一种制备鹧鸪花物B的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备鹧鸪花物B的方法。它是将罗卡鹧鸪花茎皮作为原料，采用乙醇水溶液渗漉提取，所得提取液浓缩后，先用乙酸乙酯-水体系分配，取上相减压回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取物，将乙酸乙酯萃取物再用庚烷-甲醇体系分配，取下相减压浓缩得到甲醇萃取物，通过硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯洗脱梯度洗脱，TLC跟踪监测，收集含鹧鸪花物B的流分，再经葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇混合溶剂为洗脱剂进行洗脱，得到鹧鸪花物B产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药化学
，涉及ー种制备鹧鸪花物B的方法。
技术介绍
鹤聘花物B是从楝科(Meliaceae)植物罗卡鹤聘花roka Chiov.的茎皮中分离得到的ー种三萜类化合物，呈白色无定形固体状。分子式为C35H44O14，分子量为688. 72，目前对鹧鸪花物B的研究较少，1984年学者通过药理实验发现鹧鸪花物B具有昆虫拒食活性,在200ppm时对日本疫病昆虫根切虫的幼虫 有拒食活性；另外还发现鹧鸪花物B对DNA修复缺损酵母株RS322K (rad 52Y)有中等抑制作用，其IC5tl为13 μ g/ml。目前，尚无大量制备鹧鸪花物B的エ业化方法报道和专利公开。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备鹧鸪花物B的方法。本专利技术提供的从罗卡鹧鸪花茎皮中提取制备鹧鸪花物B的方法步骤如下(1)将罗卡鹧鸪花茎皮粉碎，用こ醇水溶液渗漉提取，将提取液减压浓缩得到浸膏； (2)将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液溶解，过滤，こ酸こ酯和水的体积比为10:1，滤液静置分层15-28h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物； (3)将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液溶解，过滤，庚烷和甲醇的体积比为2:1，滤液静置分层5-8h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物； (4)甲醇萃取物通过硅胶柱层析，以石油醚-こ酸こ酯为洗脱剂进行梯度洗脱，将含有鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，得到鹧鸪花物B。步骤(I)中所述こ醇水溶液为体积百分比为60-85%的こ醇水溶液,其用量是所用药材重量的5-15倍，药材的浸泡时间为2-8小吋，渗漉提取时间为2-5小吋。步骤(4)中所述石油醚-こ酸こ酯梯度洗脱是按石油醚-こ酸こ酯体积比5: I、3:1、1:1、1:2进行梯度洗脱。本专利技术的特点在于通过こ酸こ酷-水和庚烷-甲醇体系的分配，可提高鹧鸪花物B的萃取率；经硅胶柱和葡聚糖凝胶柱层析，可得到高纯度的鹧鸪花物B，本专利技术的鹧鸪花物B的制备方法，具有提取エ艺简单，成本低、提率高，制备得到的鹧鸪花物B单体纯度高等特点，适用于エ业化生产。具体实施例方式 下面结合实施例对本专利技术作进ー步阐述，但本专利技术不限于此。实施例I : 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量60%こ醇浸泡4小吋，再用原料重量5倍的60%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为4小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液(こ酸こ酯和水的体积比为10:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层15h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物。将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液(庚烷和甲醇的体积比为2:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层8h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析(甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:3)，按石油醚-こ酸こ酯体积比5:1、3:1、1:1、1:2进行梯度洗脱，每个梯度用量为600ml，收集含鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，洗脱液减压浓缩干燥得到鹧鸪花物B119mg，纯度为90. 8%。实施例2: 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量80%こ醇浸泡2小吋，再用原料重量8倍的80%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为2小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液(こ酸こ酯和水的体积比为10:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层28h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物。将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液(庚烷和甲醇的体积比为2:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层6h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析(甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:3)，按石油醚-こ酸こ酯体积比5:1、3:1、1:1、1:2进行梯度洗脱，每个梯度用量为 600ml，收集含鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，洗脱液减压浓缩干燥得到鹧鸪花物B103mg，纯度为93. 6%。实施例3: 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量65%こ醇浸泡8小吋，再用原料重量10倍的65%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为5小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液(こ酸こ酯和水的体积比为10:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层20h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物。将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液(庚烷和甲醇的体积比为2:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层7h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析(甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:3)，按石油醚-こ酸こ酯体积比5:1、3:1、1:1、1:2进行梯度洗脱，每个梯度用量为600ml，收集含鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，洗脱液减压浓缩干燥得到鹧鸪花物B125mg，纯度为90. 5%。实施例4: 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量70%こ醇浸泡6小吋，再用原料重量12倍的70%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为3小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液(こ酸こ酯和水的体积比为10:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层18h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物。将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液(庚烷和甲醇的体积比为2:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层5h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析(甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:3)，按石油醚-こ酸こ酯体积比5:1、3:1、1:1、1:2进行梯度洗脱，每个梯度用量为600ml，收集含鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，洗脱液减压浓缩干燥得到鹧鸪花物B113mg，纯度为91. 2%。实施例5 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量60%こ醇浸泡2小吋，再用原料重量15倍的60%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为5小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶液(こ酸こ酯和水的体积比为10:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层22h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到こ酸こ酯萃取物。将こ酸こ酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液(庚烷和甲醇的体积比为2:1)搅拌溶解，过滤，滤液静置分层5h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物。将甲醇萃取物通过硅胶柱层析(甲醇萃取物与硅胶用量之比为1:3)，按石油醚-こ酸こ酯体积比5:1、3:1、I: I、1:2进行梯度洗脱，每个梯度用量为600ml，收集含鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以ニ氯甲烷-甲醇体积比为4:1的混合溶液进ー步洗脱纯化，洗脱液减压浓缩干燥得到鹧鸪花物BllOmg，纯度为92. 3%。实施例6: 将50kg干燥的罗卡鹧鸪花茎皮粉碎成粗粉，先用少量85%こ醇浸泡2小吋，再用原料重量15倍的85%こ醇水溶液渗漉提取，提取时间为8小吋，收集渗漉液浓缩得到浸膏。将浸膏用こ酸こ酯和水的混合溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备鹧鸪花物B的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）将罗卡鹧鸪花茎皮粉碎，用乙醇水溶液渗漉提取，将提取液减压浓缩得到浸膏；（2）将浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液溶解，过滤，乙酸乙酯和水的体积比为10:1，滤液静置分层15？28h，分液，取上相，减压浓缩蒸干得到乙酸乙酯萃取物；（3）将乙酸乙酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液溶解，过滤，庚烷和甲醇的体积比为2:1，滤液静置分层5？8h，分液，取下相，减压浓缩蒸干得到甲醇萃取物；（4）甲醇萃取物通过硅胶柱层析，以石油醚？乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱，将含有鹧鸪花物B的流分通过葡聚糖凝胶柱色谱，以二氯甲烷？甲醇体积比为4:1的混合溶液进一步洗脱纯化，得到鹧鸪花物B。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：苏刘花，
申请(专利权)人：南京泽朗农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：