一种黄鳝精子稀释液及制备方法，它由氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钙、磷酸氢二钠比例制成,步骤:A、精子稀释液母液的配制：每毫升含氯化钠1mmol、含氯化钾1mmol、含碳酸氢钠1mmol、含氯化钙0.5mmol、含磷酸氢二钠0.5mmol的母液，根据母液的浓度、体积和磷酸氢二钠分子量计算出配制母液的磷酸氢二钠重量，称取磷酸氢二钠，将磷酸氢二钠放入烧杯中，母液放置冰箱保存；B、精子稀释液的配制：从各组分母液中量取配制稀释液，根据稀释液配方中各组分的浓度、稀释液体积，计算，将各组分混合均匀，配制的稀释液在瓶中混匀，用蒸馏水定容，配制的稀释液放置冰箱保存，备用。配方合理，使用方便，适合对黄鳝精子的稀释，有效稀释精子，降低人工授精成本，提高受精率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及黄鳝的精子
，更具体涉及一种黄鳝精子稀释液，同时还涉及一种黄鳝精子稀释液的制备方法，适合所有黄鳝品种。
技术介绍
黄鳝(Monopterus albus)为亚热带鱼类,又名鳝鱼、罗鱼、田鳝、长鱼、黄参、无鳞公子、田参等，隶属于合鳃目、合鳃科；合鳃目中全世界只有I个种，即黄鳝。广泛分布于东南亚的日本、泰国、印度尼西亚、菲律宾、马来西亚、印度、日本、朝鲜和我国等，我国除青藏高原以外均有分布，尤以长江中下游地区，分布密度大，产量高，是一种重要的经济鱼类。为了能进一步开展黄鳝的新品种选育，以及黄鳝的人工繁殖，为市场提供更优质的黄鳝新品种和苗种，需要进行黄鳝精子超低温保存和人工繁殖。然而，无论是精子的超低温保存，还是进行人工繁殖，都需要一种稀释液对黄鳝精子进行稀释。这是因为黄鳝精液中所含精子的密度很高，一般可以达到1. Γ1. 8X IO9个/ml。当对黄鳝精子进行超低温保存时，含高密度精子的精原液是不能直接进行超低温冷冻保存的。因为在冷冻过程中，当温度降到0°C 一 20°C区间时，被保存的精液中会形成冰晶，冰晶像锋利的刀一样刺向四周的精子，将精子刺破。精液中的精子密度越高，精子被刺破的概率也越高。这种在冷冻过程中冰晶对精子的物理损伤将直接导致精子超低温冷冻保存的失败。因此，冷冻前必须要对精子进行稀释，这就需要有一种适合黄鳝精子的精子稀释液。而在进行人工繁殖时，由于黄鳝精液中含精子的密度很高，且精液量很少，如果直接用来进行人工授精，不仅对非常宝贵的精液是一种浪费，而且，因为精子密度过高，精液的黏稠度增加，使精子不易与卵子混合均匀， 从而导致授精效果也不好。如果对精液进行稀释后，再用来进行 人工授精，可大大降低人工授精的成本，同时还能起到很好的授精效果，获得较高的受精率。因此，黄鳝精子稀释液的作用就是在不激活精子的前提下，对精子进行稀释，使精子尽可能的保持其原有的生物学特性。然而，精子稀释液是有一定要求的。每种鱼类的精子都有自己一定的渗透压，不同种鱼类的渗透压是不同的。鱼类的精子在未遇见水或其它溶液前始终处在休眠状态，淡水鱼类只有在遇见低于自己渗透压的溶液或淡水时才能被激活，而海水鱼类则要遇见高于自己渗透压的溶液或海水时才能被激活。精子一旦被激活，很快会衰减死亡。精子的寿命一般很短，短的只有几十秒，长的也就几十分钟。要想对精子进行稀释，首先要保证精子在稀释液中不会被激活。这就要求每种鱼的精子稀释液必须与这种鱼的精液渗透压尽可能的相等。稀释液的渗透压是由稀释液中的离子浓度总和决定的，不同浓度的稀释液就有不同的渗透压，调节稀释液中的离子浓度就能调节这种稀释液的渗透压，从而达到与精液等渗的效果。除此之外，稀释液中不同的离子成分对精子又有不同的作用。如稀释液中的Na离子主要是起调节稀释液渗透压的作用；K离子起着改变精子膜表面通透性的作用；Ca、Mg离子则起着增加或降低精子运动速度的作用；而CO3离子则起着调节稀释液pH的作用等。除此之外，有报道显示葡萄糖等大分子类溶质除了起到调节渗透压的作用外，还具有提供精子能量的作用。因此，不同的鱼不仅稀释液浓度完全不同，而且，根据精子的生物学特性，其离子成分也会有很大差异。
技术实现思路
本专利技术的目的是在于提供了一种黄鳝精子稀释液，配方合理，使用方便，适合对黄鳝精子的稀释，是黄鳝精子超低温保存和进行人工授精所必须的一种溶液。在黄鳝精子超低温保存过程中，可确保精子不会被激活，并最大限度降低冰晶对精子的损伤。在进行黄鳝人工授精过程中，可有效稀释精子，降低人工授精成本，提闻受:精率。本专利技术的另一个目的是在于提供了一种黄鳝精子稀释液的制备方法，方法易行， 操作简便，适合配制各种体积的稀释液，可确保所配制稀释液中个组分浓度的准确性。为了实现上述的目的，本专利技术采用以下技术措施一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成 一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成(较好范围)权利要求1.一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成氯化钠氯化钾碳酸氢钠氯化钙重量份 155. O- 175. Ommol/L磷酸氢二钠稀释液渗透压为326. 6 390. 2m0sM, pH为7. 5-8. 5 ；一种黄鳝精子稀释液的制备方法，其步骤是A、精子稀释液母液的配制(1)每毫升含氯化钠Immol的母液根据母液的浓度、体积和氯化钠分子量计算出配制母液需要的氯化钠重量，称取氯化钠，将氯化钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钠充分溶解，将溶解后的氯化钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中， 用5 10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(2)每毫升含氯化钾Immol的母液根据母液的浓度、体积和氯化钾分子量计算出配制母液需要的氯化钾重量，称取氯化钾，将氯化钾放入烧杯中，加入母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钾充分溶解，将溶解后的氯化钾溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用 5^10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(3)每毫升含碳酸氢钠Immol的母液根据母液的浓度、体积和碳酸氢钠分子量计算出配制母液的碳酸氢钠重量，称取碳酸氢钠，将碳酸氢钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使碳酸氢钠充分溶解，将溶解后的碳酸氢钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用^lOml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(4)每毫升含氯化钙O.5mmol的母液根据母液的浓度、体积和氯化钙分子量计算出配制母液需要的氯化钙重量，称取的氯化钙，将氯化钙放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钙充分溶解，将溶解后的氯化钙溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用^lOml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(5)每毫升含磷酸氢二钠O.5mmol的母液根据母液的浓度、体积和磷酸氢二钠分子量计算出配制母液的磷酸氢二钠重量，称取磷酸氢二钠，将磷酸氢二钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使磷酸氢二钠充分溶解，将溶解后的磷酸氢二钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5 10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(6)上述母液均放置4°C冰箱保存；精子稀释液的配制(I)用微量取样器从各组分母液中量取配制稀释液，量取各组分的体积根据稀释液配方中各组分的浓度、各组分母液的浓度、以及配制的稀释液体积，按如下公式计算量取体积=配方浓度X稀释液体积+母液浓度；(2)将氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钙、磷酸氢二钠各组分混合均匀，配制的稀释液体积100ml，在体积的容量瓶中混匀，然后用蒸馏水定容至容量瓶刻度；(3)配制好的稀释液放置4°C冰箱保存，备用。2.根据权利要求1所述的一种黄鳝精子稀释液，其特征在于原料重量份氯化钠157. 5-172. 5mmol/L氯化钾5. 75-7. 25mmol/L碳酸氧纳4. 25-5. 7Smmol/I,氯化I丐1. 1-1. Qmmol /I,憐酸氢!二纳O. 45- O. 7Smmol /I,稀释液渗透压为343. 7 3本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成：????原料???????????????????????????重量份氯化钠????????????????????????155.0??175.0mmol/L氯化钾????????????????????????5.5?7.5mmol/L碳酸氢钠?????????????????????????????????4.0??6.0?mmol/L氯化钙????????????????????????????????1.0??2.0mmol/L磷酸氢二钠 ??0.4??0.8mmol/L稀释液渗透压为326.6~390.2mOsM，pH为7.5?8.5；一种黄鳝精子稀释液的制备方法，其步骤是：A、精子稀释液母液的配制：(1)?每毫升含氯化钠1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化钠分子量计算出配制母液需要的氯化钠重量，称取氯化钠，将氯化钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钠充分溶解，将溶解后的氯化钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5~10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(2)?每毫升含氯化钾1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化钾分子量计算出配制母液需要的氯化钾重量，称取氯化钾，将氯化钾放入烧杯中，加入母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钾充分溶解，将溶解后的氯化钾溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5~10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(3)?每毫升含碳酸氢钠1mmol的母液：根据母液的浓度、体积和碳酸氢钠分子量计算出配制母液的碳酸氢钠重量，称取碳酸氢钠?，将碳酸氢钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使碳酸氢钠充分溶解，将溶解后的碳酸氢钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5~10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(4)?每毫升含氯化钙0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和氯化钙分子量计算出配制母液需要的氯化钙重量，称取的氯化钙，将氯化钙放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使氯化钙充分溶解，将溶解后的氯化钙溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5~10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(5)?每毫升含磷酸氢二钠0.5mmol的母液：根据母液的浓度、体积和磷酸氢二钠分子量计算出配制母液的磷酸氢二钠重量，称取磷酸氢二钠，将磷酸氢二钠放入烧杯中，加入配制母液体积二分之一的蒸馏水，使磷酸氢二钠充分溶解，将溶解后的磷酸氢二钠溶液倒入配制母液同样体积的容量瓶中，用5~10ml蒸馏水洗涤3次烧杯，将洗涤后的蒸馏水也倒入容量瓶，最后用蒸馏水定容至容量瓶刻度处；(6)?上述母液均放置4℃冰箱保存；精子稀释液的配制：?(1)?用微量取样器从各组分母液中量取配制稀释液，量取各组分的体积根据稀释液配方中各组分的浓度、各组分母液的浓度、以及配制的稀释液体积，按如下公式计算：量取体积＝配方浓度×稀释液体积÷母液浓度；(2)?将氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钙、磷酸氢二钠各组分混合均匀，配制的稀释液体积100ml，在体积的容量瓶中混匀，然后用蒸馏水定容至容量瓶刻度；(3)?配制好的稀释液放置4℃冰箱保存，备用。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：柳凌，朱祥云，张洁明，郭峰，张涛，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院长江水产研究所，
类型：发明
国别省市：
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