一种妇科洗液中苦参碱含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种妇科洗液中苦参碱含量的测定方法，取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的苦参碱标准溶液，用微孔滤膜过滤，备用；取苦参提取物原料0.25g，超声溶解于流动相溶液，定容至100ml，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得苦参提取物供试品溶液；取洗液样品1ml，溶解于流动相溶液，定容至100ml；摇匀，用微孔滤膜过滤，即得洗液供试品溶液；各取10μl的苦参提取物供试品溶液、洗液供试品和苦参碱标准液注入液相色谱仪，测定。本发明专利技术的有益效果：提供了一种妇科洗液中有效成分——苦参碱含量的高效液相色谱检验法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种苦参碱含量测定方法，特别涉及一种妇科洗液中的有效成分一苦参碱的测定方法。
技术介绍
苦参碱为豆科植物苦参、苦豆子和山豆根含有的生物碱之一，临床主要用来治疗肝病、心脏病、癌症及病原性感染等。目前苦参碱含量的测定方法有薄层扫描法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、气相色谱法、微流控芯片分析法等。高效液相色谱法多采用氨基柱、离子交换柱，洗脱方式也多为梯度洗脱，由于氨基住、离子交换柱造价高、寿命短、保养困难，其他方法操作过程繁琐、重复性差、分析时间长、供试品处理麻烦等，所以很难达到准确测定其中苦参碱的含量的目的，从而造成妇科洗液的可控性差。 以下是部分专利及文献的公开报道。“清柏洁身洗液中苦参碱含量的测定方法”，专利申请号200610060119. 3，公开号CN101046467A，包括以下步骤制备对照品溶液精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇配制成O. 0Γ0. lmg/ml的溶液；制备供试品溶液精密量取供试品5 20ml，加浓俺试液O.25^1ml，用氯仿振摇提取3次以上，每次15 20ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加约5ml氯仿溶解，装入I 5g、8(T200目的碱性氧化铝柱，用2 10份氯仿0 2份甲醇溶液l(T50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液即得；吸取对照品及供试品溶液5 40ml，注入液相色谱仪测定，计算得出结果。“苦参碱液相色谱测定方法”，申请号200810205059. 9，公开号CN101458235A ；包括以下步骤取苦参碱样品10mg，用甲醇定溶于容量瓶中，超声溶解得供试品样品；取苦参碱对照品5mg，用甲醇定溶于容量瓶中，超声溶解得苦参碱标准液；各取10μ I的供试品溶液和苦参碱标准液注入液相色谱仪进行测定；记录峰面积，按外标法以峰面积I对苦参碱含量X计算回归方程，获得所述的回归方程为y=l. 32 X IO6X-L 16 X IO5 相关系数为O. 9996，线性范围为O. 32^1. 92 μ g ;根据以上步骤测定精密度、24小时稳定性、重现性以及回收率测定。郭东艳等对复方苦参洗剂中苦参碱的含量测定，具体方法为采用ODS C18柱(5 μ m , 4. 6mm X 200mm ),流动相为乙腈-O. I %磷酸(55: 94. 5),检测波长为210nm,流速为I. Oml · mirT1,柱温室温。张成志的苦参片中苦参碱含量的反相高效液相色谱测定，具体方法为采用高效液相色谱法，色谱柱为ODS C18烷基硅烷化色谱柱，甲醇一O. 05%三乙氨水溶液为流动相(60 :40,流速 I. OmL · mirT1,检测波长210nm,柱温40°C。肖淼生等用高效液相色谱法测定妇安消疹洗液中苦参碱的含量，具体方法为色谱柱为Phenomenex Luna C18 ( 150 mmX 4. 6mm, 5 μ m )不镑钢柱；流动相为乙腈-0.02mol · L—1磷酸二氢钾(60:40);流速为Iml ^mirT1 ;检测波长为210 nm。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述技术中存在的不足之处，提供， 取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每Iml含O. 2mg的苦参碱标准溶液，用微孔滤膜过滤，备用； 取苦参提取物原料O. 25g，超声溶解于流动相溶液，定容至100 ml，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得苦参提取物供试品溶液； 取洗液样品I ml，溶解于流动相溶液，定容至100 ml ;摇匀，用微孔滤膜过滤，即得洗液供试品溶液； 各取10 μ I的苦参提取物供试品溶液、洗液供试品和苦参碱标准液注入液相色谱仪，测定。本专利技术的有益效果提供了一种妇科洗液中有效成分——苦参碱含量的高效液相色谱检验法。附图说明图I是本专利技术实施例的苦参碱标准品图谱。图2是本专利技术实施例的苦参提取物供试品图谱。图3是本专利技术实施例的洗液供试品图谱。图4是本专利技术实施例的苦参碱标准品图谱。图5是本专利技术实施例的苦参提取物供试品图谱。图6是本专利技术实施例的洗液供试品图谱。图7是本专利技术实施例的苦参碱标准品图谱。图8是本专利技术实施例的苦参提取物供试品图谱。图9是本专利技术实施例的洗液供试品图谱。具体实施例方式以下结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。实施例I。一.实施仪器与试剂 Aglientl200高效液相色谱仪，Lichrospher C18色谱柱(4. 6*250mm, 5um)。色谱纯甲醇、异丙醇，苦参碱标准品。二.色谱条件 分析柱C18(4.6*250mm，5um)色谱柱，流动相甲醇:异丙醇水:氨水=52:3:45:0. 02(体积比)；流速1. Oml/min检测波长为220nm。柱温室温；理论塔板数不低于9000，进样量10 μ I。三.检测步骤 I.取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每Iml含O. 2mg的苦参碱标准溶液，用微孔滤膜过滤，备用； 2.取苦参提取物原料O.25g，超声溶解于流动相溶液，定容至100 ml，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得苦参提取物供试品溶液； 3.取洗液样品Iml，溶解于流动相溶液，定容至100 ml。摇匀，用微孔滤膜过滤，即得洗液供试品溶液； 4.各取10μ I的苦参提取物供试品溶液、洗液供试品和苦参碱标准液注入液相色谱仪，测定。保留时间:1L5 lL9min之间(图1-3)。四.计算将测得两个供试品溶液按外标法以峰面积对苦参碱含量计算 Hl1=Hlp · S1Zsp m2=mp · s2 · 100/sp 式中=Hi1苦参提取物供试品溶液苦参碱浓度，mg/ml mp苦参碱标准品浓度，mg/ml S1苦参提取物供试品样品峰面积 Sp苦参碱标准品峰面积， m2洗液样品中苦参碱含量，mg/ml S2洗液供试样品峰面积。实施例2，苦参碱含量检测的其他方法。l.Aglientl200高效液相色谱仪，氨基键合色谱柱。色谱纯乙腈、无水乙醇，磷酸，苦参碱标准品。2.分析柱氨基键合色谱柱，流动相乙腈无水乙醇3%磷酸溶液=80 :10:10(体积比)；流速1. Oml/min检测波长为220nm。柱温室温；理论塔板数不低于2000，进样量20 μ I。3.取苦参碱对照品适量，精密称定，加乙腈-无水乙醇(80 20)混合溶液制成每Iml含苦参碱50 μ g的苦参碱标准溶液，用微孔滤膜过滤，备用； 4.取苦参提取物原料约O.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液O. 5-lml，密塞放置10分钟，精密加入三氯甲烷50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz )30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱(100 200目，5g，内径Icm)上，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(7 3)混合溶液各20ml洗脱，合并收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转移至IOml量瓶中，加无水乙醇至刻度， 摇匀，用微孔滤膜过滤，即得苦参提取物供试品溶液； 5.取洗液10ml，真空干燥或水浴蒸干，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液O. 5-lml，密塞放置10分钟，精密加入三氯甲烷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种妇科洗液中苦参碱含量的测定方法，取苦参碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.2mg的苦参碱标准溶液，用微孔滤膜过滤，备用；取苦参提取物原料0.25g，超声溶解于流动相溶液，定容至100？ml，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得苦参提取物供试品溶液；取洗液样品1？ml，溶解于流动相溶液，定容至100？ml；摇匀，用微孔滤膜过滤，即得洗液供试品溶液；各取10？20μl的苦参提取物供试品溶液、洗液供试品和苦参碱标准液注入液相色谱仪，测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：董婧婧，乐智勇，夏培元，刘丽玲，
申请(专利权)人：江苏仁寿药业有限公司，
类型：发明
国别省市：