①取岗松干燥茎叶，粉碎，按重量配比加10 - 15倍量30 - 70%体积浓度的乙醇；②加热回流提取3次，每次I一 3小时，滤过，合并滤液；③滤液回收乙醇，并浓缩至无乙醇味，加水稀释得到浓度为O.3 — O. 8g生药量/mL的岗松提取液，待上柱用。2、大孔吸附树脂分离纯化①选择弱极性的AB — 8或DlOl大孔吸附树脂。②吸附上柱岗松提取液浓度为O. 3 — O. 8g生药量/mL，上柱岗松提取液体积为填充大孔吸附树脂体积的2 - 5倍，上柱流速为O. 5 — 2 BV/h注BV/h表示柱内单位时间(h)流经单位体积树脂平均液量。③洗脱洗脱剂为50 - 70%乙醇，洗脱剂用量为填充大孔吸附树脂体积的5 - 10倍，洗脱流速为2 - 5BV/h ;收集5 — 8倍洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，60°C真空干燥，得岗松总黄酮提取物。本专利技术岗松总黄酮的质量控制方法，包括以下步骤1、总黄酮的薄层色谱鉴别取岗松总黄酮提取物约20mg，精密称定，置IOmL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取芦丁对照品适量，加甲醇制成每ImL含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录W B)试验，取供试品溶液、对照品溶液各5 - 10 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯一甲酸一水一甲醇(8:1:1:0.4)为展开剂,展开,取出，晾干，喷以1%三氯化铝试液,在105°C加热5分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 2、总黄酮的含量测定①对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每ImL含O. 05 mg的溶液，即得。②标准曲线的制备精密量取芦丁对照品溶液l、2、3、5、10mL，分别置IOmL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇作为空白，照紫外-可见分光光度法(《中国药典》2010版一部附录V A)在360±lnm测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。③测定法取岗松总黄酮提取物约10mg，精密称定，置20mL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取lmL，置IOmL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇勻，以甲醇作为空白，在360±lnm测定吸光度，含总黄酮以芦丁(C27H3tlO16)计算，即得。岗松总黄酮含量以芦丁(C27H3tlO16)计算不得少于50. 0%。④结果采用本专利技术的制备和质量控制方法，经验证试验，制备的岗松总黄酮含量以芦丁计，可达50%以上。所述的岗松总黄酮应用于抗炎、抑菌、镇痛的药物中的。与现有技术相比，本专利技术突出的实质性特点和显著的进步是1、本专利技术首次从岗松中制备出含量50%以上的岗松总黄酮提取物，为药材资源的充分利用及提高其应用价值提供科学的依据。2、本专利技术设计合理，制备方法合理、稳定、可行，耗能低，利用醇水溶剂提取，经过一次大孔吸附树脂柱分离纯化即可得到含量较高的岗松总黄酮提取物，方法简便易行。3、本专利技术提取、分离速度快，生产周期短，适合工业化生产，有很好的应用前景。4、本专利技术采用薄层色谱法鉴别总黄酮，紫外-可见分光光度法直接测定岗松总黄酮含量，方法准确、简单，能适应工业生产的需要，可有效的控制岗松总黄酮提取物的质量。5、通过对岗松总黄酮进行研究，建立了一种岗松总黄酮的制备和质量控制方法，有利于岗松相关产品的进一步开发利用，而且对于开发广西特色药材，开发具有高技术、高附加值的产品，提高市场竞争能力，将会产生潜在而不可估量的社会效益与经济效益。目前在国际市场，中药提取物商品形态包括以下三类 ①纯度达到95%以上，以单一化合物为检测对象的中药提取物。②经过柱色谱分离、沉淀分离、萃取分离等分离工艺所获得的部分成分较为集中的多组分中药提取物，被测组分一般为活性成分，含量在20% - 50%之间。③经水或醇提取、未加分离的单一中药浸膏粉或流浸膏。我国的植物提取物总体上是属于中间体的产品，目前的用途非常广泛，主要用于药品、保健食品、烟草、化妆品的原料或辅料等。用于提取的原料植物的种类也非常多，目前进入工业提取的植物品种在300种以上。我国植物提取物的出口额早在1999年就已超过中成药的出口额。在欧美国家，植物提取物及其制品(植物药或食品补充剂)有着广泛的市场前景，已发展成一个年销售额近80亿美元的新兴产业。因此，建立了一种岗松总黄酮的制备和质量控制方法，使之科学化、规范化，增强国际竞争力，为中药进入国际市场创造条件，具有重大的实际意义和学术价值。附图说明图1是岗松总黄酮的制备工艺流程图。图2是岗松总黄酮提取物、芦丁对照品紫外吸收光谱图。从图2看出，岗松总黄酮提取物的紫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种岗松总黄酮的制备方法，其特征在于：所述的岗松总黄酮的制备方法包括以下步骤：（1）乙醇加热回流提取：①?取岗松干燥茎叶，粉碎，按重量加10－15倍量30－70%体积浓度的乙醇；②?加热回流提取3次，每次1－3小时，滤过，合并滤液；③?滤液回收乙醇，并浓缩至无乙醇味，加水稀释至浓度为0.3－0.8g生药量/mL的岗松提取液，待上柱用；（2）大孔吸附树脂分离纯化：①?选择大孔吸附树脂；②?吸附：上柱岗松提取液浓度为0.3－0.8g生药量/mL，上柱岗松提取液体积为填充大孔吸附树脂体积的2－5倍，上柱流速为0.5－2?BV/h；③?洗脱：洗脱剂为50－70%乙醇，洗脱剂用量为填充大孔吸附树脂体积的5－10倍，洗脱流速为2－5?BV/h；收集5－8倍洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，60℃真空干燥，即得岗松总黄酮提取物。

【技术特征摘要】
1.一种岗松总黄酮的制备方法，其特征在于所述的岗松总黄酮的制备方法包括以下步骤(1)乙醇加热回流提取①取岗松干燥茎叶，粉碎，按重量加10- 15倍量30 - 70%体积浓度的乙醇；②加热回流提取3次，每次I一 3小时，滤过，合并滤液；③滤液回收乙醇，并浓缩至无乙醇味，加水稀释至浓度为O.3 — O. 8g生药量/mL的岗松提取液，待上柱用；(2)大孔吸附树脂分离纯化①选择大孔吸附树脂；②吸附上柱岗松提取液浓度为O.3 — O. 8g生药量/mL，上柱岗松提取液体积为填充大孔吸附树脂体积的2 — 5倍，上柱流速为O. 5 — 2 BV/h ；③洗脱洗脱剂为50- 70%乙醇，洗脱剂用量为填充大孔吸附树脂体积的5 - 10倍， 洗脱流速为2 - 5 BV/h ;收集5 — 8倍洗脱液，减压回收乙醇，浓缩至干，60°C真空干燥，即得岗松总黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的岗松总黄酮的质量控制方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂选择弱极性的AB-8或DlOl大孔吸附树脂。3.根据权利要求1所述的岗松总黄酮的质量控制方法，其特征在于所述的总黄酮的薄层色谱定性鉴别是取岗松总黄酮提取物约20mg，精密称定，置IOmL量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，另取芦丁对照品适量，加甲醇制成每ImL含 Img的溶液，作为对照品...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘布鸣，邱宏聪，黄艳，林霄，孙翠，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中医药研究院，
类型：发明
国别省市：